全 文 ：园艺学报，2016，43 (7)：1391–1401.
Acta Horticulturae Sinica
doi：10.16420/j.issn.0513-353x.2016-0195；http：//www. ahs. ac. cn 1391
收稿日期：2016–05–11；修回日期：2016–06–30
基金项目：福建省属公益类科研院所基本科研专项（2014R1026-11）；福建省自然科学基金项目（2015J01118）；福建省种业创新与产业
化工程项目（FJZZZY-1528）；福建省农业科学院瓜类育种科技创新团队项目（CXTD-1-04）
* 通信作者 Author for correspondence（E-mail：zhs0246@163.com，fjvrc@163.com）
超高效液相色谱法分析丝瓜酚类物质组分及其
含量
温文旭 1,2,3,4，朱海生 1,2,3,*，温庆放 1,2,3,*，陈敏氡 1,2,3，林碧英 4，薛珠政 1,2,3
（1 福建省农业科学院作物研究所，福州 350013；2 福建省农业科学院蔬菜研究中心，福州 350013；3 福建省蔬菜工
程技术研究中心，福州 350013；4 福建农林大学园艺学院，福州 350002）
摘 要：建立超高效液相色谱快速测定丝瓜中酚类物质组分及其含量的方法，为丝瓜酶促褐变的后
续研究提供技术支持。液相色谱柱为 ACQUITY UPLC BEH C18（2.1 mm × 100 mm，1.7 μm），流动相为
甲醇（A）/ 0.3%乙酸水溶液（B），柱温 32 ℃，进样量 2 μL，流速为 0.25 mL · min-1。采用梯度洗脱，洗
脱程序 0 ~ 0.5 min，95% B；0.5 ~ 17.5 min，95% ~ 67.5% B；17.5 ~ 18 min，67.5% ~ 95% B。检测波长选
取 283 nm。14 种酚类化合物标准品在 18 min 内完全分离，样品中检测出 13 种酚酸。线性范围在 0.05 ~ 4
mg · L -1，检出限（S/N = 3）为 0.004 ~ 0.049 mg · L-1，决定系数均大于 0.999，精密度、重复性、稳定性
相对标准偏差均小于 5%。平均回收率在 95.70% ~ 106.89%，相对标准偏差在 0.32% ~ 4.71%。龙胆酸为
丝瓜样品中主要酚酸，其次是绿原酸、多巴胺、L–酪氨酸，再次是焦性没食子酸、原儿茶酸、香草酸、
儿茶酚、表儿茶酸、对羟基苯甲酸、丁香酸、4–甲基儿茶酚、对香豆酸。
关键词：丝瓜；酚类物质；超高效液相
中图分类号：S 642.4 文献标志码：A 文章编号：0513-353X（2016）07-1391-11

Determination of Polyphenols in Luffa by Ultra Performance Liquid
Chromatography
WEN Wen-xu1,2,3,4，ZHU Hai-sheng1,2,3,*，WEN Qing-fang1,2,3,*，CHEN Min-dong1,2,3，Lin Bi-ying4，
and XUE Zhu-zheng1,2,3
（1Fujian Engineering Research Center for Vegetables，Fuzhou 350013，China；2Crops Research Institute，Fujian Academy
of Agricultural Sciences，Fuzhou 350013，China；3Vegetable Research Center，Fujian Academy of Agricultural Sciences，
Fuzhou 350013，China；4College of Horticulture，Fujian Agriculture and Forestry University，Fuzhou 350002，China）
Abstract：This study based on ultra performance liquid chromatograph（UPLC） for rapid
determination method of polyphenols and its content in the sponge gourd to supports luffa enzymatic
browning of follow-up studies to provide technical. The liquid-chromatographic separation was performed
on Agilent ZORBAX Eclipse Plus C18（2.1 mm × 100 mm，1.7 μm-Micron）column kept at 32 ℃，using
methanol/acetic acid/water mixture as the mobile phase with a flow rate of 0.25 mL · min-1 through
gradient elution：0–0.5 min，95% B；0.5–17.5 min，95%–67.5% B；17.5–18 min，67.5%–95% B.

Wen Wen-xu，Zhu Hai-sheng，Wen Qing-fang，Chen Min-dong，Lin Bi-ying，Xue Zhu-zheng.
Determination of polyphenols in luffa by ultra performance liquid chromatography.
1392 Acta Horticulturae Sinica，2016，43 (7)：1391–1401.
The detection wavelength was set at 283 nm. Results showed that 14 polyphenols standard was completely
separated within 18 min where detecting thirteen poly samples. The determination coefficients were higher
than 0.999 and linear range was from 0.05 to 4 mg · L-1. The limits of quantification range from 0.004 to
0.049 mg · mL-1. Recoveries achieved from the luffa ranged from 95.70% to 106.89%（RSDs，0.32%–
4.71%）. The precision，reproducibility and stability were satisfactory with the relative standard deviations
（RSDs）less than 5%. Gentisic acid as the main polyphenols，followed by chlorogenic acid，dopamine，
L-tyrosine，finally the pyrobitumengallic acid，protocatechuic acid，vanillic acid，catechin，epicatechin，
p-hydroxy benzoic acid and clove acid as well as the 4-methyl catechol，coumaric acid.
Key words：luffa；polyphenols；ultra performance liquid chromatography

