全 文 ：第 10卷 第 6期 上 海 第 一 医 学 院学 报 V o l .10, N o . 6
1 9 8 3 年 人 C T A A C A I ) E M 丁A瓦 M E D I C工N A E P R 丁V A和 S H A N G耳 A T 1 9 8 3
刀豆素 A诱导小鼠抑制性
细胞的体外研究
吴厚生 吴慧芳 朱宝年 朱伟民, 顾金兰 吕 屏” 唐盛甫 何球藻
( L海第一医学院基础医学部病理生理学教研室 )
提要 我们研究了刀豆素 A ( oC n A ) 在体外诱导小鼠脾脏抑制性细胞所需的最适当剂量 ,
发现约 0 . 7 8雌 / m l 或 50 秘郎m l 的浓度对大多数小鼠能诱导出以抑制性功能为主的细胞 , 这
些细胞能抑制正常淋巴细胞 (应答细胞 )对促有丝分裂原的增生反应。 6 . 25 ~ 12 . 50 种 gm/ l的
co
n A 所诱导的脾细胞能增强应答细胞对促有丝分裂原的增生反应。 未经 C o n A诱导的脾细胞
(对照细胞 )可抑制或增强应答细胞对促有丝分裂原的增生反应。 通常检测抑制性功能 是应用
相对抑制率来表示 ,但是它不能真实地反映 Con A 诱导细胞的功能 。 我们建议增加绝对抑制率
的指标 , 因它能反映 C on A 诱导细胞的真实功能 。 这两种表示方法可以相互补充。
T 抑制细胞 ( T的在调节免疫反应中起着十分重要的作用 , T , 细胞功能失常 与免 疫
性疾病的发生和发展密功相关 。 诱导 T , 细胞有利于同种移植物的存活和 自身免疫病 的
治疗。 诱导 T s 细胞方法众多山 , D u 七协n 即 首先报告 C o n A 诱导的小鼠脾细胞能强 烈 抑
制小鼠 B 细胞产生绵羊红细胞的抗体。 以后进一步证明 , C o n A 诱导的抑制性细胞是来
自胸腺带有 L y Z 、 3 + 抗原标志的 T 细胞 〔3, ` , 。
C o n A 也能激活人外周 血 中含有 T H Z+ 抗 原 的 T s 细 胞 5[] , hs o u 等 61[ 首先证 明
C o n A 诱导的人外周血淋巴细胞能抑制正常人淋巴细胞对促有丝分裂原 、 抗原和同 种 异
型抗原的增生反应和抑制 B 细胞的溶血空斑形成 。 近年来用此方法 已证明在系统性红斑
狼疮 71[ 、 慢性活动性肝炎 8jL 、 自身免疫性溶血性贫血 9[J 、 活动性慢性淋巴性 白血病助 , 、 青
少年型类风湿性关节炎以 , 等疾病时 , sT 细胞功能低下 , 何杰金病 时 , T s 细胞 功 能 增
加〔` , , 。
本文报道诱导小鼠抑制性细胞的 o o n A 剂量 以及正确判断抑制性细胞功能 的方 法 ,
并认为用绝对抑制率的方法可用来补充通常所用相对抑制率的不足 。
材 料 和 方 法
一 、 实验动物 采 用 近 交 系 小 鼠以 8 , : 6 1 5` H一 , . ,、 SW I 、 C 57 B L ` H一 , 6 , 、 B G I ( H一 , , )。
SW I 为我室培育的品系 , 其余小鼠系我院动物房培育和引进繁殖的 。
二 、 调节细胞培养和制备 取小鼠脾脏 , 制成细胞悬液 , 经蒸馏水破坏红细胞后以〕 ,
任 上海医学检验所 ” 上海市静安区中心医院
上 海 第 一 医 学 院 学 报 10卷
用含 10界小牛血清 ( FC S)和青霉素 l o U /m l、 链霉素 1 0鳍 /m l的 R P M工 1 640液 (培
养液 )调节成 2 ~5 x 1 0” 个细胞 /m l的悬液 , 等量分装数瓶 , 一瓶不加 C o n A 作为对照细
胞 , 其余各瓶加不同浓度 C O n A 诱导细胞称调节细胞 。 细胞放在 3 o7 C 培养 4 小时 。
