全 文 ：

·72·
Vol. 34，Issue 1
January，2009
第 34卷第 1期
2009年 1月
雷公藤多苷对抗 Thy1.1抗体肾炎肾小球内
炎症细胞浸润的抑制作用
万毅刚 1,2，孙 伟 3*，陈晓艳 1，杨海明 1，葛 明 1，戴 玮 1，清水不二雄 2
（1. 南京大学 医学院 附属鼓楼医院 中医科，江苏 南京 210008；
2. 潟日本新 大学国立肾病研究所，日本 潟新 951-8510；
3. 南京中医药大学 附属医院 肾内科，江苏 南京 210029）
[摘要] 目的：观察雷公藤多苷（multi-glycoside of Tripterygium wilfordii.，GTW）对肾小球内浸润的炎症细胞及其相
关细胞因子的影响，进一步阐明 GTW在体内的抗炎作用。方法：经尾静脉注射 500 μg单克隆抗体（monoclonal antibody，
mAb）1-22-3建立 2种大鼠抗 Thy1.1抗体肾炎模型。将模型鼠随机分为GTW干预组（GTW组）和蒸馏水干预组（对照组）。
实验 1中，在注射抗体前 3 d，经灌胃给予较大剂量 GTW（75 mg·kg-1·d-1）或蒸馏水，直至造模后第 7天，处死大鼠；实验
2中，在第 2次注射抗体同时，经灌胃给予中等剂量 GTW（50 mg·kg-1·d-1）或蒸馏水，直至造模后第 42天，处死大鼠。分
别观察 7 d内或 42 d内模型鼠 24 h尿蛋白排泄量（urinary protein excretion，Upro）动态变化；在处死大鼠后，取出肾脏，
分别观察肾小球内浸润的巨噬细胞（macrophage，MΦ），T淋巴细胞变化和肾组织内白介素（interleukin，IL）-2和干扰素
（interferon，IFN）-γ核酸的表达。结果：实验 1中，可逆性抗 Thy1.1抗体肾炎模型鼠肾小球内浸润的MΦ明显增多，较大
剂量的 GTW可以减少模型鼠肾小球内MΦ的浸润和肾组织内 IL-2核酸表达；实验 2中，不可逆性抗 Thy1.1抗体肾炎模型
鼠肾小球内浸润的活性 MΦ，T 淋巴细胞明显增多，中等剂量的 GTW 可以改善模型鼠肾小球内活性 MΦ，T 淋巴细胞的浸
润，以及肾组织内 IL-2，IFN-γ核酸表达；对于 2种模型，GTW都有减少蛋白尿的作用。结论：不同剂量的 GTW在体内对
抗 Thy1.1抗体肾炎肾小球内炎症细胞浸润有抑制作用，这些作用与改善肾组织内 IL-2和 IFN-γ核酸表达有关。
[关键词] 雷公藤多苷；可逆性抗 Thy1.1抗体肾炎；不可逆性抗 Thy1.1抗体肾炎；巨噬细胞；T淋巴细胞；白介素-2；
干扰素-γ
据报道 [1]，增殖性肾小球肾炎（proliferative
glomerulonephritis，PGN）是我国发病率较高的慢
性肾脏病（chronic kidney disease，CKD）之一。肾
组织炎症细胞的浸润是促使这类 CKD 发展为终末
期肾病的重要病理基础。在人类 PGN 的进展过程
中，包括巨噬细胞（macrophage，MΦ），T淋巴细
胞（T lymphocyte）在内的炎症细胞是肾组织活动
性炎症的主要参与者，可以通过释放炎症因子和介
质，引起肾小球、肾小管/间质损伤[2-3]。近年来，
我 国 独 立 开 发 的 药 物 —— 雷 公 藤 多 苷

