全 文 ：冰片对原儿茶酸在家兔体内药动学的影响
杨　洁，王世祥，兰　薇，刘春芝，郑晓晖
（西北大学 生命科学学院，陕西 西安 ７１００６９）
［摘要］　目的：研究冰片对原儿茶酸在家兔体内药动学的影响。方法：建立测定家兔血浆中原儿茶酸的高效液相色谱方
法。将１２只健康新西兰家兔随机分为２组，分别灌胃原儿茶酸（原儿茶酸３０ｍｇ·ｋｇ－１）及原儿茶酸冰片（原儿茶酸３０ｍｇ·
ｋｇ－１＋冰片１５ｍｇ·ｋｇ－１），采用ＲＰＨＰＬＣ法测定家兔给药后不同时间血浆中原儿茶酸的浓度，ＤＡＳ２０药动学软件拟合房室
模型，计算药动学参数。结果：原儿茶酸在００４～２０ｍｇ·Ｌ－１线性良好（ｒ＝０９９８３）。原儿茶酸与冰片配伍给药可使原儿茶
酸的吸收半衰期（ｔ１／２Ｋａ）明显减小，药物达峰时间（Ｔｍａｘ）显著缩短，血药浓度曲线下面积（ＡＵＣ（０～∞））增加，表观清除率（ＣＬ／Ｆ）
降低，同时表观分布容积（Ｖ１／Ｆ）也相应的减小。结论：冰片促进原儿茶酸在家兔体内的吸收，使其吸收量增加，排泄减缓，可
提高原儿茶酸的生物利用度。
［关键词］　原儿茶酸；冰片；药动学；高效液相色谱；“君使”对药
［收稿日期］　２００８０７２９
［基金项目］　教育部科学研究重点项目（２０７１５１）；陕西省中医管理
局中医药科研项目（２００５１０３）
［通信作者］　郑晓晖，Ｔｅｌ：（０２９）８８３０２６８６，Ｅｍａｉｌ：ｚｈｅｎｇｘｈ＠ｎｗｕ．
ｅｄｕ．ｃｎ
　　冰片（ｂｏｒｎｅｏｌ），又名“龙脑”，芬香开窍，作为
佐使药“独行则势弱，佐使则有功”，并有“率领群
药”的作用。现代药理研究表明，冰片可提高药物
的生物利用度，促进血脑屏障开放，增加药物在脑组
织中的分布而提高疗效［１２］。原儿茶酸（ＰＡ）是广泛
存在于广枣、丹参、老鹳草、小蓟等中草药中的一类
水溶性酚酸成分［３５］，具有显著降低心肌耗氧量、提
高心肌耐氧能力、减慢心率等药理作用，并且对乙肝
病毒的脱氧核糖核酸（ＤＮＡ）复制具有较强的抑制
作用。临床上广泛应用于治疗气滞血瘀病症，具有
很高的药用价值［６］。目前，原儿茶酸含量的测定方
法主要有高效液相色谱紫外检测法、高效液相色
谱电化学检测法、高效液相色谱质谱联用法和毛
细管区带电泳法等［７］，但冰片与原儿茶酸配伍应用
的实验研究尚未见报道。本实验从药动学的角度，
观察原儿茶酸与冰片合用后，冰片对原儿茶酸在兔
体内的药动学过程的影响，以期为临床安全、合理用
药提供试验依据。
１　材料
１．１　动物
健康新西兰大白兔，雌雄兼用，体重１９～２２
ｋｇ，由西安交通大学实验动物中心提供，合格证号
医动字第０８０１８号。
１．２　药物与试剂