培养终止时 , 吸出上清液 , 高浓度 C o n A ( > 12 . 5雌 /m l) 诱导的细胞用含 0 . I M 甲基
甘 露 糖 昔 ( 2一m e恤y se D 一m a n n os ide ) 和 5多F oS 的 H a n ks 液洗涤 两 次 , 第 三 次 用含
石界F C S H an ks 液洗涤 , 每次洗涤需经 50 0 9 离心 5 分钟 。 C o n A 在 12 . 5雌 /m l 以下 浓
度所诱导的细胞只用含 5界F C S H an k s 液按上述洗三次 。 最后 , 用台盼蓝液染色 , 分别计
数死 、 活细胞 , 按活细胞数用培养液调整到 2 x l护 个细胞 / m l 浓度 。 部分实验 用 ” “ 钻
20 0 拉德照射细胞或用 2 5 ” g / m l 丝裂霉素 0 (37 ℃ 、 30 分钟 )处理细胞 , 处理后用培养
液洗涤两次 , 恢复到 2 只 1 0” 个细胞 /m l 浓度 。 实验时 , 在反应系统中每孔加入上述细胞
悬液 1 0 0 灿l 。
三 、 抑制性细胞功能测定 实验是在收集调节细胞的当天进行 , 以应答细胞对促有
丝分裂原的增生反应程度作为指标来观察调节细胞的功能。
1
. 应答细胞制备 : 采用与调节细胞同一品系的淋巴结细胞以 , 作应答细胞 , 用培养液
调整到 2 x l护 个细胞 / m l , 实验用 9 6 孔平底塑料微板培养 , 每孔加细胞悬液 1 0 0琳 。
2
. 促有丝分裂原的剂量 : 每孔分别加入不同的促有丝分裂原 1如 l , 含 0皿A (本 院
生物化学教研室制备 ) 1 . 2 5雌 或 P H A (本室 自制 ) 8雌 或大肠杆菌脂多糖 ( L SP ) 5雌 。
上述细胞置于 3俨C 湿度饱和的 5界0 0二 空气温箱中培养 72 小时 。
3
. 琳 巴细胞增生反应的测量 〔15J : 终止培养前 16 小时 , 每孔加入 氖 化 脱氧胸昔
(
S
H
一d T ) 1琳 (含 0 . 5 护q , 上海原子核研究所制品 , 比活性 3 01 /m M ) 。 培养终止时用微
量多头细胞收集器把细胞收集在玻璃纤维滤条上 , 烘干后取出所需滤片 , 在 L K B 液体闪
烁计数仪上进行 自动测量和记录 。 每一样本的放射量以每分钟计数值 (oP m )表示 。 每一
组实验至少有三个复管 , 以 oP m (历士召刀 ) 表示 。
淋巴细胞增生反应的抑制率用下列公式计算 (以 C o n A 反应为例 ) :
绝对抑制率 (多)
` 一碘撮袋婴寨编黯黔器丽卜10 (1)
相对抑制率 (多)
一卜一 {麟黔豁窝瑞黔鉴镖粼黔黯
在用射线或丝裂霉素 O 处理调节细胞时 , 仍按公式 (1) 、 (2) 计算。
反应 , “ 一 ’ ,值表示增强反应 。 士 20 多 为正常范围。
旦卫些目1、 , o ( 2 )
o P I n J
“ 十 ” 值表示抑制
实 验 结 果
一、 预先培养的对照脾细胞对同系应答细胞增生反应的影响 : 以往的文献报告 中
大多只注意到 o o n A 诱导细胞的调节功能 , 较少注意不用 C o n A 诱导的细胞功能改变。 我
们研究了 1 8 例预先培养 4 4 小时的对照脾细胞的功能 , 发现有 1 4 例对照细胞功能发生明
6 期 刀豆素 A 诱导小鼠抑制性细胞的体外研究 生 29
表 l 对照细胞抑制应答细胞对促有丝分裂原的增生反应
小鼠品系 促有
丝分
裂原 对照细胞份 应答细胞加对照细胞
绝对抑制率
(% )
门36271IC` 273nù7465083961 5
61 5
61 5
61 5
B G
SW I
C o nA
C o nA