[收稿日期] 2008-06-20
[基金项目] 卫生部笹川医学奖学金同学会科研启动基金（107号）
[通信作者] *孙伟，Tel：（025）86617141-71416，E-mail：sunwei2003@
medmail.com.cn
[作者简介] 万毅刚，副主任中医师，副教授。主要研究方向：中医药
治疗肾病的临床与药理。Tel：（025）83304616-70600，E-mail：
wyg68918@sina.com
（multi-glycoside of Tripterygium wilfordii，GTW）
在临床上广泛运用于治疗 PGN。其活性成分——雷
公藤内酯醇（又称为雷公藤甲素）在体外可以抑制
培养的 T淋巴细胞增殖和细胞的活性，诱导 T淋巴
细胞和树突状细胞凋亡[4-5]，但是，GTW在体内对
MΦ，T 淋巴细胞及其相关细胞因子，如白介素
（interleukin，IL）-2和干扰素（interferon，IFN）-γ
的干预作用未见报道。
日本新潟大学国立肾病研究所研制的单克隆
抗体（monoclonal antibody，mAb）1-22-3（IgG3）
诱导的抗 Thy1.1抗体肾炎模型是研究人类 PGN发
病机制的重要工具。mAb 1-22-3可特异性识别大鼠
肾小球系膜细胞表面 Thy1.1分子，导致补体依赖性
系膜溶解、肾小球内炎症细胞浸润、显著的蛋白尿，
以及急性或进展性肾小球损伤，包括系膜细胞
（ mesangial cell， MC）增殖和细胞外基质


·73·
Vol. 34，Issue 1
January，2009
第 34卷第 1期
2009年 1月
（extracellular matrix，ECM）沉积等[6]。据报道[7-8]，
单次注射该抗体所引发的大鼠可逆性抗 Thy1.1 抗
体肾炎模型的肾脏病理学特征基本类似于人类
PGN早期病变；连续 2次注射mAb 1-22-3，可以诱
导大鼠产生不可逆性抗 Thy1.1抗体肾炎，这种模型
可以模拟人类 PGN 进展的过程，其中，MΦ 和 T
淋巴细胞浸润就是这 2种模型主要的病理特征。本
课题借助这 2 种模型，试图在体内说明不同剂量
GTW对肾小球内浸润的MΦ，T淋巴细胞及其相关
细胞因子的影响，从而，进一步阐明 GTW在体内
的抗炎作用。
1 材料与方法
1.1 动物
8周龄、体重 200 g左右Wistar雌性大鼠（SPF），
分次购于日本チャ‐ルス・リバ‐株式会社，在日
本新潟大学医学部实验动物中心喂养。所有大鼠均
喂以标准饮食，并自由饮水。
1.2 药物和抗 Thy1.1单克隆抗体
GTW 购于中国浙江得恩德制药有限公司（纯度
99.5%，批号 0211114）。将 15 mg GTW溶解于 1 mL
蒸馏水中，配制成GTW溶液（15 g·L-1）。mAb 1-22-3
由日本新潟大学国立肾病研究所河内裕教授提供。
1.3 方法
1.3.1 GTW对可逆性抗 Thy1.1抗体肾炎肾小球内
炎症细胞及其细胞因子表达的影响 将 14 只大鼠
编号，按随机数字表法随机分为 2 组：①GTW 干
预组（简称 GTW组）7只; ②蒸馏水干预组（简称
对照组）7只；GTW组大鼠于造模前 3 d开始灌胃，
给予较大剂量的 GTW（75 mg·kg-1·d-1），对照组大
鼠同时以蒸馏水 1 mL灌胃，每日 1次，共 7 d。实
验前，临时将 15 mg的 mAb 1-22-3溶解于 15 mL
生理盐水中，配制成抗体溶液（1 g·L-1）。用乙醚分
别麻醉上述 2组大鼠，每只大鼠经尾静脈注射mAb
1-22-3溶液 0.5 mL。在注射抗体后第 7天，经心脏
穿刺，处死大鼠，摘取肾脏做肾组织切片（日本江
东微生物研究所），以光学显微镜或免疫荧光染色
等手段与方法，观察肾小球内浸润的 MΦ，T 淋巴
细胞表达的变化。提取肾小球 RNA，观察肾小球内
IL-2，IFN-γ核酸表达的变化。
1.3.2 GTW对不可逆性抗 Thy1.1抗体肾炎肾小球
内炎症细胞及其细胞因子表达的影响 将 10 只大
鼠编号，按随机数字表法随机分为 2组：①GTW干
预组（简称 GTW组）5只; ②蒸馏水干预组（简称
对照组）5只；实验前，临时将 10 mg的 mAb 1-22-3
溶解于 10 mL 生理盐水中，配制成抗体溶液（1
g·L-1）。用乙醚分别麻醉上述 2组大鼠，每只大鼠经
尾静脈注射mAb 1-22-3溶液 0.5 mL；间隔 2周，
再给每只大鼠重复注射mAb 1-22-3溶液 0.5 mL。
在第 2次注射抗体后，以灌胃方法，给予 GTW组
大鼠中等剂量的 GTW（50 mg·kg-1·d-1），同时，对
照组大鼠以蒸馏水 1 mL灌胃，每日 1 次。在第 1
次注射抗体后第 42 天，经心脏穿刺，处死大鼠。
与实验 1一样，以光学显微镜或免疫荧光染色等手
段与方法，观察肾小球内浸润的炎症细胞及其细胞
因子核酸表达的变化。
1.4 观察项目和检测方法
1.4.1 尿蛋白排泄量的动态变化 实验 1，2中，在
注射抗体前后，分別将大鼠放入金属代谢笼，收集 24
h尿液，以牛血清蛋白作为标准参照，比色法测定 24
h尿蛋白排泄量（urinary protein excretion，Upro）。
1.4.2 肾小球内巨噬细胞、T 淋巴细胞表达 用于
免疫荧光染色的肾组织经-70℃速冻，在低温中切片
3 μm。用特殊的单克隆抗体标记肾小球内的 ED1+
（IgG，总 MΦ 的标志）、ED3+（IgG2a，活性 MΦ
的标志），以及 CD5+（IgG1，总 T淋巴细胞的标志）、
CD4+（IgG2a，活性 T 淋巴细胞的标志）；二抗为
FITC标记的山羊抗小鼠单克隆抗体 IgG1和山羊抗
小鼠单克隆抗体 IgG2a。在每个肾组织切片中，分
别选择 30 个肾小球计算阳性细胞数。所有抗体由
日本新潟大学国立肾病研究所提供。
1.4.3 肾小球内 IL-2，IFN-γ核酸表达 以 RT-PCR
检测肾小球内 IL-2，IFN-γ 核酸（mRNA）表达。
取各组大鼠左肾，游离全部肾皮质，采用异硫氰酸
胍-酚-氯仿一步法抽提总 RNA，以分光光度法测
RNA 含量与纯度后，在-70 ℃环境中保存。取总
RNA 5 μg，运用逆转录试剂盒，逆转录 cDNA。IL-2，
IFN-γ，3-磷酸甘油醛脱氢酶（GAPDH）引物由美
国 Invitrogen 公司东京分社合成，日本新潟大学国
立肾病研究所提供。
IL-2[9]：引物 1（sense）5´-GCGCACCCACTT
CAAGCCCT-3´；引物 2（antisense）5´-CCACCA
CAGTTGCTGGCTCA-3´。扩增产物长度 351 bp；