原儿茶酸（纯度≥９８０％，国药集团化学试剂
有限公司，批号 ＹＦ２００５１２２１）；原儿茶酸对照品（中
国药品生物制品检定所，批号 １１０８０９２００５０３）；天
然冰片（产自江西。购自陕西省药材公司，由西安
交通大学药学院王军宪教授进行鉴定）；肝素钠注
射液（河北常山生化药业有限公司，批号０８０３０３）；
色谱纯甲醇（美国 Ｆｉｓｈｅｒ公司，批号 ０７４８３３）；醋酸
乙酯（天津市东丽区天大化学试剂厂，分析纯，批号
２００８０２１８）；实验用水为超纯蒸馏水（自制）；其他试
剂均为分析纯。
１．３　仪器与设备
Ａｇｉｌｅｎｔ１１００系列高效液相色谱仪（美国安捷伦
公司）；ＴＧＬ１６Ｇ高速离心机（上海安宁科学仪器公
司）；ＢＦ２０００氮气吹干仪（北京八方世纪科技有限公
司）；ＶＥＲＴＥＸ６型快速混匀器（海门市其林贝尔仪器
制造有限公司）；Ｍａｘｉｍａ超纯水机（美国基因公司）。
２　方法
２．１　动物分组
取健康新西兰家兔１２只，随机分为２组，每组
６只，禁食１２ｈ，自由饮水。分别灌服原儿茶酸（３０
ｍｇ·ｋｇ－１）以及原儿茶酸冰片（原儿茶酸３０ｍｇ·
ｋｇ－１＋冰片１５ｍｇ·ｋｇ－１），给药后０，１０，２０，３０，４０，
５０，６０，９０，１２０，１５０，１８０，２４０ｍｉｎ耳动脉插管取血１
ｍＬ，置于肝素化离心管中，８０００ｒ·ｍｉｎ－１离心 １０
ｍｉｎ，分离血浆，于－２０℃冻存。
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２．２　血药浓度测定
２．２．１　色谱条件　色谱柱 ＵｌｔｉｍａｔｅＴＭ ＸＢＣ１８（４６
ｍｍ×２５０ｍｍ，５μｍ）；流动相甲醇０２％甲酸水溶
液（８∶９２）；流速０８ｍＬ·ｍｉｎ－１；柱温２５℃；检测波
长２７０ｎｍ；进样量５０μＬ。
２．２．２　对照品溶液的制备　精密称取原儿茶酸对
照品１０ｍｇ，加甲醇定容于 １００ｍＬ的棕色量瓶
中，摇匀，配制成０１０ｇ·Ｌ－１的储备溶液。
２．２．３　样品处理　取２．１项下血浆０５ｍＬ，加入
５０μＬ１０％三氯乙酸水沉淀蛋白，涡旋１ｍｉｎ后，加
１５ｍＬ醋酸乙酯萃取，涡旋 １ｍｉｎ，离心 １０ｍｉｎ
（８０００ｒ·ｍｉｎ－１），取出上清液，萃取２次。合并醋
酸乙酯层，氮气吹干后，加入０５ｍＬ流动相溶解，用
０４５μｍ水系微孔滤膜过滤，４℃冷藏备用。
２．３　数据分析
实验数据以 珋ｘ±ｓ表示，均用 ＳＰＳＳ１３０统计学
软件进行统计，组间数据比较采用 ｔ检验。药动学
参数的计算采用ＤＡＳ２０药动学软件自动处理。
３　结果
３．１　方法的专属性
空白血浆、空白加标血浆、含药血浆色谱图见图