卫且A
P H A
C O nA
C o nA
1 0
,
3 7 9士 64 7
1 5 9 6士 2 1 3
4 1 3 9士 2 84
2 7 3 9士 34 9
2 8
,
X() 3士 3 6 9 1
3 1 7
,
8 1 5士 8 2 6 7
c P功 (劣士召刀)
应答细胞
5 1
,
1 6 9士 4 7 2 9
4
,
0 9 0士 538
6 8
,
7 2 4士 10 5 6
1 0
,
1 3 7 :=I 性5 9
2 2 2
,
6 0 7士 57 5 3
1 2 1
,
2 1 1士 8 1 3 6
1 5
,
9 4 1士 7 57
1 6
,
34 0士 7 2 8
3 6
,
24() 士 5 1 38
2 0 9 6士 1 4 4
4 1 8 0士 1 4 7 9
2 6 7
,
7 2 0
1423
1勺力n
漪 未用 C皿 A 诱导预先培养 4 小时的脾细胞
表 2 对照细胞增强应答细胞对促有丝分裂原的增生反应
N O 小鼠品系 促有丝分 c P n (工士名刀) 绝对抑制率
裂原 (% )对照细胞开 应答细胞 应答细胞加对照细胞
1 6 1 5 C o n A 1 5 65 士 1 5 1 4 3 , 9 32 士 1 0 8 5 7 7 , 4 7 3士 8 92 0 一 7 0 . 2 8
2 6 1 5 C On A 9 1
,
4 6 1士 73 2 7 q夕 6 2 n ~ 1~ 1 fl l 只只 2 3 3 , 0 2 6土 6 7 74 一 2 6 。 5 9
3 S W I C o n A 1 5
,
6 9 1士 14 9 6 02 . 6 62 士 3 2 4 一 5盛
.
4 14 S万V l 0 5 70 1 0 5 9 24 , 8 9 1士 1 3 91 6 6 , 2 6 7 6 8 3 8 4 7 2
5 S万V l L P S 3盛, 0 04 士 2 3 1 2 5 , 3 04 士 31 0盛 5 6 , 5 1 3士 2 6 68 一 5 5 . 2 5
6 S万V l C o n A 1 0 , 1 9 1士 8 3 7 2 3 9 8士 18 1 1 0 3 , 2 51 士 1 7 , 5 5 9 一 61 1 . 6 8
7 S万V l C O刀 A 7 3 3士 2 3 4 3 1 7士 5 52 9 8 , 1 9 1士 4 78 4 一 3 40 . 30
8 8万V l ( b 刀A 2 8 , 62连士42 1 1 2 , 1 1 0士 5 0 8 1 94 , 4 7 8士 11 , 48 6 一 2 9 . 3 0
1 2 1
,
7 8 2士 3 0 5 2
开 见表 1 注解
表 3 不同浓度 C o n A 诱导的脾细胞影响应答细胞对 C o n A 的增生反应
N O
务 应答细胞加 应答细胞 + 不同浓度 bC n A 扣g /m l) 诱导的脾细胞
对照细胞 0 . 3 9 0 . 7 8 1 . 5 6 3 . 1 2 5 6 . 2 5 1 2 . 5 0 3 0 . 0 5 0 . 0
1 1 5
,
9住1 77 , 2貂 1 0 1 , 03 7 1 9 3 , 6 54 2 04 , 5 71 1 9 7 , 科 6
( 一 2 3
.
7 5 ) (45
.拐 ) ( 6 · 42 ) (一 33 . 98 ) (一 2 0 2 . 9 3 ) · (一 2 0 5 . 4 )
2 32
,
4 7 2 1 6
,
2 4 7 4 7 70 5 7
,
0 1 3 5 4
,
8 9 0 5 8
,
5 31 68
,
1妃
( 49
.
8 5 ) (5 2
.
2 3 ) ( 86
.
