全 文 ：法和原子吸收光谱法 3种。紫外吸收法和滴定法测
定结果的准确性与样品的质量分数有直接关系, 对
于高纯度的金雀花碱产品,本方法是适用的, 但对于
含杂质较多的供试品,由于杂质的干扰, 测定结果并
不理想;原子吸收光谱法的供试品处理方法比较繁
琐,且操作方法的通用性较差,不能满足生产和日常
检验的需要,因此有必要探索其他的分析方法。
3 2 实验过程中发现, 2 2 3项下供试品溶液制备
过程中如果用 80%甲醇定容,进样后色谱图的分离
效果变差, 色谱柱易污染。推测是由于种子类药材
含脂溶性成分较多, 在本实验色谱条件下不易洗脱,
改用本实验所述供试品处理方法后,可明显改善分
析效果、保护色谱系统。
3 3 采用本实验的色谱条件, 随机测定了 10 批披
针叶黄华药材中金雀花碱的量,结果令人满意,本方
法可对披针叶黄华药材以及金雀花碱产品的定量测
定提供依据。
参考文献:
[ 1] Coe J W, Brooks P R, Vetelino M G, e t al Varenicline: an
42 nicotin ic receptor part ial agonist for smoking cessation
[ J] J Med Chem, 2005, 48( 10) : 34743477
[ 2] 畅行若,李 书,王宏新,等 国产披针叶黄华化学成分的研究
兴奋横纹肌成分的分离与鉴定 [ J] 陕西新医药, 1978, 40
( 4) : 5556, 58
[ 3] 高文远,李医明,朱大元 牧马豆生物碱成分研究[ J]中草药,
1998, 29( 12) : 796798
[ 4] 黎 萍,杨敏丽 披针叶黄华中金雀花碱类生物碱的提取工艺
[ J]华西药学杂志, 2007, 22( 1) : 78
[ 5] 雷光继,林树昌,迟锡增 原子吸收光谱法间接测定微量金雀
花碱[ J]北京师范大学学报:自然科学版, 1991, 27( 1) : 6568
[ 6] 蔡智慧,倪传根,贾瑞琴,等 超临界二氧化碳萃取披针叶黄华
总生物碱工艺的研究 [ J] 林产化学与工业, 2006, 26 ( 4) : 70
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HPLC法测定不同采收期栽培藏木香中内酯类成分
董 琦,马世震, 胡凤祖*
(中国科学院西北高原生物研究所, 青海 西宁 810001)
摘 要: 目的 测定不同采收期栽培藏木香中土木香内酯和异土木香内酯的量,确定最佳采收期,为提高药材质量
提供依据。方法 采用 H PLC 法,色谱柱为 XDBC18( 150 mm 4 5 mm, 5 0 m) ,流动相为乙腈0 01%醋酸水溶
液( 55! 45) , 检测波长 202 nm,体积流量1 0 mL/ min,柱温 30 ∀ 。结果 栽培藏木香在不同采收期土木香内酯和
异土木香内酯的总量不同, 9 月份的量最高。结论 藏木香的最佳采收期为 9 月份。
关键词:藏木香; 不同采收期;土木香内酯; 异土木香内酯
中图分类号: R284 2 文献标识码: A 文章编号: 02532670( 2010) 07118602
藏木香为菊科植物总状土木香 I nula racemosa
Hook f 的干燥根, 藏语中称为#玛奴∃, 主要分布在
四川、青海、甘肃、西藏等省, 以根入药, 具有行气镇
痛、健脾消食、温中和胃、胸腔胀痛、食积不消、止痛
安胎作用[ 1~ 3] 。土木香内酯和异土木香内酯是藏木
香的主要活性成分 [ 4, 5] , 其量高低直接影响药材的
质量与疗效。本实验以不同采收期的栽培藏木香为
对象,采用 H PLC 法对土木香内酯、异土木香内酯
进行定量分析, 为确定最佳采收期从而提高药材质
量提供依据。
1 材料、试剂与仪器
试验材料: 栽培藏木香由本所与青海大通宝库
林场合作试验基地提供, 采于 2008年 5月至 10月,
由本所陈世龙研究员鉴定。样品经阴干,粉碎后, 过
80目筛,备用。
Ag ilent 1200 高效液相色谱仪 (带 G1315D
DAD检测器) , Chemstat ion 工作站, M OLEMENT
元素型超纯水机(上海摩勒生物科技有限公司)。
土木香内酯对照品( 110761200204)、异土木香
内酯对照品( 110760200507) , 中国药品生物制品检
定所。乙腈(色谱纯) , 甲醇 (分析纯) , 醋酸 (分析
纯) ,水为超纯水。
2 方法与结果
2 1 色谱条件: 色谱柱为 ZORBAX Eclipse XDB
C18 ( 150 mm 4 5 mm , 5 0 m) , 流动相为乙腈
0 01%醋酸水溶液( 55 ! 45) , 检测波长 202 nm, 体
积流量 1 0 mL/ min,柱温 30 ∀ ,进样量 10 L。色
谱图见图 1。
%1186% 中草药 Chinese Traditional and Herbal Drugs 第 41 卷第 7 期 2010 年 7 月
* 收稿日期: 20090903 作者简介:董 琦( 1980 & ) ,女,吉林省通化市人,工程师,硕士,从事分析化学工作。
T el: ( 0971) 6132750 Fax: ( 0971) 6143282 Email: qdong@ nw ipb ac cn
