全 文 ：参碱对 PLA2活性的抑制 ,可能是其抗炎机制之一。
有研究认为苦参碱的抗炎症作用主要表现在对
TN F与 IL-6的抑制作用 [5 ] ,我们的前期工作也证
实 TN F-α的确参与了 LPS的肝损害过程 ,但有报
道认为 PLA2参与了 TN F-α的产生机制 ,并且
s PLA2特异抑制剂 Quinacrine及 cPLA2特异抑制
剂 NDGA都能降低血中 TN F-α的水平 [6 ] ,由此可
见苦参碱的抗炎作用机制中 ,对 PLA2活性的抑制
可能是更上游的调节因素。 Ca2+ 在其中的作用可能
是把它们联系起来的关键 ,外周血白细胞内 Ca2+在
用了苦参碱后的浓度反而有所增加说明了这一点。
而这可能与苦参碱有 Ca2+ 通道激活作用相关。
寻找一种合适的 PLA2抑制剂应用在炎症损伤
病理过程中是人们普遍关心的问题 ,因为 PLA2不
但是炎症作用的关键酶 ,也是正常生理活动中必不
可少的 ,怎样抑制过多产生的 PLA2而不影响正常
生命过程是问题的关键。 苦参碱作为一种中草药的
天然成分 ,可能为此问题的解决开辟新思路。
参考文献:
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“五子四物瓜石汤”对雷公藤多苷所致雄性大鼠
生殖系统毒性的对抗作用及其机制研究
杨静娴 1 ,徐　红 1 ,韩国柱 1 ,梁文波 2 ,李传勋 1
( 1. 大连医科大学 药理教研室 ,辽宁 大连　 116023; 2. 大连大学医学院 药理教研室 ,辽宁 大连　 116022)
摘　要: 目的　研究自拟中药复方“五子四物瓜石汤” ( W T )对雷公藤多苷 ( GTW) 所致雄性大鼠生殖系统毒性的
对抗作用及其机制。 方法　雄性大鼠分别 ig大、中、小剂量的 W T与固定剂量的 GTW,连续给药 80 d,以单独 ig
GTW或 NS为对照 ,观察各组雄性大鼠睾丸脏器指数、精子数、精子活率、睾丸病理结构的变化 ,并用免疫放射分
析法 ( IRM A)测定各组雄性大鼠血清性激素水平。结果　与单用 GTW组比较 ,大或中剂量 W T可使睾丸重量明
显增加 ,精子数明显升高 ,精子活率显著提高 ,其中大剂量 WT可完全对抗 GTW对生殖上皮的损害 ,使睾丸结构
完全正常 ,血清睾酮维持于正常水平。 结论　“五子四物瓜石汤”能显著对抗雷公藤多苷对雄性大鼠生殖系统的毒
性作用 ,其对抗作用与 W T保护睾丸生精上皮免受 GTW的损害 ,并使血清睾酮水平维持于正常有关。
关键词: 雷公藤多苷 ;五子四物瓜石汤 ;毒性 ;睾丸脏器指数
中图分类号: R285. 53　　　文献标识码: A　　　文章编号: 0253 2670( 2002) 07 0632 03
Studies on counteractive effects of WUZI SIWU GUASHITANG* against GTW-induced
genital system toxicity in male rats and its mechanism
YANG Jing-xian
1 , X U Hong
1 , HAN Guo-zhu
1 , L IAN G Wen-bo
2 , L I Chuan-xun
1
( 1. Depar tment o f Pharmaco lo g y, Dalian Univ er sity of Medical Sciences, Dalian 116023, China;
2. Depar tment of Pharmaco lo gy , M edical Colleg e o f Dalian Univ er sity , Dalian 116022, China)
Abstract: Object　 To study the effects of WUZI SIWU GUASHIT ANG (W T) against mul ti-glyco-
sides of Tripterygium wil fordii Hook. f. ( GTW ) -induced geni tal system toxicity in male ra ts and i ts
mechanism. Methods　 Male rats in t reatment g roups w ere t reated respectiv ely w ith a 80-days oral admin-