0 4 ) (1 7
.
4 0 ) (2
.
64 ) (一 2 1 . 2 8 ) (一 4 6 . 1 1 )
3 2 1
,
4 2 0 2 1 3 2 3 5 6 0 1 78 2 52
,盛74 1 04 , 7 9 8 1 3 6 , 8 7 4
( 65
.
2 7 ) ( 96
.鹅 ) ( 94 , 1 2 ) ( 9 7 . 0 6 ) ( 3 0 . 1 1 ) ( 一 2 4 . 5 3 ) ( 一 8 3 . 1 6 )
4 7 7
, 4 7 3 8 4
,
0 6 3 90
,
8 4 2 38
,
6 62 1 4
,
9 7 5 2 4
,
65 1 5 7
,
5 6 6
( 一 7 0 . 2 8 ) (一 8 8 . 7 3 ) (一 1 04 . 8 8 ) (1 2 . 7 5 ) ( 66 . 2 7 ) (4 . 62 ) (一 29 .红)
5 6 6
,
2 6 7 5 2
,
1 7 8 2 2
,
1 5 4
(一 8 4 . 7 2 ) (一 8 5 . 9 2 ) (46 . 32 )
6 7 5
,
3 5 0 1 5
,
93 3 8 6 8 3 2 74 9
(一 1 4 5
.
0 4 ) (2 3
.
0 5 ) ( 7
.
42 ) ( 69
.
6 6)
. 1 ~ 4 号为 6 1 5小鼠 , 5~ 6 号为 S W I 小鼠
表内数据为样本 习H刁 T 掺入量的 叩功 值 , ( )内数字为绝对抑制率
上 海 第 一 医 学 院 学 报 0 1卷
显变化 , 其中有 6 例强烈抑制应答细胞对促有丝分裂原 的增生反应 (表 功 , 有 8 例显著增
强应答细胞对促有丝分裂原的增生反应 (表 2 ) , 仅 4 例功能变化不明显 。
二、 不同剂量 C o n A 诱导的脾细胞影响应答细胞对 Oo n A 的增生 反 应 : C o n A 是
T 细胞促有丝分裂原 , 它不仅能刺激 T 辅助细胞 ( T动 , 也能刺激 T 。 和 T 杀伤细胞 ( T o)
的增生反应 。 C o n A 诱导上述细胞所需的最适浓度可能不一样。 我们 比较了每毫升细胞
悬液含 0 . 3 9 灿 g 、 0 . 7 8 种g 、 1 . 6 6雌、 3 . 1 2石户 g 、 6 . 2 5 种g 、 拐 . 5 0雌、 3 0 · o ” g 以及 5 0雌
C o n A 所诱导的脾细胞对应答细胞增生反应的影响 , 发现低浓度 (约 1 ” g /血 )和 高 浓度
(6 0昭 / m l 左右) o o n A 所诱导的淋巴细胞表现出以抑制性功能为主 , 而 6 . 2 5~ 12 . 5灿 g/
m l 的 C o n A 所诱导的细胞以辅助功能为主 (表 3 ) 。
为了确定调节细胞的抑制功能或增强功能是否可信 , 我们把一个调节细胞加入相同
品系的两个不同个体的应答细胞中 , 发现调节细胞对两个应答细胞的反应是一致的 , 有的
甚至连抑制程度都较接近 (表 4) 。 因而调节细胞的功能测定是可重复的 。
表 4 调节细胞功能测定的可重复性
N 0 应答细胞 促有丝分裂原 绝 对 抑 制 率 (% )
对照细胞 C o n A (召g/ m l) 诱导细胞
0
.
3 9 0
.
7 8 1
.