１。在建立的色谱条件下，内源性物质不干扰酚酸类
成分样品峰，基线噪音小，原儿茶酸（ＰＡ）的峰形良
好，保留时间２５８ｍｉｎ。
ＰＡ．原儿茶酸。
图１　空白血浆（ａ）、空白加标（ｂ）和含药血浆（ｃ）的
ＨＰＬＣ图
３．２　线性关系及检测限
取空白血浆０５ｍＬ，分别加入ＰＡ标准溶液，配
成００４，００８，０１６，０４０，０８０，２００ｍｇ·Ｌ－１的血浆
样品。按２．２．３项下处理样品，在拟定色谱条件下进
样分析，记录峰面积。以待测物峰面积为纵坐标
（Ｙ），进样浓度为横坐标（Ｘ，ｍｇ·Ｌ－１）进行回归分
析，得ＰＡ的回归方程分别为Ｙ＝１６２１０Ｘ＋２５３１９，ｒ
＝０９９８３（ｎ＝６），血浆中ＰＡ在００４～２０ｍｇ·Ｌ－１
内线性关系良好，最低检测限００２ｍｇ·Ｌ－１。
３．３　精密度和回收率试验
取空白血浆 ０５ｍＬ，配成 ＰＡ分别为 ２００，
０４０，００４ｍｇ·Ｌ－１的血样数份，按２２３项下进行
样品处理，在拟定色谱条件下进样，日内重复测定５
次；将上述３个浓度的样品在５日内连续测定５次，
分别计算日内、日间精密度及回收率。结果见表１。
表１　ＰＡ回收率、日内和日间精密度（珋ｘ±ｓ，ｎ＝５）
质量浓度
／ｍｇ·Ｌ－１
回收率
／％
ＲＳＤ／％
日内 日间
２００ ９７４５±２８４ ４３０ ５８３
０４０ ９６７２±１９７ ５２７ ７４１
００４ ９８３４±２３６ ２８８ ３８４
３．４　稳定性试验
取空白血浆 ０５ｍＬ，配制 ＰＡ分别为 ００４，
０４０，２０ｍｇ·Ｌ－１的血浆样品，置于 －２０℃冷冻，
２４ｈ后室温下解冻，按２２３项下处理样品。在拟
定分析条件下进样，测定 ＰＡ的浓度变化。并将样
品重新冷冻２４ｈ。按上述步骤重复６次，考察冻融
周期对样品稳定性的影响，得到低、中、高３个浓度
的 ＲＳＤ值分别为 ５４１％，４４０％，３３４％，结果表
明，样品冷冻条件下浓度无明显变化，稳定性好。
３．５　血药浓度及药代动力学研究
取２２３项下样品５０μＬ，在拟定色谱条件下
进样分析，按标准曲线计算 ＰＡ的浓度，以时间（ｔ）
为横坐标，血药浓度（Ｃ）为纵坐标绘制药时曲线
（图２）。血药浓度观察用 ＤＡＳ２０药动学软件处
理，拟合房室模型，结果显示 ＰＡ单用及与冰片配伍
后均呈一室开放模型，主要的药代动力学参数见表
２。
图２　ＰＡ，ＰＡ＋冰片药时曲线
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表２　兔灌胃原儿茶酸、原儿茶酸冰片后的
药代动力学参数（珋ｘ±ｓ，ｎ＝６）
参数及单位 ＰＡ ＰＡ＋冰片
ｔ１／２ｋａ／ｍｉｎ ５４９５５±８１３ ２６３８±０５９２）