·74·
Vol. 34，Issue 1
January，2009
第 34卷第 1期
2009年 1月
扩增条件为 95 ℃预热 9 min，95 ℃变性 30 s，63 ℃
退火 30 s，72 ℃延伸 1 min，循环 40轮。
IFN-γ [10]：引物 1（sense）5´- CCCTCTCTGGCT
GTTACTGC-3´；引物 2（antisense）5´-CTCCTTTTC
CGCTTCCTTAG-3´。扩增产物长度 419 bp；扩增
条件为 95 ℃预热 9 min，95 ℃变性 30 s，63 ℃退
火 30 s，72 ℃延伸 1 min，循环 38轮。
GAPDH[9]：引物 1（sense）5´-CTCTAGCCA
CGGCAAGTTCAA-3´；引物 2（antisense）5´-GGA
TGACCTTGCCCACAGC-3´。扩增产物长度 516 bp；
扩增条件为 95 ℃预热 9 min，95 ℃变性 30 s，58 ℃
退火 30 s，72 ℃延伸 1 min，循环 35轮。
取 PCR 产物 5 μL，加入溴酚蓝指示剂（0.5
mg·L-1）1 μL，进行 1.2%琼脂糖凝胶电泳，紫外光
摄影系统（UVP systems，Biolmaging，Upland，CA，
USA）拍照，再以 Lab Works软件（Densitograph，
ATTO，Tokyo，Japan）进行吸光度 A 扫描。结果
分别与 GAPDH对照，数值以二者吸光度比值表示。
PCR 扩增反应各自分别重复 3 次（PCR 扩增仪：
PC-800 programmable temperature control system，
Astec，Fukuoka，Japan）。
1.5 统计学方法
成组设计组间均数比较采用 t 检验。各组数据
均数采用 ±x s 表示，P＜0.05 表示差异有显著性。
实验数据采用 Stat View 统计软件（ Abacus
Concepts，Berkeley，CA，USA）处理。
2 结果
2.1 GTW对模型鼠 24 h尿蛋白排泄量的影响
实验 1中，2组大鼠在造模后第 1天检测出尿
蛋白，造模后第 3 天达到高峰，以后 Upro 水平逐
渐下降，至第 7天时，Upro仍维持在较高水平。对
照组和 GTW 组大鼠 Upro 变化趋势基本一致，但
GTW组 Upro水平低于对照组，分别在造模后第 1，
5，7天时，2组 Upro差异有显著性（P＜0.05）。该
结果说明，较大剂量的 GTW 可以减少可逆性抗
Thy1.1抗体肾炎模型蛋白尿（图 1）。