ist ra tion of large-, middle- and small-do ses o f WT plus a fix ed do se of GTW. The ra ts as control w ere
·632· 中草药　 Chinese T raditional and Herbal Drug s　 2002年第 33卷第 7期
收稿日期: 2001-12-04
基金项目:大连市科委资助项目 ,现已通过成果鉴定 ,并获大连市科技进步三等奖
作者简介:杨静娴 ( 1963-) ,女 ,辽宁大连人 ,大连医科大学药理教研室副教授 ,博士研究生。 辽宁省教委基金课题主持人 ,国家自然科学
基金项目主要完成者 ,主要从事抗炎免疫药理及心血管药理研究 ,曾发表论文 10余篇 ,专著 2部。 Tel: ( 0411) 4664538
E-mai l: xiayang9999@ sina. com
t reated wi th GTW alone o r saline. Thereaf ter, the changes in testi s o rg an index , the number of spermato-
zoa, the rate of movable spermatozoa and the st ructure of spermatogenic cell epithlium w ere observ ed and
the serum testosterone lev el w as determined by IRM A. Then the comparison w as made betw een trea tment
and control g roups as to above variables. Results　 As compa red w ith GTW group, larg e- or middle-dose
o f W T significantly increa sed the w eight of testi s, the number of sperma to zoa and the ra te of movable
sperma to zoa. Larg e dose o f W T could relieve the damage of GTW to the sperma togenic cell epi thelium
completely and keep the serum testosterone at normal lev el. Conclusion　 The combined use o f GTW w ith
W T is very useful in relief of GTW-induced adverse reactions of g eni ta l system in male rats. The mecha-
nism by which W T exerts the counteractiv e effects is rela ted to protecting the spermatogenic cell epi theli-
um from being damaged by GTW , and keeping the serum testosterone at normal lev el.
Key words: multi-g lycosides of Tripterygium wil fordii Hook. f. ( GTW ); WUZI SIWU
GUASHIT ANG (WT) ; toxici ty; testis o rg an index
*
WUZI SIWU GUASHIT ANG ( WT ) consists o f Fructus Trichosanthis, Herba Dendrobii , Radix
Paeoniae Alba etc. It is used in the treatment o f autoimmune diseases, such as rheumatoid a rthriti s.