酚类物质是植物体内重要的次生代谢产物，主要存在于细胞液泡内（弓志青和王文亮，2012；
范金波 等，2014），是苹果（赵光远 等，2009）、梨（袁江 等，2011）、荔枝（Wang et al.，2010）、
莲藕（王向阳 等，2009）等果蔬酶促褐变的底物（程双 等，2010；王静，2014），常导致采后贮藏
期间品质下降，降低产品经济效益（林河通 等，2002；张清安和范学辉，2011）。近年来，随着结
构鉴定技术的进步和新的分离技术在天然产物结构化学方面的应用，已经能够运用多种方法提取、
分析果蔬中的酚类物质（王强 等，2008；唐克轩 等，2014）。郑洁等（2014）建立超高效液相色谱
法测定柑橘中主要酚酸和类黄酮组成及含量，并对 5 大类柑橘实际样品进行了酚类含量测定。张娜
等（2015）建立糙米和精米中酚酸化合物的超高效液相色谱的定性定量方法，比较了二者的酚酸种
类及含量差异。郑迎春等（2015）建立了梨叶片多酚类物质的 UPLC 测定方法，并对 9 种多酚类物
质进行了定性定量。
丝瓜（Luffa cylindrical Roem.）药食两用，在中国各地普遍种植（李程斌 等，2009；颜国纲 等，
2011）。丝瓜果肉易出现褐变，影响其商品价值，揭示丝瓜褐变机理成为丝瓜育种和采后的研究重点。
本研究以丝瓜果肉为材料，建立高效稳定的酚类物质测定方法，为丝瓜酶促褐变底物的后续研究提
供技术支持。
1 材料与方法
1.1 试验材料
试验所用褐变程度不同的 5 个丝瓜品种‘肉丝瓜 1 号’、‘肉丝瓜 2 号’、‘肉丝瓜 3 号’、‘肉丝
瓜 4 号’和‘肉丝瓜 5 号’均于 2015 年 10 月至 2015 年 12 月采自福建省农业科学院蔬菜研究中心
基地，采集坐果后 18 d 左右丝瓜，切取中段果肉即用或储存于–80 ℃备用。
1.2 试验试剂
标准样品多巴胺、L–酪氨酸、焦性没食子酸、原儿茶酸、龙胆酸、对羟基苯甲酸、儿茶酚、
绿原酸、香草酸、4–甲基儿茶酚、丁香酸、表儿茶酸、对香豆酸、芥子酸，纯度均在 99%以上，
购自 Sigma 公司（USA）；甲醇、冰乙酸，购自 Fisher 公司（USA）；乙醇、甲醇、丙酮等试剂均为
分析纯，购自上海国药集团。
温文旭，朱海生，温庆放，陈敏氡，林碧英，薛珠政.
超高效液相色谱法分析丝瓜酚类物质组分及其含量.
园艺学报，2016，43 (7)：1391–1401. 1393

1.3 试验仪器
Waters Acquity UPLC 色谱仪（ACQUITY UPLC H-Class），光电二极管矩阵检测器（eλPDA，
WATERS，USA），2.1 mm × 100 mm，1.7 μm ACQUITY UPLC BEH C18 色谱柱（WATERS，USA），
旋转蒸发仪（RV10，IKA，Germany），SONICS 超声波细胞破碎仪（VCX 130PB SERIAL）。
1.4 试验方法
1.4.1 标准样品的制备
称取多巴胺、L–酪氨酸、焦性没食子酸、原儿茶酸、龙胆酸、对羟基苯甲酸、儿茶酚、绿原
酸、香草酸、4–甲基儿茶酚、丁香酸、表儿茶酸、对香豆酸、芥子酸各 0.005 g，分别用色谱纯甲
醇溶液定容于 10 mL 试管中，配置成 500 mg · L-1 标准物贮备液，保存于–80 ℃备用。采用逐级稀
释法配置成不同浓度的混合标样，进行 UPLC 分析后制作标准曲线，用稀释后的标准样品，重复进
样 6 次，分别计算保留时间和峰面积的平均值、标准差和检出限，测定仪器的重复性、精密性和稳
定性。
色谱条件：Waters 公司 ACQUITY UPLC BEH C18 液相色谱柱（2.1 mm × 100 mm，1.7 μm），
流动相为甲醇/0.3%乙酸水溶液（郑洁 等，2014），对比选取柱温为 32 ℃，进样量 2 μL，流速
0.25 mL · min-1，采用梯度洗脱（表 1），PDA 检测器扫描波长 190 ~ 400 nm，选取定量检测波长 283
nm。

表 1 各洗脱时间的流动相体积配比
Table 1 Gradient phase and elution time %
流动相 Mobile phase 0 min 0.5 min 17.5 min 18 min
甲醇（A）Methanol 5 5 32.5 5
0.3%冰乙酸水溶液（B）0.3% acetic acid 95 95 67.5 95


1.4.2 提取剂、料液比、提取溶剂 pH 单因素比较试验
选取不同褐变程度的丝瓜品种，切取中段果肉，快速用液氮研磨至粉状。称取 2 g 放入 50 mL
离心管中，分别加入乙醇、80%乙醇、甲醇、丙酮、乙酸乙酯提取液，选取不同梯度的料液比
（g︰mL）1︰5、1︰10、1︰20、1︰30、1︰40，用适量冰乙酸和氢氧化钠调节 pH 至强酸（3 ~ 4）、弱
酸（5.5 ~ 6）、碱性（8 ~ 9），冰浴超声粉碎 2 min，过滤后取滤液，在 35 ℃下减压旋转蒸发至干，
加入 4 mL 流动相溶解，定容至 5 mL 离心管中，过 0.2 μm 滤膜后上样分析，计算总酚含量。供试
品于 4 ℃保存备用。
将丝瓜样品的 UPLC 图谱同标准样品比较其光谱特性和色谱特性，确定被测样品的酚类种类，
并计算各组分含量。根据丝瓜供试样品含量进行加样回收率试验，每组重复 3 次，以检验方法的准
确性。
1.4.3 丝瓜实际样品中酚类物质的测定
选取 5 个不同褐变程度的肉丝瓜品种，根据提取条件的优化结果提取实际样品的酚类物质，按
照上述色谱条件进行上样分析，每个品种重复测定 3 次，取平均值，进一步对样品中酚类物质进行
定性及定量分析。
Wen Wen-xu，Zhu Hai-sheng，Wen Qing-fang，Chen Min-dong，Lin Bi-ying，Xue Zhu-zheng.
Determination of polyphenols in luffa by ultra performance liquid chromatography.
1394 Acta Horticulturae Sinica，2016，43 (7)：1391–1401.
图 3 pH 值对酚类物质提取总量的影响
Fig. 3 Effect of pH on the total contents of
phenolic compounds
图 2 料液比对酚类物质提取总量的影响
Fig. 2 Effect of solid-liquid ratio on the total contents of
phenolic compounds
图 1 提取剂对酚类物质提取总量的影响
Fig. 1 Effect of extraction agent on the total contents of
phenolic compounds
2 结果与分析
2.1 丝瓜果肉多酚最佳提取条件优化
选取乙醇、80%乙醇、甲醇、丙酮、乙酸
乙酯作为提取剂进行优化（图 1），同时对料液
比（图 2）、提取溶剂的 pH（图 3）进行单因素
比较试验。
结果显示，以乙醇为提取剂，酚类物质提
取效果最好（图 1）；料液比为 1 g︰20 mL，效
果最好（图 2）；提取溶剂为强酸（pH 3 ~ 4）
环境，提取效果最好（图 3）。