图 1 2组可逆性抗 Thy1.1抗体肾炎模型鼠
7 d内 Upro变化

实验 2中，2组大鼠在造模后第 1天均检测出
尿蛋白，造模后第 3 天达到高峰，以后 Upro 水平
逐渐下降，2组大鼠 Upro变化趋势基本一致。至第
14 天时，2 组大鼠 Upro 差异无显著性。第 2 次注
射抗体后，对照组 Upro 再次出现高峰，并呈现出
持续的大量尿蛋白；而 GTW组 Upro未出现峰值，
始终保持在偏低水平，分别在第 24，29，34，39，
42天时，2组 Upro差异有显著性（P＜0.05＝。该
结果说明，中等剂量的 GTW可以减少不可逆性抗
Thy1.1抗体肾炎模型的蛋白尿（图 2）。

图 2 2组不可逆性抗 Thy1.1抗体肾炎模型鼠
42 d内 Upro变化

2.2 GTW对模型鼠肾小球内炎症细胞的影响
实验 1中，对照组大鼠肾小球内浸润的MΦ明
显增多，GTW减少肾小球内浸润的 ED1+，ED3+；
但是，GTW对肾小球内浸润的 CD5+，CD4+没有明
显影响。该结果说明，较大剂量的 GTW可以减少
可逆性抗 Thy1.1 抗体肾炎模型肾小球内 MΦ 的浸
润（表 1）。
表 1 可逆性抗 Thy1.1抗体肾炎模型鼠第 7天肾小球内炎症细胞的变化（ ±x s，n=7）
巨噬细胞、T淋巴细胞数/肾小球
组别
剂量
/g·kg-1 ED1+ ED3+ CD5+ CD4+
对照 - 4.47±0.25 5.74±0.48 2.35±0.51 1.88±0.20
GTW 0.075 2.33±0.231) 2.23±0.221) 2.27±0.38 1.83±0.32
注：与对照组比较 1)P＜0.05。


·75·
Vol. 34，Issue 1
January，2009
第 34卷第 1期
2009年 1月
实验 2 中，对照组大鼠肾小球内浸润的活性
MΦ，T淋巴细胞明显增多，GTW减少肾小球内浸
润的 ED3+和 CD4+；但是，GTW 对肾小球内浸润
的 ED1+和 CD5+没有明显影响。该结果说明，中等
剂量的GTW可以改善不可逆性抗Thy1.1抗体肾炎
模型肾小球内活性MΦ，T淋巴细胞的浸润。
表 2 不可逆性抗 Thy1.1抗体肾炎模型鼠第 42天肾小球内炎症细胞的变化（ ±x s，n=5）
组别 剂量 巨噬细胞、T淋巴细胞数/肾小球
/g·kg-1 ED1+ ED3+ CD5+ CD4+
对照 - 2.53±0.56 4.31±0.52 1.84±0.15 2.63±0.14
GTW 0.05 2.17±0.10 2.34±0.351) 1.91±0.13 1.85±0.171)
注：与对照组比较 1) P＜0.05。

2.3 GTW对模型鼠肾小球内 IL-2，IFN-γ核酸表达
的影响
实验 1 中，对照组大鼠肾组织内 IL-2，IFN-γ
的表达明显上调；GTW下调 IL-2核酸表达，与对
照组比较，下调 45.32%，差异有显著性（*P＜0.05）；
GTW对 IFN-γ的核酸表达有影响，但是，与对照组
比较，各自差异无显著性。该结果说明，较大剂量
的GTW可以抑制可逆性抗Thy1.1抗体肾炎模型肾
组织内 IL-2核酸表达(图 3)。