5 6
1 61 5① 上 H A 5 0 . 2 6 8 1 . 5 2 95 . 2 5 9 8 . 8 5
6 1 5② P H A 5 8 . 1 4 9 0 . 1 1 91 . 8 1 9 5 . 7 3
6 1 5① 〔七n A 6 5 . 2 7 9 6 . 4 8 94 . 1 2 9 7 . 0 6
6」一 5② C o n A 8 1 . 0 3 8 3 . 6 8 9 5 . 6 2 9 7 . 0 7
2 6 1 5③ oC n A 一 0 . 9 8 8 2 . 9 3 8 8 . 9 2 73 . 5 4
6 ]石④ 〔七n A 一 2 6 。 5 9 8 1 . 8 9 8 7 . 8 4 7 6 . 92
6 1 5③ P H A 一 1 3 . 4 3 6 1 。 0 0 5 8 . 1 1 31 . 9 4
61 5④ P H A 一 2 7 。 7 2 6 6 。 1 3 3 1 。 6 0 1 0 . 2 0
三 、 低浓度 C o n A 诱导的脾细胞对应答细胞增生反应的抑制作用 : 从上述实 验 中
观察到低浓度和高浓度 C o n A 都能诱导抑制性细胞 , 但高浓度时死亡细胞过多 , 活细胞
回收率显著降低 , 因而我们选择 0 . 7 8 户g /m l 浓度的 C o n A 对不同品系小鼠脾细胞进行诱
导试验 , 在 1 6 例实验中 (表动 , 从绝对抑制率来看 ) 有 1 0 例调节细胞强烈抑制应答细胞
对 C o n A 的增生反应 , 1 例变化不明显 , 5 例能增强应答细胞对 O o n A 的增生反应 。 从相
对抑制率来看 , 有 12 例调节细胞产生显著的抑制反应 , 3 例变化不明显 , 仅 1 例呈增强反
应 。
四 、 低浓度 o o n A 诱导细胞的上清液对应答细胞增生反应的抑制作用: , 我们在 已
经确定了低浓度 C o n A 诱导的两个小鼠脾细胞 ( 6 1 5 、 G 5 7 B L ) 具有强烈抑制作用 以后 ,
进一步观察这两个细胞培养的上清液的抑制作用 。 实验采用 C o n A 或 L SP 刺激应 答细
胞的反应系统 , 每孔加入 50 夙 (占总液量 20 界) 四种不同的上清液 : ( 1) 新 鲜 培养液 ;
(2 ) 含 0 . 7 8 灿g / m l C o o A 无细胞培养 4 小时的上清液 ; ( 3 ) 0 . 78 雌 / m l o o n A 诱导 61 5
细胞的上清液 ; (匀 C o n A 诱导 C57 B L 细胞的上清液 。 实验表明 (表 6) , 仅含 o o n A 无
6期 刀豆素 左诱导小鼠抑制性细胞的体外研究 3 4 1
表 5低浓度 Co n A诱导脾细胞抑制应答细胞对 Co n A的增生反应
一— 一 …三自兰蹬选巫…兰二一 1 > 20 %} ” 1 1 ! 21工艺相对抑制率 } 士加 %} 王 } } “ { “ -一一一一一上二二塑上 -{— !— }一一兰一一 {一一二一一 -小 计 } 0 1} 1} 5}表 6低浓度 C。 门 A诱导细胞的上清液抑制应答细胞对促有丝分裂原增生反应应答细胞 促有丝分裂原 新鲜培养液 含 。 .7 8月g /n l l Co 二 A培养 4小时的上清液
无 细 胞 61 5细胞 7 C 5L B细胞
61O 5
、 1 1八 20 9_ 6土 5十 14了 20 1 2, 6 9 7士 2 8 9 1 1 5 6 , 5 7 5士 4 6 8 4 1 6 3 , 2 4 3士 2住7生
(一 5
.
1 6 ) (2 5
.
6 9 ) ( 2 2
.
5 2 )
C 5 7 B L C O卫A 1 1 3 , 1 7 9士 1 7 7 6 1 1 6 , 4 3 4士 7 3 0 5 7 9 , 32 6士 2 7 3 5 8 4 , 6 1 1士 28 64
(一 2
.
8 8 ) (31
.
8 7 ) ( 2 7
.
3 3)
8 W I C
o 丑A 8 5 , 盛78 士 1 4 05 8 3 , 0 8 5士 1 1 , 右7 9 4 , 7 9 2士 6 6 2 6 1 , 41 1 士 1 6 4
( 2
.