2.2 UPLC 定量分析方法的建立
2.2.1 检测波长的选择
利用 PDA 检测器对 14 种酚类物质标样进行最大吸收光谱扫描，扫描范围 190 ~ 400 nm，得到
不同酚酸类物质的最大吸收光谱图，14 种酚酸类化合物在 283 nm 左右均有较大的吸收峰，故选取
283 nm 为酚酸类化合物的定量检测波长。
2.2.2 柱温、流速和流动相的选择
优化柱温、流速和流动相比例，对比选取柱温为 32 ℃、流速 0.25 mL · min-1、流动相为甲醇溶
液（A）/0.3%冰乙酸水溶液（B），采用梯度洗脱使酚类物质完全分离，洗脱条件如表 1 所示。14
种混合标准样品及丝瓜样品色谱图如图 4 所示，根据测得标准样与样品相对保留时间对比并结合待
测物质的特征吸收光谱进行定性。14 种酚类物质峰形尖锐，分离度均大于 1.5。故本方法适用于对
丝瓜酚类物质的测定。

温文旭，朱海生，温庆放，陈敏氡，林碧英，薛珠政.
超高效液相色谱法分析丝瓜酚类物质组分及其含量.
园艺学报，2016，43 (7)：1391–1401. 1395


图 4 酚酸类 14 种化合物标准样品混合溶液（a）和 3 个丝瓜样品（b、c、d）UPLC 色谱图（283 nm）
1. 多巴胺；2. L–酪氨酸；3. 焦性没食子酸；4. 原儿茶酸；5. 龙胆酸；6. 对羟基苯甲酸；7. 儿茶酚；8. 绿原酸；
9. 香草酸；10. 4–甲基儿茶酚；11. 丁香酸；12. 表儿茶酸；13. 对香豆酸；14. 芥子酸。
Fig. 4 UPLC chromatograms of 14 phenolic compounds standards（a）and three samples of luffa（a，b，c）at 283 nm
1. Dopamine；2. L-tyrosine；3. Pyrogallo；4. Protocatechuic acid；5. Gentianic acid；6. P-hydroxybenzoic acid；
7. Catechol；8. Chlorogenic acid；9. Vanillic acid；10. 4-methyl catechol；11. Syringic acid；
12. Epicatechin；13. P-coumaric acid；14. Mustard acid.

2.3 UPLC 定量分析方法的测定结果
2.3.1 线性关系及检出限
配置不同梯度浓度的标准品，在上述色谱条件下，以测得的峰面积为纵坐标，标准样品质量浓
度为横坐标，绘制标准曲线，并计算回归方程、决定系数、线性范围及检出限，如表 2 所示。12 种
酚类标准样品在相应的线性范围内浓度和相应的峰面积呈良好的线性关系，线性范围在 0.05 ~ 4
mg · L-1，检出限（S/N = 3）为 0.004 ~ 0.049 mg · L-1，相关系数均大于 0.999，表明该方法灵敏度较
高。

Wen Wen-xu，Zhu Hai-sheng，Wen Qing-fang，Chen Min-dong，Lin Bi-ying，Xue Zhu-zheng.
Determination of polyphenols in luffa by ultra performance liquid chromatography.
1396 Acta Horticulturae Sinica，2016，43 (7)：1391–1401.
表 2 酚类物质的标准曲线回归方程、决定系数、线性范围和检出限
Table 2 Regression equations，determination coefficients，linear range and limits of detected phenolic compounds
酚酸
Phenolic acid
回归方程
Regression equation
决定系数
Determination coefficient
线性范围/（mg · L-1）
Linear range
检出限/（mg · L-1）
LOQ
多巴胺 Dopamine y = 23137x + 691.23 0.9996 0.20 ~ 4.00 0.006
L–酪氨酸 L-tyrosine y = 18234x + 128.75 0.9998 0.05 ~ 1.00 0.011
焦性没食子酸 Pyrogallol y = 14351x + 97.95 0.9996 0.05 ~ 1.00 0.014
原儿茶酸 Protocatechuic acid y = 53202x + 278.04 1.0000 0.10 ~ 2.00 0.009
龙胆酸 Gentianic acid y = 9724.7x + 50.822 1.0000 0.10 ~ 2.00 0.049
对羟基苯甲酸 P-hydroxybenzoic acid y = 99321x–299.66 0.9997 0.05 ~ 1.00 0.007
儿茶酚 Catechol y = 42908x + 112.12 1.0000 0.10 ~ 2.00 0.007
绿原酸 Chlorogenic acid y = 37814x–102.11 0.9996 0.15 ~ 3.00 0.017
香草酸 Vanillic acid y = 50741x + 326.43 0.9999 0.05 ~ 1.00 0.007
4–甲基儿茶酚 4-methyl catechol y = 78152x + 775.43 0.9991 0.10 ~ 2.00 0.007
丁香酸 Syringic acid y = 103207x + 1695.3 0.9997 0.12 ~ 2.40 0.011
表儿茶酸 Epicatechin y = 22359x + 10.925 0.9990 0.10 ~ 2.00 0.014
对香豆酸 P-coumaric acid y = 171157x + 35.184 0.9999 0.05 ~ 1.00 0.004