图3 2组可逆性抗Thy1.1抗体肾炎模型鼠
第7天IL-2，IFN-γ变化

实验 2 中，对照组大鼠肾组织内 IL-2，IFN-γ
核酸表达明显上调，GTW下调 IL-2核酸表达，与
对照组比较，下调 67.57%，GTW下调 IFN-γ 核酸
表达，与对照组比较，下调 24.21%，2者差异均有
显著性（P＜0.05)。该结果说明，中等剂量的 GTW
可以抑制不可逆性抗 Thy1.1 抗体肾炎模型肾组织
内 IL-2，IFN-γ核酸表达（图 4）。
3 讨论
人类 PGN 是由免疫介导的炎症疾病，炎症细
胞在肾组织的浸润是 PGN进展过程中的主要病理

图 4 2组可逆性抗 Thy1.1抗体肾炎模型鼠
第 42天 IL-2，IFN-γ变化

特征[11]。在 mAb 1-22-3诱导的抗 Thy1.1抗体肾炎
模型中，肾小球内浸润的炎症细胞包括 MΦ，T 淋
巴细胞等，这 2种细胞既是免疫调节细胞，又是炎
症效应细胞。日本学者的研究表明，在以系膜增殖
性病变为主的人类 PGN和抗 Thy1.1抗体肾炎动物
模型中，MΦ的浸润对于肾组织炎症的形成和进展，
以及肾小球损伤都具有重要作用[12]。改善肾组织
MΦ 浸润，就可以减轻肾小球损伤和蛋白尿。mAb
1-22-3诱导的抗Thy1.1抗体肾炎模型鼠的肾小球中
会出现明显的MΦ聚集，包括 ED1+，ED3+（ED1+
是总 MΦ 的标志，ED3+是活性 MΦ 的标志），此
时，模型鼠的蛋白尿也出现显著的增加[13]。研究表
明，对于可以模拟人类 PGN 早期病变的可逆性抗
Thy1.1 抗体肾炎模型而言，在肾小球损伤的急性
期，肾小球内浸润的 ED1+，ED3+明显增多，炎症
病变的程度与蛋白尿的多少有关；较大剂量的GTW
抑制了模型鼠肾小球内MΦ的总数及其活性，同时，
减少了蛋白尿。