8 1 ) (4 6
.
09 ) ; ( 26
.
0 9 )
61 5 L P S 1 4
,
92 1 士 9 2 6 6 9 1士 9 8 8 4 3 42 士 3 0 6
( 5 5
.
1 5 ) ( 71
.
0 2 )
C 5 7 B L L P S 42 1 5 士 5 5 5 1 3 9 0士 1 1 7 1 5必 士 1 8 6
( 6 7
.
0 2 ) ( 63
.
73 )
表内数据为 c r u l (` 士名刀 ) , ( ) 内数字为绝对抑制率
表 7 7 射线、 丝裂霉素C 对调节细胞功能的影响
C o n A 刺激应答细胞的 3H se d T 平均掺入量 (c pm )
N O
N C N C X N C m C A C A X
2 4
,
8 9 1 62
,
66 2
(一 5盛 . 4 1 )
2 1
,
8 1 8
(1 2
.
35 :
34
,
5绍
(一 38
.
7 7 )
8 6
,
8 2 9 1 9
,
5韶
C A m
28
, 肚8
(一 11 3 ·
[一 6 5 .
3 0 ) } (
2 1
·
53 )
0月 l [ 1 0 . 4 7」
(一 1荃.
〔1 7 .
9 7 )
1刃
2 5
,
3 0 4 66
,
2 6 7
( 一 8住. 7 2 )
2 9
,
2 8 5
( 一 1 5 . 7 3 )
33
,
3 3 0
(一 3 1
.
7 2 )
5 2
,
1 78
(一 3 5
.
92 )
2 2
,
84 6
(9
[2 1
71 )
_ _ _ { } 1 } 1
〔2 9 · 81〕
{
「 · 9 9〕
25
,
5 76
(1
.
0 7 )
[2 3
.
2 6 〕
拙 1 , 2 1 1 9 7 , 7 91 1 3 6 , 5 71
s
t了一407ùO.一n口
2 6 7
,
( 3 9
.
7 2 0
01 )
1 91
,
7 3 7
(一 5 5
.
4 2 ) (48
.
仁1 5 5 .
8石) { (
一 7
5妇 } 仁2 8
,九0986
一3[7 8 , 4 79 1 4 , 8 9 8
(一 1 . 7 0)
1红 , 5 82
(一 7 5
.
3 6 )
8 5
,
7 8 0
( 2 7
.
6 0 )
[4 3
.
4司
8 2 )
72〕
注 : :0 未加调节细胞 ; N C : 加对照细胞; C A : 加 0 . 78 召g/ 回 C妇n A 诱导的细胞 ; 工: 经 助 钻照射的细胞 ; 欺 经
丝裂霉素 C 处理的细胞 ( ) 内为绝对抑制率 ; 〔 」内为相对抑制率。
4 32上 海 第 一 医 学 院 学 报 0 1卷
细胞培养的上清液与新鲜培养液的结果是一致的 , 而 o o n A 诱导细胞培养的上清 液 则具
有明显的抑制作用 。 这种抑制作用无品系特异性 , 因而属非特异性抑制 。
五 、 7 射线、 丝裂霉素 C 对调节细胞功能的影响 : 通常在研究 O o n A 诱导细胞对应
答细胞功能影响时 , 采用下射线或丝裂霉素 0 处理的调节细胞。 我们对处理前后的调 节
细胞功能进行比较 , 除处理后的细胞对促有丝分裂原不能进行增生反应外 (数据未列出 ) ,
它们的辅助或抑制效应均受到一定程度影响 (表 7) , 未处理 的调节细胞若以辅助 功能 为
主 , 处理后增生反应受到明显抑制 ; 处理前若以抑制功能为主 , 处理后抑制减弱或消失 。 因
此经 7 射线或丝裂霉素 0 处理的细胞 , 其功能受到一定的抑制 。 但是用相对抑制率表示
时 , 调节细胞仍呈现抑制效应 。
讨 论
各实验室所用 C o n A 诱导抑制性细胞的剂量相差悬 殊 , 曾使 用 过每 毫升 1雌味 :叹
6雌 〔8 , 、 功雌〔 1 6 ,、 2 5雌 1[ 7 , 、 40 鳍山 , 、 6 0鳍 〔6 , 、 1 0 0鳍〔 19 , 等不同的 浓 度 。 D u t ot n L, 】用溶
血空斑形成方法证明 : 每毫升 1 ~ 4鳍或 16 ~ 64 雌 的 o o n A 在体外都能对小鼠脾细 胞
诱导出以抑制性功能为主的细胞 , 而 o o n A 在 8雌 / m l 时则无此作用。 我们用淋巴 细胞
增生反应的方法 , 也发现 o o n A 有两个作用的浓度范围 , 能诱导 出以抑制性功能为主的细
胞 : 一是在 0 . 7 8 灿g / m l 左右 , 即低浓度区 ; 另一是在 5 0雌 / m l 左右 , 即高浓 度 区 。 而
6
.