2.3.2 精密度
将标准溶液混合品连续上样 6 次，以标准物的峰面积计算相对标准偏差 RSD。如表 3 所示，12
种酚类物质的精密度（RSD）在 0.08% ~ 2.21%，表明该方法精密度较高。
2.3.3 重复性
按照 1.2 色谱条件对丝瓜样品进行连续上样 6 次，计算其峰面积相对标准偏差 RSD 以考查其重
复性。结果如表 3 所示，重复性（RSD 值）均小于 0.98%，表明该方法有较好的重复性。
2.3.4 稳定性
以相同的供试样品，在该色谱条件下，分别于 0、2、4、8、16、32 和 72 h 上样并计算其含量
和保留时间的 RSD 值。如表 3 结果所示，稳定性（RSD 值）均小于 2.87%，稳定性较高。

表 3 酚类物质的精密度、重复性和稳定性
Table 3 Precision，repeatability and stability of phenolic compounds %
稳定性 Stability 对照品或供试品
Analytes
精密度
Precision
重复性
Repeatability 含量 Content 时间 Time
多巴胺 Dopamine 2.21 0.23 2.20 0.24
L–酪氨酸 L-tyrosine 0.11 0.49 2.77 0.79
焦性没食子酸 pyrogallol 0.52 0.98 2.15 0.73
龙胆酸 Gentianic acid 0.45 0.18 1.83 1.38
对羟基苯甲酸 P-hydroxybenzoic acid 0.10 1.50 2.40 0.95
儿茶酚 Catechol 0.09 0.14 2.87 0.78
绿原酸 Chlorogenic acid 0.28 0.15 1.88 0.35
香草酸 Vanillic acid 1.21 0.07 2.10 0.93
4–甲基儿茶酚 4-methyl catechol 0.47 0.07 2.10 1.14
丁香酸 Syringic acid 0.17 0.32 1.96 0.73
表儿茶酸 Epicatechin 0.18 0.43 2.25 0.54
对香豆酸 P-coumaric acid 0.11 0.09 2.56 0.63



温文旭，朱海生，温庆放，陈敏氡，林碧英，薛珠政.
超高效液相色谱法分析丝瓜酚类物质组分及其含量.
园艺学报，2016，43 (7)：1391–1401. 1397

2.3.5 加样回收率
根据丝瓜供试品含量确定加样量，每组重复 3 次，以检验准确性。如表 4 所示，平均回收率在
95.70% ~ 106.89%，相对标准偏差在 0.32% ~ 4.71%。结果表明，该方法准确度较高，可以应用于丝
瓜酚类物质的检测分析。

表 4 样品多酚加样回收率试验结果
Table 4 Recovery rates of the twelve polyphenols in samples（n = 3）
化合物
Compound
本底值/（mg · kg-1）
Content in sample
添加量/（mg · kg-1）
Added
测定量/（mg · kg-1）
Founded
回收率/%
Recovery
相对标准偏差/%
RSD
多巴胺 Dopamine 3.82 5 8.75 99.27 0.52
L–酪氨酸 L-tyrosine 3.18 3 6.60 106.89 4.71
焦性没食子酸 Pyrogallol 2.39 3 5.29 98.03 1.41
龙胆酸 Gentianic acid 25.62 30 55.87 100.45 0.32
对羟基苯甲酸 P-hydroxybenzoic acid 0.85 1 1.80 97.51 1.78
儿茶酚 Catechol 2.07 2 3.89 95.70 3.11
绿原酸 Chlorogenic acid 4.45 5 9.84 104.20 2.91
香草酸 Vanillic acid 2.13 2 3.98 96.40 2.59
4–甲基儿茶酚 4-methyl catechol 0.19 2 2.24 101.99 1.39
丁香酸 Syringic acid 0.79 1 1.84 102.86 1.99
表儿茶酸 Epicatechin 1.77 2 3.67 97.29 1.95
对香豆酸 P-coumaric acid 0.16 2 2.23 103.29 2.29

2.4 丝瓜实际样品中酚类物质的测定
对 5 个丝瓜品种实际样品中酚类物质进行了检测，共测出有 13 种酚类物质（表 5）。不同品种
酚类物质含量和种类差异较大，肉丝瓜 1 号、2 号多酚种类较少，分别检测出 9 种和 7 种。3 号、4
号、5 号丝瓜则检测到 12 种。检测出的 13 种酚类物质中，龙胆酸含量较高，范围在 1.22 ~ 25.62
mg · kg-1。其次为绿原酸、多巴胺、L–酪氨酸、焦性没食子酸、香草酸、儿茶酚、表儿茶酸、对羟
基苯甲酸、丁香酸、4–甲基儿茶酚、对香豆酸等，而原儿茶酸仅在 3 号肉丝瓜中被检测出。