·76·
Vol. 34，Issue 1
January，2009
第 34卷第 1期
2009年 1月
实验 1中 GTW是在造模前 3 d提前给药的。
之所以提前给药，是因为mAb 1-22-3引起的是速发
性肾小球损伤。造模后即使给予较大剂量的 GTW，
对肾组织速发性炎症反应的干预作用也不明显，因
此，笔者选择了在大鼠进食后提前给予较大剂量
GTW（75 mg·kg-1·d-1）的方案。对于成人系膜增殖
性肾小球肾炎的患者，国内有双倍 GTW（2
mg·kg-1·d-1）的治疗方案[14]；对于 200 g左右的大鼠
而言，经灌胃给予 GTW 的安全剂量是 50～75
mg·kg-1·d-1，过大剂量 GTW会引起出血性肠炎而死
亡。另一方面，造模前给药与人类治病用药的规律
不符，这种给药方式对动物模型的形成是否有影
响？日本学者认为，mAb 1-22-3 诱导的抗 Thy1.1
抗体肾炎模型形成的关键因素包括：①mAb 1-22-3
与系膜细胞的结合；②补体 C3 在肾小球内的沉
积[13]。笔者的既往研究发现，对于提前给予 GTW
的模型鼠，无论是mAb 1-22-3在系膜细胞上的表达
（荧光染色），还是补体 C3在肾小球内的表达（荧
光染色）均无明显差别[15]。结果表明，造模前给药
并没有影响抗 Thy1.1 抗体肾炎动物模型本身的病
理特征。
临床上接受低、中等剂量 GTW（ 0.5～ 1
mg·kg-1·d-1）治疗的 PGN 患者，其蛋白尿往往在 1
个月左右得到控制，而总疗程一般要维持 3～6 个
月，甚至 1年以上。所以，阐明 GTW在 PGN进展
过程中的药理作用，对于指导临床实践更有现实意
义。笔者和日本学者既往的研究报道了连续 2次注
射mAb 1-22-3（间隔 2周）可以诱导大鼠产生不可
逆性抗 Thy1.1抗体肾炎。模型鼠在被第 2次注射抗
体后，不但有较高水平的持续性蛋白尿、进行性肾
小球损伤，同时，炎症细胞的浸润也愈发显著，尤
其是活性巨噬细胞 ED3+和活性 T 淋巴细胞
CD4+[16,7]。这些病理特征基本类似人类 PGN进展的
过程。研究表明，不可逆性抗 Thy1.1抗体肾炎模型
鼠肾小球内浸润的活性MΦ，T淋巴细胞明显增多，
持续给予中等剂量的 GTW（50 mg·kg-1·d-1），可以
减轻模型鼠肾小球内活性MΦ和 T淋巴细胞浸润，
改善肾组织炎症反应，减少蛋白尿。
迄今为止，在人类 PGN病变进展过程中，MΦ
和淋巴细胞浸润的作用机制尚未完全明确。日本学
者认为，活性 ED3+，CD4+对于不可逆性抗 Thy1.1
抗体肾炎模型鼠肾小球损伤的进展有重要的致病
作用，这种作用与 T 辅助淋巴细胞（Th1）产生的
主要炎症介质 IL-2，IFN-γ有关，IL-2和 IFN-γ的
核酸表达在不可逆性抗 Thy1.1 抗体肾炎模型中增
高，并且，可激活巨噬细胞、CD8+细胞、自然杀伤
细胞等炎症细胞，促进抗 Thy1.1 抗体肾炎进
展[13,17]。结果表明，中等剂量 GTW明显抑制 IL-2
核酸的表达，同时也改善 IFN-γ 的表达，它可能象
FK506一样，都能降低 Th1细胞因子高表达，从而，
抑制 T淋巴细胞、巨噬细胞活化。
综上所述，不同剂量的 GTW 在体内对抗
Thy1.1 抗体肾炎肾小球内炎症细胞浸润的抑制作
用包括：较大剂量的 GTW抑制可逆性抗 Thy1.1抗
体肾炎模型鼠肾小球内MΦ的总数及其活性；中等
剂量的GTW减轻不可逆性抗Thy1.1抗体肾炎模型
鼠肾小球内活性MΦ和 T淋巴细胞浸润；对于 2种
模型，GTW 都有减少蛋白尿的作用，这些作用可
能是通过改善肾组织内 IL-2 和 IFN-γ核酸表达来
实现的。因此，和国内许多有关 GTW药理研究的
结论一样，笔者认为，对于人类 PGN 或抗 Thy1.1
抗体肾炎模型鼠，GTW 在体内具有明确的抗炎
作用。
[参考文献]
[1] Li L S，Liu Z H. Epidemiologic data of renal disease from a single
unit in China：analysis based on 13，519 renal biopsies [J]. Kidney
Int，2004，66：920.
[2] Nikolic-Paterson D J，Lan H Y，Atkins R C. Macrophages in immune
renal injury [M]. //Neilson E C，Couser W C，et al. Immumologic
Renal Diseases Philadephia：Lippincott-Raven，1997:575.
[3] 谌贻璞. 肾小球疾病的免疫学发病机制[M]. //林善錟. 当代肾脏
病学. 上海：上海科技教育出版社，2001：400.
[4] 黎磊石，刘志红. 应用雷公藤多甙治疗肾炎二十五载的体会 [J].
肾脏病与透析肾移植杂志，2003，12（3）：246.
[5] 万毅剛，顧劉宝，清水不二雄. 腎炎に対する Ttipterygium wilfordii
hook. f. の有効成分による治療効果のメカニズム [J]. 医学のあ
ゆみ，2003，207：285.
[6] 万毅刚，孙 伟，章 洁，等. 抗 Thy1.1抗体诱导的肾炎模型及其
在中药研究中的应用 [J]. 中国中药杂志，2007，32（6）：461.
[7] Kawachi H，Oite T，Shimizu F. Quantitative study of mesangial
injury with proteinuria induced by monoclonal antibody 1-22-3 [J].
Clin Exp Immunol，1993，92：342.
[8] Kawachi H，Orikasa M，Matsui K，et al. Epitope-specific induction
of mesangial lesion with proteinuria by a MoAb against mesangial
cell surface antigen [J]. Clin Exp Immunol，1992，88：399.
[9] Siegling A，Lehmann M，Platzer C，et al. A novel multispecific
competitor fragment quantitative PCR analysis of cytokine gene
expression in rats [J]. J Immunol Methods，1994，177：23.
[10] Yiman M，Ayumi K，Nobuhiko H，et al. Continuous，noninvasive


