全 文 ：≈u  杨祖贻 o裴 瑾 o刘荣敏 o等 q赤芍和赤芍肉桂复方在小鼠血
浆中芍药苷浓度比较 q中药药理与临床 oussw ouskxl }w q
≈v  杨祖贻 o裴 瑾 o刘荣敏 o等 q温里药配伍对口服赤芍小鼠血
浆中芍药苷血药浓度的影响 q中草药 oussx ovykul }t|x q
≈w  裴 瑾 o杨祖贻 o刘荣敏 o等 1 • °2‹°≤ 法测定灌胃当归胡椒
复方小鼠血浆中阿魏酸的含量 q中草药 oussx ovykwl }vx{ q
Στυδψ ον ρελατιϖε βιοαϖαιλαβιλιτψ οφ φερυλιχ αχιδ οφ χοµ βινατιον
Ραδιξ Ανγελιχαε Σινενσισ ανδ Χορτεξ Χινναµ οµι ιν µιχε
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(t1 Σιχηυαν ΧανχερΙνστιτυτε , Χηενγδυ ytsswt , Χηινα ;
u1 Χολλεγε οφ Πηαρµαχψ, Χηενγδυ Υνιϖερσιτψ οφ Τραδιτιοναλ Χηινεσε Μεδιχινε , Χηενγδυ ytsszx , Χηινα)
[ Αβστραχτ] Οβϕεχτιϖε : ײ¶·∏§¼·«¨ ³«¤µ°¤¦²®¬±¨ ·¬¦¶¤±§µ¨ ¤¯·¬√¨¥¬²¤√¤¬¯¤¥¬¯¬·¼ ²©¦²°¥¬±¤·¬²± •¤§¬¬ „±ª¨ ¬¯¦¤¨ ≥¬±¨ ±¶¬¶¤±§ ≤²µ·¨¬
≤¬±±¤°²°¬q Μετηοδ : ׫¨ ¦²±·¨±·²©©¨µ∏¯¬¦¤¦¬§¬± ³¯¤¶°¤º¤¶§¨·¨µ°¬±¨ §§¬µ¨¦·¯¼ ¥¼ ‹°≤ ¤©·¨µ²µ¤¯ ¤§°¬±¬¶·µ¤·¬²± ²©≤²µ·¨¬ ≤¬±±¤°²°¬¬±
¦²°¥¬±¤·¬²±¬±§¬√¬§∏¤¯ ¼¯ º¬·« •¤§¬¬ „±ª¨ ¬¯¦¤¨ ≥¬±¨ ±¶¬¶1 ׫¨ ³¯¤¶°¤¦²±¦¨±·µ¤·¬²±2·¬°¨¦∏µ√¨º µ¨¨ ³¯²·¨§q׫¨ °¤¬± ³«¤µ°¤¦²®¬±¨ ·¬¦³¤µ¤° 2¨
·¨µ¶¤±§µ¨ ¤¯·¬√¨ ¥¬²¤√¤¬¯¤¥¬¯¬·¼ º µ¨¨ ²¥·¤¬±¨ §q Ρεσυλτ : ׫¨ ³¯¤¶°¤ ¦²±¦¨±·µ¤·¬²±2·¬°¨¦∏µ√¨²©©¨µ∏¯¬¦¤¦¯¬§¦²±©²µ° §¨·² ²±¨ 2¦²°³¤µ·° ±¨·
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[ Κεψ ωορδσ] • ¤§¬¬ „±ª¨ ¬¯¦¤¨ ≥¬±¨ ±¶¬¶~≤²µ·¨¬ ≤¬±±¤°²µ±¬~©¨µ∏¯¬¦¤¦¬§~µ¨ ¤¯·¬√¨¥¬²¤√¤¬¯¤¥¬¯¬·¼~ ‹°≤
≈责任编辑 古云侠 
≈收稿日期  ussx2sy2us
≈基金项目  国家自然科学基金资助项目kvsxztywzl
≈通讯作者  3 宋建新 oר¯ }ksuzl{vyyvysw o∞2°¤¬¯}¶²±ª¶¬±ª¶¬¬ƒ
¶¬±¤q¦²° q¦±
穿心莲内酯对铜绿假单胞菌 ±≥毒力因子的影响
李洪涛 o覃慧敏 o王卫华 o李国军 o吴春明 o宋建新 3
k华中科技大学 同济医学院 附属同济医院 o湖北 武汉 wvssvsl
≈摘要  目的 }观察穿心莲对铜绿假单胞菌 ±≥系统调控的毒力因子的影响 ∀方法 }分别测定 tu1x °ª#°pt穿
心莲内酯对铜绿假单胞菌生长曲线 !绿脓菌素 !胞外蛋白水解酶和弹性蛋白酶活性的影响 o同时检测穿心莲内酯对
±≥系统双突变株 °„’2°u株绿脓菌素 !蛋白水解酶和弹性蛋白酶活性的作用 ∀结果 }穿心莲内酯对铜绿假单胞菌
生长无明显影响 ∀穿心莲内酯能明显抑制绿脓菌素的分泌 !胞外蛋白水解酶和弹性蛋白酶活性 ∀穿心莲内酯对
°„’2°u绿脓菌素 !胞外蛋白水解酶和弹性蛋白酶活性无明显影响 ∀结论 }穿心莲内酯可能通过抑制铜绿假单胞菌