表 5 丝瓜样品中酚类物质的含量
Table 5 The contents of phenolic compounds in luffa samples mg · kg-1
酚类物质
Phenolic compound
肉丝瓜 1 号
Cylindrical luffa 1
肉丝瓜 2 号
Cylindrical luffa 2
肉丝瓜 3 号
Cylindrical luffa 3
肉丝瓜 4 号
Cylindrical luffa 4
肉丝瓜 5 号
Cylindrical luffa 5
多巴胺 Dopamine 3.09 2.88 1.43 2.09 3.82
L–酪氨酸 L-tyrosine 2.52 2.36 1.90 2.42 3.18
焦性没食子酸 Pyrogallol 0.67 1.89 0.10 0.15 2.39
原儿茶酸 Protocatechuic acid 未检出 ND 未检出 ND 0.22 未检出 ND 未检出 ND
龙胆酸 Gentianic acid 10.74 13.61 4.78 1.22 25.62
对羟基苯甲酸 P-hydroxybenzoic acid 1.28 0.68 0.21 0.26 0.85
儿茶酚 Catechol 0.69 0.38 0.38 0.49 2.07
绿原酸 Chlorogenic acid 2.04 1.65 0.72 0.90 4.45
香草酸 Vanillic acid 0.42 未检出 ND 0.53 0.81 2.13
4–甲基儿茶酚 4-methyl catechol 未检出 ND 未检出 ND 未检出 ND 0.28 0.19
丁香酸 Syringic acid 0.53 未检出 ND 0.29 0.38 0.79
表儿茶酸 Epicatechin 未检出 ND 未检出 ND 0.81 0.46 1.77
对香豆酸 P-coumaric acid 未检出 ND 未检出 ND 0.07 0.09 0.16
Wen Wen-xu，Zhu Hai-sheng，Wen Qing-fang，Chen Min-dong，Lin Bi-ying，Xue Zhu-zheng.
Determination of polyphenols in luffa by ultra performance liquid chromatography.
1398 Acta Horticulturae Sinica，2016，43 (7)：1391–1401.
3 讨论
多酚的萃取方法是利用溶剂的极性，相似相溶使其分离纯化。近几年应用较为广泛的多酚提取
方法是液体溶剂萃取法（陈亮 等，2013）和超声辅助溶剂水浴热提法（尹志娜，2010）。黄素英（2010）
以 90%的乙醇—水混合溶液，1︰15 的料液比萃取莲子的多酚。吴夏（2014）对五味子鲜果的多酚
提取研究表明，采用 67.3%乙醇，pH 1.75，液料比 8︰1（mL︰g），提取温度 55 ℃萃取为最佳方法。
陈东明（2014）以乙醇浓度 70%、料液比 1︰35 超声提取玫瑰花渣中的多酚。Luque-Rodríguez（2006）
利用超声辅助甲醇—水溶液水浴热提橄榄粉末，发现超声辅助提取效果远高于传统溶剂提取。本试
验利用超声波细胞破碎仪辅助乙醇溶剂冰浴提取，相对于溶剂萃取法和水浴热提法更为快捷简便，
能够更高效地破碎细胞使酚类物质溶于提取剂。试验比较了不同提取剂对酚类物质提取效果的影响，
同时对料液比、提取溶剂的 pH 进行单因素比较试验。结果表明，以乙醇为提取剂，料液比 1︰20，
强酸环境下，酚类物质提取效果最好，分离度高，出峰明显。
目前对植物对酚类物质含量测定的方法有多种，如 Folin-Ciocalteu 比色法（Nihorimbere Venant，
2004）、高效液相色谱法（黄建松 等，2012；谢越 等，2013）、气相色谱法（冯发进，2015；刘晓
宇 等，2015）、分光光度法（薛培凤 等，2011；王琳 等，2012）等。相对于其他分析方法，高效
液相色谱法具有灵敏度高、专一性强和重复性好等特点，是当今最为常用的分析方法之一，但高效
液相色谱法对酚类物质的鉴别和定量需要耗费大量时间和试剂，且分离效果不理想。而 UPLC 使用
杂化颗粒技术合成的 1.7 μm 填料，并使用严格的筛分技术使填料粒径分布更窄，同时使用全新的筛
板和其他色谱柱硬件，使整个色谱条件在更高的压力下进行，较传统 HPLC 具有更快的分离速度、
更高的灵敏度和分离度，据估计其分离速度、灵敏度及分离度分别是传统 HPLC 的 9 倍、3 倍及 1.7
倍（Lucie et al.，2006；Unger et al.，2008）。本试验利用超高效液相色谱法，在 18 min 内高效分离
出 14 种多酚标准品，对 5 个丝瓜样品中的 13 种酚类物质进行了准确的定性定量分析，分离度均大
于 1.5。经验证，该方法可靠有效，可以作为丝瓜果肉酚类物质稳定的分析方法，并为丝瓜褐变底
物研究提供了技术支持。
不同生物体的酚类物质的种类及含量差异较大，且在褐变过程中起主要作用的酚类物质各不相
同，对酶促褐变的多酚类底物种类研究表明，能引起褐变的酚类物质有 100 多种。Meng（2004）研
究认为桃中的主要酚类底物是儿茶素。Liang 等（2010）认为表儿茶素是荔枝果皮 PPO 最主要的内
源性底物，表儿茶素的氧化是荔枝褐变的触发点。香蕉褐变的主要底物是多巴胺（曲留柱，2014）。
研究认为苹果中酚类物质种类和数量较多，在苹果生长期其主要的褐变底物是儿茶酚和表儿茶酚，
到果实采后贮运时则变为绿原酸和咖啡酸（Ye et al.，2007；Ceymann et al.，2012；Meng-jing et al.，
2012）。本研究发现丝瓜不同品种酚类物质含量和种类差异较大，最少仅 7 种酚类物质，最多达到
12 种，其中，龙胆酸含量、绿原酸、多巴胺相对含量都较高，推测它们在丝瓜酶促褐变中可能起一
定作用，是否为丝瓜酶促褐变主要酚类底物有待进一步研究。