2 5 ~ 12
.
5 0雌 / m l 的浓度易于诱导出以辅助功能为主的细胞 。
对大多数小 鼠, 用 0 . 7 8峪 /m l 浓度的 o o n A 能诱导出以抑制性功能为主的细胞 , 但
是仍有近 13/ 小鼠表现为增强反应 (尤其较多见于 8W I 小鼠 ) 。 之所以产生这种双 重 作
用的原因 , 可能是在 该 浓 度 下 , C o n A 既 能 诱 导 T , 细 胞 又 能诱 导 T 、 细 胞 的 缘 故 。
几dn is ik 等 〔4J证明 1雌 /m1 的 OC n A 刺激小鼠 L y一+ 淋巴细胞 (T劝增生反应的强度 , 同
刺激 L y 一2 、 +3 淋巴细胞 ( T 。 和 T o) 增生反应强度是相同的 。
不用 C o n A 诱导的对照细胞 , 其功能也会发生变化。 K el l er 等`期 认为未受 到 o o n A
刺激的抑制性细胞在体外培养时易死亡 , 因而对照细胞常以 T 辅助功能为主 。 我们既观
察到以辅助性功能为主的对照细胞 , 也观察到以抑制性 功能为主的对照细胞 , 提示小鼠脾
细胞在小牛血清培养条件下 , 有时也能诱导出抑制性细胞 。 似乎 61 5 小鼠易诱导 抑制性
细胞 , SW I 小鼠易诱导辅助性细胞 。
对 C o n A 诱导抑制性细胞的判定 , 大多学者是根据应答细胞加入 Oo n A 诱导细 胞 的
反应值 (cP m )小于应答细胞加入对照细胞的反应值来推论的 。 F er n a n d e : 和 M ao owe 。 。咖 ,
对这一推论提出疑间 , 因为他们发现对照细胞常以辅助功能为主 , 故实验组反应值小于对
照组并不一定是 C o n A 诱导抑制性细胞的结果 。 根据我们的实验 , 相对抑制率为正值时 ,
见于下列情况 : (1) 对照组绝对抑制率小于实验组绝对抑制率 ; s() 对照组无抑制作用 ,
实验组有抑制作用 ; (3 ) 对照组有增强作用 , 实验组有抑制或无抑制作用 ; (4) 对照组增
强作用大于实验组增强作用 。 因而相对抑制率是十分笼统的概念 , 它不能确切地反映出
Oo n A 诱导细胞的功能 , 而采用绝对抑制率表示法 , 则能够了解到对照细胞与 O o n A 诱导
细胞的功能状态 , 无疑是对相对抑制率表示法的一个良好的补充 。
6 期 刀豆素 A 诱导小鼠抑制性细胞的体外研究 4 33
C o nA 诱导细胞抑制正常淋巴细胞增生反应的原理是复杂的 , 除诱 导 sT 的直接作
用 〔8, 任 ,外 , 还可能通过抑制性因子的作用哪 , 。 另外 , 我们还观察到 O o n A 诱导细胞中的死
亡淋巴细胞也能抑制正常淋巴细胞对促有丝分裂的增生反应 。
参 考 文 献
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434 上 海 第 一 医 学 院 学 报 10 卷
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