·77·
Vol. 34，Issue 1
January，2009
第 34卷第 1期
2009年 1月
monitoring of local microscopic inflammation using a genetically
engineered cell-based biosensor [J]. Lab Invest，2005，85：1429.
[11] Remuzzi G，Bertani T. Pathophysilogy of progressive nephropathies
[J]. N Eng1 J Med，1998，339：1448.
[12] Ikezumi Y，Hurst L A，Masaki T，et al. Adoptive transfer studies
demonstrate that macrophages can induce proteinuria and mesangial
cell proliferation [J]. Kidney Int，2003，63：83.
[13] Shimizu F，Kawachi H，Orikasa M. Role of mesangial cell damage in
progressive renal disease [J]. Kidney Blood Press Res，1999，22：
5.
[14] 戎 殳，胡伟新，刘志红，等. 系膜增殖性肾小球肾炎的新疗法
——雷公藤多甙新治疗方案的疗效观察 [J]. 肾脏病与透析肾移
植杂志，1998，7（5）：409.
[15] Wan Y，Gu L，Suzuki K，et al. Multi-glycoside of Tripterygium
wilfordii Hook f. ameliorates proteinuria and acute mesangial injury
induced by anti-Thy1.1 monoclonal antibody [J] Nephron Exp
Nephrol，2005，99：e121.
[16] 万毅刚，孙 伟，清水不二雄，等. 雷公藤多苷对不可逆性肾小球
硬化模型系膜损伤的抑制作用 [J]. 中国中药杂志，2005，30（5）：
361.
[17] Ikezumi Y，Kanno K，Karasawa T，et al. The role of lymphocytes in
the experimental progressive glomerulonephritis [J]. Kidney Int，
2004，66：1036.



Suppressive effects of GTW treatment on infiltration of inflammatory cell in
glomeruli in anti-Thy1.1 glomerulonephritis

WAN Yigang1,2，SUN Wei3，CHE Xiaoyan1，YANG Haiming1，GE Ming4，DAI Wei1，SHIMIZU Fujio2
(1. The Department of Traditional Chinese Medicine，The Affiliated Drum Tower Hospital of Nanjing University Medical School，
Nanjing 210008，China; 2. The Department of Cell Biology，Institute of Nephrology，Niigata University Graduate School of Medical
and Dental Sciences，Niigata，Japan; 3. The Department of Nephrology，The Affiliated Hospital of Nanjing University of Traditional
Chinese Medicine，Nanjing 210029，China)

[Abstract] Objective：To examine inhibition action of multi-glycoside of Tripterygium wilfordii (GTW)on infiltration of
inflammatory cell in glomeruli with anti-Thy1.1 glomerulonephritis (anti-Thy1.1 GN)，and to clarify its effects on inflammatory in
vitro. Method：Two types of anti-Thy1.1 GN were induced in rats by a single or two intravenous injections with 500 μg of
anti-Thy1.1 mAb 1-22-3. Rats were randomly divided into two groups，the GTW group and control group，and sacrificed on day 7 or
on day 42 after induction of anti-Thy1.1 GN. Daily oral administration of different dose of GTW and distilled water as a control was
started from 3 days before injection or at the same time of injection till the day of sacrifice. Proteinuria was determined during days 7
or during days 42 . Infiltration of macrophage and T lymphocyte in glomeruli and mRNA expression of interleukin (IL)-2 and
interferon (IFN)-γ in renal tissue were examined. Result：Increase of infiltration of macrophage in reversible anti-Thy1.1 GN
model，glomerular macrophage infiltration and IL-2 mRNA expansion were attenuated by higher dose of GTW (75 mg·kg-1·d-1) ，and
increased accumulation of activated macrophage and T lymphocyte in irreversible anti-Thy1.1 GN model，accumulation of
macrophage and T lymphocyte in glomeruli and mRNA expansion of IL-2 and IFN-γ were decreased by middling dose of GTW (50
mg·kg-1·d-1) as well. Proteinuria was significantly ameliorated after GTW administration. Conclusion：The findings suggested that
different dose of GTW can ameliorate infiltration of inflammatory cell in glomeruli with anti-Thy1.1 glomerulonephritis in vitro by
decreasing the expression of IL-2 and IFN-γ.
[Key words] multi-glycoside of Tripterygium wilfordii；reversible anti-Thy1.1 glomerulonephritis; irreversible anti-Thy1.1
glomerulonephritis; macrophage; T lymphocyte; interleukin-2; interferon-γ
[责任编辑 古云侠]