　　雷公藤多苷 ( mul ti-glyco sides o f Tripterygium
wilfordii Hook. f. , GTW ) 用于治疗各种自身免
疫性疾病如类风湿性关节炎等疗效显著。 但同时毒
副作用也很大 ,其中对生殖系统的毒性尤为严重 ,从
而影响了该药的广泛应用和对相关疾病的治疗。为
扩大 GTW的临床应用范围 ,提高安全性 ,我们根据
中医理论自拟中药复方“五子四物瓜石汤” ( WT)
与 GTW合用 ,旨在不妨碍其治疗作用的发挥而对
抗 GTW的毒性 ,我们曾报道过 WT对 GTW所致
雌性大鼠生殖系统毒性具有显著的对抗作用 [ 1] ,且
W T不妨碍 GTW的抗炎、免疫调节和改善血液流
变性等有益作用的发挥 [ 2, 3]。本文报道 WT对 GTW
所致雄性大鼠生殖系统毒性的对抗作用及可能机制。
1　材料
1. 1　动物:健康 SD大鼠 ,雄性 ,体重 180～ 220 g ,
由大连医科大学实验动物中心提供。
1. 2　药物:雷公藤多苷 ( GTW ): 江苏泰州制药厂 ,
批号 960101。“五子四物瓜石汤” ( W T):瓜蒌 ,石斛 ,
白芍 ,川芎 ,生地 ,当归 ,五味子 ,菟丝子 ,枸杞子 ,车
前子 ,覆盆子组成 ,药材均购自大连市药材公司。
W T+ GTW:将每千克体重应给剂量的相当药量的
W T 加水煎提并浓缩至 10 mL /kg ,再分别加入
GTW 30 mg /kg制成混悬液 ,冰箱保存备用。
1. 3　主要仪器: LX J-Ⅱ 型离心机 ,上海医用分析仪
器厂生产 ; BH2. 2-PM-10AD-C 35AD摄影生物显
微镜 ,日本产 ; BH-OLYM PUS光学显微镜 ,日本
产 ;库尔特 JT-型血球计数仪 ,美国贝克曼公司生
产 ; GAMMA-C12计数仪 ,美国德普公司生产。
1. 4　主要试剂: 125 I标记免疫放射分析药盒 (睾酮
抗体 ): 上海奥瑞恩诊断试剂有限公司提供。其他试
剂均为市售。
2　方法
2. 1　对雄性大鼠睾丸脏器指数的影响:取雄性健康
SD大鼠 48只 ,随机分为 6组 ,分别为生理盐水
( NS) 空白对照组 , GTW 30 mg /kg组 , W T 11. 27
g /kg组 , W T 11. 27 g /kg+ GTW 30 mg /kg组 , WT
5. 64 g /kg+ GTW 30 mg /kg组 , W T 2. 82 g /kg+
GTW 30 mg /kg组 ,按 10 mL /kg每天 ig一次 ,连
续给药 80 d,每周一次称体重调节给药量。实验结
束时用乙醚麻醉 ,剖腹 ,取双侧睾丸称重 ,并换算成
睾丸脏器指数 (睾丸重量 g /100 g体重 ) [ 4]。
2. 2　对精子数及精子活率的影响:取上述雄性大鼠
单侧副睾尾 ,并将其剪碎 ,置于 24 mL乐氏液中 , 37
℃ 孵育 15 min,涂片观察精子活率。另取上述副睾
尾液 0. 1 mL加入盛有 2 mL NS的试管中 ,用血球
计数板在显微镜下计数精子数 ,并换算成每毫升副
睾尾的精子数 [5 ]。
2. 3　雄性大鼠睾丸病理改变的显微观察:将雄性大
鼠睾丸以 10% 中性福尔马林固定 ,石蜡切片 , HE
染色 ,光镜检查 ,观察有无病理形态改变 [6 ]。
2. 4　对雄性大鼠血清性激素的影响:将上述雄性大
鼠于实验结束时 ,腹主动脉采血 , 1 500 r /min离心
10 min,分离血清 ,用双位点免疫放射分析法 ( IR-
MA)测定雄性大鼠血清睾酮含量 [6～ 8 ]。
2. 5　数据处理:数据分别采用成组设计的两样本均
数比较的 t检验 (实验数据以 x± s表示 )、两样本率
比较的 i2检验进行统计学分析。
3　结果
3. 1　对雄性大鼠睾丸脏器指数的影响: 见表 1。
GTW可使睾丸脏器指数明显降低 ,而大、中、小 3
·633·中草药　 Chinese T raditional and Herbal Drug s　 2002年第 33卷第 7期
种剂量 W T分别与 GTW合用后 ,该指数均有不同
程度的升高 ,特别是大剂量组显著高于 GTW组 ,说
明大剂量 WT可显著对抗 GTW导致的睾丸脏器
指数下降。
3. 2　对精子数及精子活率的影响: 见表 1。N S组及
W T组精子密度高 ,活动好 ,而 GTW组精子密度明