References
Bao Meng-jing，Shen Jian，Jia Yong-liang，Li Fen-fen，Ma Wen-jiang，Shen Hui-juan，Shen Liang-liang，Lin Xi-xi，Zhang Lin-hui，Dong Xin-wei，
Xie Yi-cheng，Zhao Yu-qing，Xie Qiang-min. 2012. Apple polyphenol protects against cigarette smoke-induced acute lung injury. Nutrition，
29 (1)：235–243.
Ceymann M，Arrigoni E，Schärer H，Nising A B，Hurrell R F. 2012. Identification of apples rich in health-promoting flavan-3-ols and phenolic acids
温文旭，朱海生，温庆放，陈敏氡，林碧英，薛珠政.
超高效液相色谱法分析丝瓜酚类物质组分及其含量.
园艺学报，2016，43 (7)：1391–1401. 1399

by measuring the polyphenol profile. Journal of Food Composition & Analysis，26 (s1–2)：128–135.
Chen Dong-ming. 2014. Study on process of ultrasonic extraction polyphenol，polysaccharide from rose residue[M. D. Dissertation]. Zhengzhou
University. (in Chinese)
陈东明. 2014. 超声提取玫瑰花渣中多酚、多糖的工艺研究[硕士论文]. 郑州大学.
Chen Liang，Li Yi-ming，Chen Kai-xian，Jia Qi. 2013. Research progress in extraction and isolation of plant polyphenols. Chinese Traditional and
Herbal Drugs，44 (11)：1501–1507. (in Chinese)
陈 亮，李医明，陈凯先，贾 琦. 2013. 植物多酚类成分提取分离研究进展. 中草药，44 (11)：1501–1507.
Cheng Shuang，Hu Wen-zhong，Ma Yue，Liu Cheng-hui. 2010. Study on the enzymatic browning mechanism of fresh-cut fruits and vegetables.
Science and Technology of Food Industry，43 (1)：74–77，80. (in Chinese)
程 双，胡文忠，马 跃，刘程惠. 2010. 鲜切果蔬酶促褐变发生机理的研究. 食品工业科技，43 (1)：74–77，80.
Fan Jin-bo，Cai Qian-tong，Zheng Li-hong，Ren Fa-zheng，Feng Xu-qiao. 2014. Research progress in polyphenolic compounds and its methods for
characterisation in fruits and vegetables. Science and Technology of Food Industry，35 (4)：374–379. (in Chinese)
范金波，蔡茜彤，郑立红，任发政，冯叙桥. 2014. 果蔬中多酚成分及其分析方法的研究进展. 食品工业科技，35 (4)：374–379.
Feng Fa-jin. 2015. Hitom active ingredients research[M. D.Dissertation]. Guiyang：Guizhou University. (in Chinese)
冯发进. 2015. 垂丝海棠活性成分研究[硕士论文]. 贵阳：贵州大学.
Gong Zhi-qing，Wang Wen-liang. 2012. Fruits and vegetables postharvest enzymatic Browning mechanism and influence factors of Browning
research progress. Food and Nutrition in China，18 (2)：30–33. (in Chinese)
弓志青，王文亮. 2012. 果蔬采后酶促褐变机理及影响褐变的因素研究进展. 中国食物与营养，18 (2)：30–33.
Huang Jian-song，Zheng Xin-yu，Ye Ren-jie，Lin Wen-xiong，Lin Rui-yu. 2012. Determination of 10 phenolic acids in root exudates of wheat by high
performance liquid chromatography. Journal of Sichuan Agricultural University，30 (2)：140–143. (in Chinese)
黄建松，郑新宇，叶仁杰，林文雄，林瑞余. 2012. 高效液相色谱法测定化感小麦根系分泌的酚酸类物质. 四川农业大学学报，30 (2)：140–143.
Huang Su-ying. 2010. Study on the extraction technology，antioxidation and antibacterial activity of lotus-seed polyphenols[M. D. Dissertation].
Fujian Agriculture and Forestry University. (in Chinese)
黄素英. 2010. 莲子多酚提取及其抗氧化抑菌活性的研究. [硕士论文]. 福建农林大学.
Li Cheng-bin，Li En，Zheng Yan，Shi Mei，Wu Qiong. 2009. Towel gourd stem and leaf nutrient analysis. Journal of Anhui Normal University，
32 (1)：69–71. (in Chinese)
李程斌，李 恩，郑 艳，施 媚，吴 琼. 2009. 丝瓜藤和叶营养成分分析. 安徽师范大学学报：自然科学版，32 (1)：69–71.
Liang L，Cao S，Xu Y，Zhang M，Xiao G，Deng Q，Xie B. 2010. Oxidation of (−) -epicatechin is a precursor of litchi pericarp enzymatic browning.
Food Chemistry，118 (3)：508–511.
Liu Xiao-yu，Fu Hai-yan，Huang Guo-he，Chai Tian，Gao Pan-feng，Wu Yi-cheng. 2015. Allelopathic effect of organic acids from Canna indica on
Microcystis aeruginosa. Techniques and Equipment for Environmental Pollution Control，9 (12)：5769–5774. (in Chinese)
刘晓宇，傅海燕，黄国和，柴 天，高攀峰，吴义诚. 2015. 美人蕉有机酸组分对铜绿微囊藻的化感作用. 环境工程学报，9 (12)：
5769–5774.
Lin He-tong，Xi Yu-fang，Chen Shao-jun. 2002. A review of enzymatic browning in fruit during storage. Journal of Fuzhou University：Natural
Science，30 (1)：696–703. (in Chinese)
林河通，席玙芳，陈绍军. 2002. 果实贮藏期间的酶促褐变. 福州大学学报：自然科学版，30 (1)：696–703.
Lucie N，Ludmila M，PETR S. 2006. Advantages of application of UPLC in pharmaceutical analysis. Talanta，68 (3)：908–918.
Luque-Rodríguez J M. 2006. Dynamic ultrasound-assisted extraction of oleuropein and related biophenols from olive leaves. Journal of
Chromatography a，1108 (1)：76–82.
Meng J. 2004. Kinetic analysis of catechin oxidation by polyphenol oxidase at neutral pH. Biochemical & Biophysical Research Communications，
319 (3)：902–910.