ｔ１／２／ｍｉｎ ６５８５５±９９５ ６９３１５±４２４１）
Ｖ１／Ｆ／Ｌ·ｋｇ－１ ８５９８２±１６２６ ５８８８３±９０１２）
ＣＬ／Ｆ／Ｌ·ｍｉｎ－１·ｋｇ－１ ０９０５±００３９ ０５８９±００２０
ＡＵＣ（０ｔ）／ｍｇ·ｍｉｎ－１·Ｌ－１ ２１７４４±９５３ ３１９８６±７７２１）
ＡＵＣ（０∞）／ｍｇ·ｍｉｎ
－１·Ｌ－１ 　２２１±２０４ ３３９６６±４１１２）
Ｃｍａｘ／ｍｇ·Ｌ－１ ８９９４±２１５０ ８４６７±２２８９
Ｔｍａｘ／ｍｉｎ 　　９０±６３３ 　　３０±２３５２）
　　注：① 与 ＰＡ组比１）Ｐ＜００５，２）Ｐ＜００１；② ＰＡ剂量３０ｍｇ·
ｋｇ－１；ＰＡ＋冰片剂量３０ｍｇ·ｋｇ－１＋１５ｍｇ·ｋｇ－１。
４　讨论
在色谱条件的优化过程中，曾考察过乙腈水和甲
醇水溶液等流动相，发现甲醇０２％甲酸水溶液（８∶
９２）体系产生的分离效果最佳，各成分的色谱峰形对
称，保留时间适宜，与其他色谱峰的分离度均大于１５。
结果显示，兔在原儿茶酸单用给药和原儿茶酸
冰片伍用给药时，体内动力学行为均符合一房室模
型。原儿茶酸与冰片伍用灌胃给药后，冰片均可使
原儿茶酸吸收半衰期 ｔ１／２Ｋａ明显减小，药物达峰时间
Ｔｍａｘ显著缩短，血药浓度曲线下面积ＡＵＣ增加，表观
清除率ＣＬ／Ｆ降低，同时表观分布容积Ｖ１／Ｆ也相应
的减小。提示冰片促进了原儿茶酸在兔体内的吸
收，使其吸收量增加，排泄减缓，提高了原儿茶酸的
生物利用度，这可能与冰片能够促进药物进入血脑
屏障的的作用机制有关。
冰片促透作用的研究已展示出其独特的价值理
论与实践意义。由“佐使则有功”这一冰片的药性
特点逐步得到总结验证，可以预见的是，冰片作用的
进一步深入研究将为发现使药引药直达病所的体内
机制，为中药引经理论及配伍理论的研究提供新的
思路和方法。
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Ｅｆｅｃｔｓｏｆｂｏｒｎｅｏｌｏｎｐｈａｒｍａｃｏｋｉｎｅｔｉｃｓｏｆｐｒｏｔｏｃａｔｅｃｈｕｉｃａｃｉｄｉｎｒａｂｂｉｔｓ
ＹＡＮＧＪｉｅ，ＷＡＮＧＳｈｉｘｉａｎｇ，ＬＡＮＷｅｉ，ＬＩＵＣｈｕｎｚｈｉ，ＺＨＥＮＧＸｉａｏｈｕｉ
（ＴｈｅＣｏｌｅｇｅｏｆＬｉｆｅＳｃｉｅｎｃｅｓ，ＮｏｒｔｈｗｅｓｔＵｎｉｖｅｒｓｉｔｙ，Ｘｉ＇ａｎ７１００６９，Ｃｈｉｎａ）
［Ａｂｓｔｒａｃｔ］　Ｏｂｊｅｃｔｉｖｅ：Ｔｏｓｔｕｄｙｔｈｅｅｆｅｃｔｏｆｂｏｒｎｅｏｌｏｎｔｈｅｐｈａｒｍａｃｏｋｉｎｅｔｉｃｓｏｆｐｒｏｔｏｃａｔｅｃｈｕｉｃａｃｉｄ（ＰＡ）ｉｎｒａｂｂｉｔｓ．Ｍｅｔｈ
ｏｄ：ＡｍｅｔｈｏｄｆｏｒｄｅｔｅｒｍｉｎａｔｉｎｇＰＡｉｎｒａｂｂｉｔｐｌａｓｍａｂｙｈｉｇｈｐｅｒｆｏｒｍａｎｃｅｌｉｑｕｉｄｃｈｒｏｍａｔｏｇｒａｐｈｙ（ＨＰＬＣ）ｗａｓｅｓｔａｂｌｉｓｈｅｄ．Ｔｈｅ１２
ｈｅａｌｔｈｙＮｅｗＺｅａｌａｎｄｒａｂｂｉｔｓｗｅｒｅｒａｎｄｏｍｌｙｄｉｖｉｄｅｄｉｎｔｏ２ｇｒｏｕｐｓ．ＰＡｃｏｎｃｅｎｔｒａｔｉｏｎｉｎｐｌａｓｍａｓａｍｐｌｅｓｏｆｒａｂｂｉｔｓｗａｓｄｅｔｅｒｍｉｎｅｄｂｙ
ＨＰＬＣａｆｔｅｒｏｒａｌａｄｍｉｎｉｓｔｒａｔｉｏｎｏｆＰＡ（３０ｍｇ·ｋｇ－１）ａｎｄＰＡｃｏｍｂｉｎｅｄｗｉｔｈｂｏｒｎｅｏｌ（ｐｒｏｔｏｃａｔｅｃｈｕｉｃａｃｉｄ３０ｍｇ·ｋｇ－１＋ｂｏｒｎｅｏｌ１５
ｍｇ·ｋｇ－１）．ＴｈｅｄａｔａｗｅｒｅｐｒｏｃｅｓｓｅｄｂｙＤＡＳ２０ｓｏｆｔｗａｒｅｔｏｃａｌｃｕｌａｔｅｔｈｅｐｈａｒｍａｃｏｋｉｎｅｔｉｃｐａｒａｍｅｔｅｓ．Ｒｅｓｕｌｔ：Ｃｈｒｏｍａｔｏｇｒａｐｈｉｃ
ｐｅａｋｓｗｅｒｅｓｅｐａｒａｔｅｄｗｅｌｂｙｔｈｅＨＰＬＣｍｅｔｈｏｄ．ＲｅｇｒｅｓｓｉｏｎａｎａｌｙｓｉｓｏｆｔｈｅｄａｔａｏｆＰＡｃｏｎｃｅｎｔｒａｔｉｏｎａｇａｉｎｓｔｉｔｓｐｅａｋａｒｅａｓｈｏｗｅｄａ
ｇｏｏｄｓｔｒａｉｇｈｔｌｉｎｅｉｎｔｈｅｒａｎｇｅｏｆ００４２０ｍｇ·Ｌ－１（ｒ＝０．９９８３）．ＩｎｃｏｍｐａｒｉｓｏｎｗｉｔｈＰＡａｌｏｎｅ，ｔｈｅｐｈａｒｍａｃｏｋｉｎｅｔｉｃｓｐａｒａｍｅｔｅｒｓｏｆ
ＰＡ（ｔ１／２Ｋａ，Ｔｍａｘ，Ｖ１／Ｆ，ＣＬ／Ｆ）ｉｎｔｈｅＰＡ＋ｂｏｒｎｅｏｌｃｏｍｂｉｎａｔｉｏｎｇｒｏｕｐｗｅｒｅｄｅｃｒｅａｓｅｄ，ｗｈｉｌｅｔｈｅＡＵＣ（０∞）ｗａｓｉｎｃｒｅａｓｅｄ．Ｃｏｎｃｌｕ
ｓｉｏｎ：Ｂｏｒｎｅｏｌｃｏｕｌｄｓｉｇｎｉｆｉｃａｎｔｌｙｐｒｏｍｏｔｅａｂｓｏｒｐｔｉｏｎ，ｉｎｃｒｅａｓｅｔｈｅｄｏｓｅａｂｓｏｒｐｔｉｏｎａｎｄｓｌｏｗｅｌｉｍｉｎａｔｉｏｎｏｆＰＡｉｎｒａｂｂｉｔｓ．Ｂｏｒｎｅｏｌｃｏｕｌｄ
ｉｍｐｒｏｖｅｔｈｅｂｉｏａｖａｉｌａｂｉｌｉｔｙｏｆＰＡ．
［Ｋｅｙｗｏｒｄｓ］　ｐｒｏｔｏｃａｔｅｃｈｕｉｃａｃｉｄ；ｂｏｒｎｅｏｌ；ｐｈａｒｍａｃｏｋｉｎｅｔｉｃｓ；ｈｉｇｈｐｅｒｆｏｒｍａｎｃｅｌｉｑｕｉｄｃｈｒｏｍａｔｏｇｒａｐｈｙ；“ＪｕｎＳｈｉ”ｐａｉｒｉｎｇ
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［责任编辑　古云侠］
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