显低于 NS组及 W T组 ,活率为零 ,说明 GTW显
著降低了精子数并抑制了精子的活动力 ;而大、中、
小 3种剂量 WT分别与 GTW合用后精子数均高
于 GTW组 ,活力尚佳 ,其中尤以大、中剂量组最为
显著 ,说明 WT具有对抗 GTW导致的精子数减少
和活率下降作用 ,且该作用具有明显的剂量依赖性。
3. 3　对雄性大鼠睾丸病理变化的影响: 光镜下 , N S
组、W T组及大剂量 WT+ GTW组睾丸曲细精管
结构正常 ,管腔饱满 ,曲细精管内生精上皮细胞生长
活跃 ,层次分明。各级生精细胞分布和数量正常 ,有
大量精子形成 ,支持细胞、间质细胞形态结构正常。
而 GTW组及中、小剂量 W T+ G TW组曲细精管
内空虚无物 ,各级生精细胞明显减少 ,初级和次级精
母细胞显著减少 ,精子细胞和精子消失 ,精原细胞少
量存在 ,可见多核巨细胞形成。说明 GTW对睾丸生
精上皮有显著损伤 ,导致精子的发生明显减少及蜕
变 ,精子发育及成熟障碍 ,活力下降。而大剂量 WT
可完全对抗 G TW对生精上皮的损伤作用 ,使睾丸
曲细精管结构与正常无异。
3. 4　对雄性大鼠性激素的影响:见表 1。GTW可使
大鼠血清睾酮水平明显降低 ,而大、中剂量 W T+
GTW组睾酮水平均较 GTW组显著提高 ,说明大、
中剂量 W T能显著对抗 GTW所致的睾酮水平下
降 ,且有使睾酮水平增加的趋势。
表 1　对雄性大鼠睾丸脏器指数、精子数、精子活率及血清睾酮水平的影响
组　别 动物数 (只 ) 睾丸脏器指数 精子数 (× 107 /m L) 精子活率 血清睾酮水平 ( pmol /mL)
W T 11. 27 g /kg+ GTW 30 mg /g 8 0. 94± 0. 12# 1. 12± 0. 12# # > 5% 2. 85± 1. 86# #
W T 5. 64 g /kg+ GTW 30 mg /k g 8 0. 66± 0. 13 1. 07± 0. 21# # 0 2. 88± 0. 87# #
W T 2. 82 g /kg+ GTW 30 mg /k g 8 0. 66± 0. 14 0. 91± 0. 40# 0 0. 67± 2. 67
GTW 30 mg /kg 8 0. 59± 0. 23* * 0. 43± 0. 14* * 0 0. 64± 0. 26* *
N S 8 1. 41± 0. 12 6. 30± 0. 40 > 85% 2. 09± 0. 90
W T 11. 27 g /kg 8 1. 29± 0. 11 6. 41± 1. 24 > 85%
　　　　与 N S组比: * * P < 0. 01;　与 GTW组比: # P < 0. 05　# # P < 0. 01
4　讨论
可逆性不育是 GTW对生殖系统的主要毒性。
连续服用雷公藤制剂 2个月 ,可使男性患者精子数
明显减少 ,精子活率下降达不育水平 ,停药 2个月
后多可恢复 [9 ];本实验对雄性大鼠的研究结果表明 ,
GTW ( 30 mg /kg )每日 ig 1次 ,连续给药 80 d使
睾丸重量明显减轻 ,附睾尾精子数明显减少 ,精子活
率下降为 0,出现异常精子 ,而大或中剂量 WT
( 11. 27或 5. 64 g /kg )与 GTW ( 30 mg /kg)合用 ,
可显著对抗 GTW的上述毒副作用 ,使睾丸重量明
显增加 ,精子数明显升高 ,精子活率显著提高。 研究
还发现 , GTW组睾丸生精上皮有明显损害特征 ,说
明 GTW可直接抑制睾丸生精细胞 ,以精子细胞和
精子最为敏感 ,其次为精母细胞 ,精原细胞耐受性最
强 ,提示可能与 GTW非选择性抑制更新组织有丝
分裂有关。血清睾酮水平的下降是生殖上皮受损的
结果 [ 3 ]。 大剂量 W T ( 11. 27 g /kg ) 与 GTW ( 30
mg /kg ) 合用 ,可完全对抗 GTW对生殖上皮的损
害 ,使睾丸结构完全正常 ,生精上皮无受损征象 ,血
清睾酮水平维持于正常。实验中发现单独给予 W T
对正常大鼠生殖系统无影响 ,仅在 GTW造成生殖
系统损害时发挥对抗作用 ,故可认为 WT的对抗作
用机制与其保护睾丸生精上皮免受 GTW的损害 ,
并使血清睾酮水平维持于正常有关。
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