Nihorimbere Venant. 2004. A study of antioxidative activity of extracts from leaves of Psidium guajava LINN. [M. D. Dissertation]. Jiangnan
University. (in Chinese)
Wen Wen-xu，Zhu Hai-sheng，Wen Qing-fang，Chen Min-dong，Lin Bi-ying，Xue Zhu-zheng.
Determination of polyphenols in luffa by ultra performance liquid chromatography.
1400 Acta Horticulturae Sinica，2016，43 (7)：1391–1401.
Nihorimbere Venant. 2004. 番石榴叶提取物的抗氧化活性的研究[硕士论文]. 江南大学.
Qu Liu-zhu. 2014. The properties and the controlling browing methods of banana polyphenol oxidase[M. D. Dissertation]. Beijing Forestry
University. (in Chinese)
曲留柱. 2014. 香蕉多酚氧化酶特性及其催化褐变防控的研究. [硕士论文]. 北京林业大学.
Tang Ke-xuan，Shen Qian，Fu Xue-qing，Yan Ting-xiang. 2014. Research progress on plant secondary metabolite bioreactor. Journal of Agricultural
Science and Technology，16 (1)：7–15. (in Chinese)
唐克轩，沈 乾，付雪晴，颜廷祥. 2014. 植物次生代谢产物生物反应器研究进展. 中国农业科技导报，16 (1)：7–15.
Unger K K，Skudas R，Schulte M M. 2008. Particle packed columns and monolithic columns in high-performance liquid chromatography-comparison
and critical appraisal. Journal of Chromatography A，1184 (1–2)：393–415.
Wang Lin，Gao Zhao-hui，Cheng Zhong-zhe，Ying Xi-xiang. 2012. UV-spectrophotometry determination of total phenolic acid in Portulaca oleracea
L. Journal of Liaoning University of Traditional Chinese Medicine，14 (5)：223–225. (in Chinese)
王 琳，郜昭慧，程忠哲，英锡相. 2012. 紫外可见分光光度法测定马齿苋中总酚酸的含量. 辽宁中医药大学学报，14 (5)：223–225.
Wang Jing. 2014.Research advances on the control of enzymatic browning of postharvest fruits and vegetables. Storage and Pross，14 (4)：49-52，
58. (in Chinese)
王 静. 2014. 果蔬采后酶促褐变控制的研究进展. 保鲜与加工，14 (4)：49–52.
Wang J B，Wang X S，Bi-Yu X U. 2010. Physiological changes during the process of pericarp browning in the postharvest litchi. Agricultural Science
& Technology，11 (5)：10–16.
Wang Qiang，Liu Yan，Bai Zhong-wen，Zhang Song-ling. 2008. The research of secondary metabolites. Agriculture & Technology，28 (6)：66–
69. (in Chinese)
王 强，刘 岩，白中文，张松玲. 2008. 次生代谢产物的研究进展. 农业与技术，28 (6)：66–69.
Wu Xia. 2014. Extraction and identification of polyphenols in Wuweizi fresh fruit and its protective effect on injured HeqG2 cell. China Agricultural
University. (in Chinese)
吴 夏. 2014. 五味子鲜果多酚提取鉴定及其对受损 HepG2 细胞保护作用的研究. 中国农业大学.
Wang Xiang-yang，Jiang Li-jia，Wang Zhong-ying. 2009. Enzymatic browning of lotus roots and its control during storage. Transactions of the
Chinese Society of Agricultural Engineering，25 (4)：276–280. (in Chinese)
王向阳，姜丽佳，王忠英. 2009. 莲藕的酶促褐变及其贮藏中褐变的控制. 农业工程学报，25 (4)：276–280.
Xue Pei-feng，Li Zhan-jun，Xie Hong-xia，Wang Guo-ying，Meng Zhao-wen，Cheng Peng. 2011. Determination of total phenolic acids in Myricaria
alopcuroides Schrenk by spectrophotometry. Journal of Inner Mongolia Medical College，33 (1)：43–45. (in Chinese)
薛培凤，李占军，解红霞，王国英，孟兆文，程 鹏. 2011. 分光光度法测定蒙药河柏中总酚酸的含量. 内蒙古医科大学学报，33 (1)：43–45.
Xie Yue，Yu Hao，Wang Jian-fei，Zhang Zu-liang，Chen Shi-yong，Xiao Xin，Li Xiao-liang. 2013. High performance liquid chromatography and
determination of chuhe chrysanthemum 9 kinds of phenolic acids in the samples. Chinese Journal of Analytical Chemistry，41 (3)：383–388. (in Chinese)
谢 越，俞 浩，汪建飞，张祖亮，陈世勇，肖 新，李孝良. 2013. 高效液相色谱法同时测定滁菊样品中的 9 种酚酸.分析化学，41 (3)：
383–388.
Yan Guo-gang，Zheng Zhen-jia，Shi Xin-gang，Ge Chang-jun. 2011. Towel gourd nutrition value and its comprehensive utilization. Epidemic
Prevention and Quarantine，07：35–36. (in Chinese)
颜国纲，郑振佳，时新刚，葛长军. 2011. 丝瓜的营养价值及其综合利用研究进展. 中国果菜，07：35–36.
Ye S，Yao Y X，Zhai H，Yuan-Peng D U，Feng C，Wei S W. 2007. Polyphenolic compound and the degree of browning in processing apple varieties.
Scientia Agricultura Sinica，6 (5)：607–612.
Yin Zhi-na. 2010. Plant polyphenols extraction method and biological function research progress. Life Science Instruments，8 (6)：43–49. (in Chinese)
尹志娜. 2010. 植物多酚分离提取方法和生物功能研究进展. 生命科学仪器，8 (6)：43–49.
Yuan Jiang，Zhang Shao-ling，Cao Yu-fen，Wu Jun，Tian Lu-ming，Tao Shu-tian，Dong Xing-guang. 2011. Polyphenolic compound and substances
determination of enzymatic browning in pear. Acta Horticulturae Sinica，38 (1)：7–14. (in Chinese)
袁 江，张绍铃，曹玉芬，吴 俊，田路明，陶书田，董星光. 2011. 梨果实酚类物质与酶促褐变底物的研究. 园艺学报，38 (1)：7–14.
温文旭，朱海生，温庆放，陈敏氡，林碧英，薛珠政.
超高效液相色谱法分析丝瓜酚类物质组分及其含量.
园艺学报，2016，43 (7)：1391–1401. 1401