2 2 对照品溶液的制备:精密称取对照品土木香内
酯 8 8 mg、异土木香内酯 9 6 mg ,用甲醇分别定容
于 10 mL 量瓶中,摇匀, 得对照品溶液。精密吸取
各对照品溶液 5 0 mL, 置于 10 0 mL 量瓶中, 摇
匀,得土木香内酯 0 44 mg/ mL、异土木香内酯 0 48
mg/ mL 的混合对照品溶液。
1土木香内酯 2异土木香内酯
1alantolacton e 2 isoalantolactone
图 1 对照品(A)和样品(B)的 HPLC图
Fig 1 Chromatogram of reference substances ( A)
and sample ( B)
2 3 供试品溶液的制备:取藏木香药材粉末 0 500
g 于 100 mL 具塞三角瓶中,加甲醇 50 mL,密塞, 称
定质量,超声 40 min, 放凉后,密塞, 再称定质量, 用
甲醇补足减失的质量,摇匀,滤过, 即得。
2 4 线性关系考察:精密吸取土木香内酯 0 44 mg/
mL、异土木香内酯 0 48 mg/ mL 的混合对照品溶液,
分别进样 2、4、8、10、16、20 L,按照上述色谱条件测
定峰面积,以峰面积积分值为纵坐标, 土木香内酯和
异土木香内酯质量为横坐标,进行线性回归。土木香
内酯回归曲线方程: y= 2 826 5 x+ 80 983, r= 1; 异
土木香内酯回归曲线方程: y = 2 781 8 x + 106 39,
r= 1。测定结果表明,土木香内酯在 088~ 8 8 g,
异土木香内酯在 0 96~ 9 6 g 与峰面积呈良好的
线性关系。
2 5 稳定性试验:取同一批供试品溶液, 分别在 0、
2、4、6、8、10 h 进样, 测定样品中异土木香内酯和土
木香内酯的量, RSD值分别为 1 05%、1 11% ( n=
6) ,结果表明,供试品溶液 10 h内稳定性良好。
2 6 重现性试验: 取同一批藏木香样品 5 份, 按供
试品制备方法制得待测溶液, 依照样品测定方法进
样,测定样品中土木香内酯和异土木香内酯的量,
RSD分别为 1 45%、1 93% ( n= 6)。
2 7 精密度试验: 精密吸取含土木香内酯 0 44
mg/ mL 和异土木香内酯 0 48 mg/ mL 的对照品溶
液 2 L,重复进样 6次, 测定峰面积, 计算 RSD值,
土木香内酯及异土木香内酯峰面积的 RSD 分别为
0 95%、0 98% ( n= 6)。
2 8 回收率试验: 取已知土木香内酯、异土木香内
酯质量分数的样品,精密加入土木香内酯、异土木香
内酯对照品溶液, 按上述样品制备方法制备样品溶
液,进样 10 L, 测定,计算回收率。土木香内酯的
平均回收率为 100 61% , RSD为 2 05% ( n= 5) ,异
土木香内酯的平均回收率为 100 34% , RSD 为
2 11% ( n= 5)。
2 9 样品测定:按上述方法测定藏木香样品中异土
木香内酯和土木香内酯的量,结果见表 1。
表 1 不同采收期栽培藏木香中异土木香内酯和土木香
内酯的量( n= 2)
Table 1 Content of alantolactone and isoalantolactone
in cultivated I racemosa at different
growing stages ( n= 2)
采收期 土木香内酯/ % 异土木香内酯/ % 两内酯总和/ %
5月 2 23 2 49 4 72
6月 2 24 2 30 4 54
7月 1 92 1 82 3 74
8月 2 00 1 97 3 97
9月 2 29 2 48 4 77
10月 2 10 2 04 4 14
3 结果与讨论
测定结果表明, 藏木香的有效成分土木香内酯
和异土木香内酯总量从 5月份开始至 7月份呈下降
趋势,从 7月份开始有所上升, 至 9月份达到最高
值,之后又有所下降。总体分析, 9 月份土木香内酯
和异土木香内酯总量高于其他月份, 9 月份应为藏
木香的最佳采收期, 土木香内酯和异土木香内酯总
量达 4 77%。
分别采用不同比例的乙腈水和甲醇水作为流
动相,对比试验结果,乙腈水对目标峰的干扰较小,
分离度好, 因此流动相采用乙腈水。另外, 为了改
善目标物质色谱峰峰形,在流动相体系中还加入了
少量醋酸。
选用石油醚、氯仿、甲醇这 3种溶剂提取同一批
样品,结果表明,甲醇和氯仿的提取率差异不大,均较
石油醚提取率高,由于甲醇较氯仿毒性小,因此选用
甲醇来提取藏木香中土木香内酯和异土木香内酯。
参考文献:
[ 1] 中国药典[ S]一部 2005
[ 2] 杨永昌,何廷农,卢生莲,等 藏药志[ M ]西宁:青海人民出版
社, 1991
[ 3] 中国科学院西北高原生物研究所 青海经济植物志 [ M ] 西
宁:青海人民出版社, 1987
[ 4] 肖远灿,胡凤祖 RPHPLC 测定藏木香中土木香内酯和异土
木香内酯含量[ J]中国药学杂志, 2007, 42( 7) : 491493
[ 5] 杨月琴,胡凤祖, 马世震, 等 GCMS法测定藏木香栽培品种
挥发油的化学成分 [ J]安徽农业科学, 2008, 36( 25) : 10950
10951
%1187%中草药 Chinese Traditional and Herbal Drugs 第 41 卷第 7 期 2010 年 7 月