Zhang Na，Wang Guo-xiang，Daniel A J，Liu Zheng-hui，Ding Cheng-qiang，Tang She，Li Gang-hua，Wang Shao-hua，Ding Yan-feng. 2015.
Determination of phenolic acids in rice by ultra-high performance liquid chromatography. Scientia Agricultura Sinica，48 (9)：1718–1726. (in Chinese)
张 娜，王国祥，Daniel A J，刘正辉，丁承强，唐 设，李刚华，王绍华，丁艳锋. 2015. 超高效液相色谱法分析稻米酚酸化合物组分
及其含量. 中国农业科学，48 (9)：1718–1726.
Zhang Qing-an，Fan Xue-hui. 2011. Polyphenols antioxidant activity evaluation methods were reviewed. Food and Fermentation Industry，37 (11)：
169–172. (in Chinese)
张清安，范学辉. 2011. 多酚类物质抗氧化活性评价方法研究进展. 食品与发酵工业，37 (11)：169–172.
Zhao Guang-yuan，Cai Zhao-lei，Zhong Ming-hui. 2009. Studies on enzynatic browning of apple and its influencing factors. Sichuan Food and
Fermentation，45 (2)：36–37. (in Chinese)
赵光远，蔡照磊，钟明辉. 2009. 苹果的酶促褐变及其影响因素. 食品与发酵科技，45 (2)：36–37.
Zheng Jie，Zhao Qi-yang，Zhang Yao-hai，Jiao Bi-ning. 2014. Simultaneous determination of main flavonoids and phenolic acids in Citrus fruit by
ultra performance liquid chromatography. Scientia Agricultura Sinica，47 (23)：4706–4717. (in Chinese)
郑 洁，赵其阳，张耀海，焦必宁. 2014. 超高效液相色谱法同时测定柑橘中主要酚酸和类黄酮物质. 中国农业科学，47 (23)：4706–4717.
Zheng Ying-chun，Li Jing，Cao Yu-fen，Tian Lu-ming，Dong Xing-guang，Zhang Ying，Qi Dan，Chang Yao-jun. 2015. Development and validation
of a UPLC method for 9 polyphenols determination in pear leaves. Journal of Fruit Science，32 (6)：1258–1266. (in Chinese)
郑迎春，李 静，曹玉芬，田路明，董星光，张 莹，齐 丹，常耀军. 2015. 梨叶片中 9 种多酚类物质的 UPLC 测定方法. 果树学报
32 (6)：1258–1266.

关于申报 2016 年度华耐园艺科技奖的通知
华耐园艺科技奖由中国园艺学会和北京华耐农业发展有限公司联合设立，经科技部国家科学技术奖励工作办公
室批准，对在国内园艺科技领域做出突出贡献的科研成果进行奖励，由中国园艺学会具体承办。2016 年度华耐园艺
科技奖开始申报，现将有关事项通知如下：
一、奖励范围：华耐园艺科技奖是奖励在全国园艺作物的种质资源、育种、生物技术、栽培、病虫害防治、贮
藏加工等科学研究，以及技术推广中取得突出成绩的科研成果。
二、申报条件：1. 属于华耐园艺科技奖奖励范围的科研成果。2. 不存在成果权属、完成单位、完成人等方面的
争议。3. 尚未获得国家、省部级科技奖励的科研成果。
三、评审标准：1. 华耐园艺科技特等奖：在基础性研究、应用基础研究或应用研究方面有重大发明或重大发现，
具有很强的创新性，总体水平达到国内领先、国际先进，并获得国内外社会公认，研究成果对推动行业科技进步有
非常显著的作用，并取得显著经济效益和社会效益。2. 华耐园艺科技奖：基础性研究、应用基础研究或应用研究成
果具有较强的创新性，总体技术水平达到国内先进并得到国内同行公认，取得了较大的经济效益和社会效益。
四、奖励名额及奖金：华耐园艺科技奖每两年评选 1 次。本次奖励指标果树、蔬菜专业各 6 项，西甜瓜和观赏
园艺专业各 2 项。其中，华耐园艺科技特等奖 2 项，每项奖金 10 万元；华耐园艺科技奖 14 项，每项奖金 5 万元。
五、申报要求：1. 为了能有更多的成果申报，在原来自由申报的基础上增加了推荐申报。自由申报是由成果主
持完成单位直接向学会申报；推荐申报是由省级园艺学会（或省级果树、蔬菜、花卉学会等），以及中国园艺学会正
式批准成立的分会推荐申报。省级学会推荐的范围限于本省，每省推荐名额不超过两项。分会推荐的范围限于本学
科，每个分会推荐名额不超过两项。所有申报均须填写“华耐园艺科技奖申请表”，并提供相关的证明材料。2. 申
报截止时间 2016 年 8 月 10 日（以邮戳为准），过期不予受理。
详情请查询中国园艺学会网站：http：//cshs.org.cn
中国园艺学会
通 知