毒力因子产生而实现抗感染作用 ∀
≈关键词  穿心莲内酯 ~铜绿假单胞菌 ~毒力因子 ~密度阈值感应
≈中图分类号  • u{x1x ≈文献标识码  „ ≈文章编号  tsst2xvsukussyltu2tstx2sv
铜绿假单胞菌是人类重要机会致病菌之一 o近
年来国外对铜绿假单胞菌的密度阈值感应系统
k±≥l的研究证明 o通过抑制 ±≥系统可以减弱铜绿
假单胞菌毒力因子的分泌和影响生物被膜的形成 o
并能减弱其耐药性≈t  ∀本实验通过穿心莲内酯对铜
绿假单胞菌毒力因子及生物膜的影响研究 o初步探
讨作为具有抗菌中草药特性的穿心莲内酯对铜绿假
单胞菌 ±≥系统的影响 ∀
1 材料
111 菌株 铜绿假单胞菌野生株 °„’t oλασŒ2ρη¯Œ
#xtst#
第 vt卷第 tu期
ussy年 y月
中 国 中 药 杂 志
Χηινα ϑουρναλ οφ Χηινεσε Ματερια Μεδιχα
∂²¯1vt oŒ¶¶∏¨ tu
∏±¨ oussy
双突变株 °„’2°u均由丹麦哥本哈根大学医院吴红
馈赠 ∀
112 试剂和仪器 穿心莲内酯是穿心莲的主要成
分 o试验所用为以亚硫酸氢钠穿心莲内酯为主要成
分的水溶剂k原液含量为 xs °ª#°pt o以下简称穿
心莲内酯 ∀偶氮酪蛋白k¤½²¦¤¶¨¬±l和刚果红弹性蛋
白k¨¯¤¶·¬± ¦²±ª²µ¨§l购自美国 ≥¬ª°¤公司 o…培养基
k每升培养基含蛋白胨 ts ª~酵母提取物 x ª~‘¤≤¯ ts
ªl o°×≥… 培养基 kx h ³¨ ³·²±¨ o s1t h ·µ¼³·¬¦ ¶²¼
¥µ²·«l o³¶¨∏§²°²±¤¶¥µ²·«培养基k°…培养基 o每升培
养基含 ³µ²·¨²¶¨ ³¨ ³·²±¨ us ª~ª≤¯ u t1w ª~Žu≥’w ts
ªl≈u  ∀ ⁄˜ p yxs型紫外分光光度仪k…¨ ¦®°¤±l ∀
2 方法
211 生长曲线 对照组为 …培养基 o穿心莲内酯
组为含穿心莲内酯 tu1x °ª#°pt的 …培养基 ∀将
培养 tu «的 °„’t菌液分别加入对照组和实验组培
养基 o使待测菌液初始 Αyss为 s1sx o于 vz ε 下同时
培养 o取不同时间测量菌液波长为 yss ±°下的 Α∀
212 绿脓菌素和蛋白水解酶活性 对照组使用 °…
培养基 o穿心莲内酯组使用为含穿心莲内酯 tu1x °ª
#°pt的 °…培养基 ∀使用 °„’t野生株和 λασŒ2ρη¯Œ
双突变株 °„’2°uk°„’2°u株的培养按说明加入 xs
Λª#°pt四环素和 tx Λª#°pt氯化汞l ∀绿脓菌素
测定和蛋白水解酶活性测定按文献进行≈u ov  ∀
213 弹性蛋白酶活性 对照组使用 °×≥…培养基 o
穿心莲内酯组使用含穿心莲内酯 tu1x °ª#°pt的
°×≥…培养基 ∀菌株同上 ∀测定方法依文献进行≈w  ∀
214 统计分析 用 ≥°≥≥ tu1s统计软件 o采用 τ检
验比较各组之间的差异 ∀
3 结果
311 穿心莲内酯对铜绿假单胞菌生长的影响 结
果显示 o穿心莲内酯组铜绿假单胞菌生长曲线与对
照组无差异k图 tl o说明 tu1x °ª#°pt穿心莲内酯
对铜绿假单胞菌生长无明显影响 ∀
312 穿心莲内酯对铜绿假单胞菌绿脓菌素和蛋白
水解酶活性的影响 如图 u所示 o穿心莲内酯组绿
脓菌素分泌较对照组受到明显抑制k Π s1sxl o而
°„’2°u株 u组相比则无明显差别 ∀图 v表示铜绿
假单胞菌蛋白水解酶活性变化 o其中穿心莲内酯组
蛋白水解酶活性与对照组存在明显差异 k Π 
s1sxl o而 °„’2°u株 u组则无明显差别 ∀
313 弹性蛋白酶活性的影响 如图 w显示 o穿心莲

图 t 穿心莲内酯对铜绿假单胞菌生长的影响
图 u 穿心莲内酯对铜绿假单胞菌绿脓菌素的影响
图 v 穿心莲内酯对铜绿假单胞菌胞外蛋
白水解酶活性的影响
图 w 穿心莲内酯对铜绿假单胞菌弹性蛋白
酶活性的影响
内酯组铜绿假单胞菌所产弹性蛋白酶活性较对照组
显著降低k Π  s1sxl o而这种差异在 °„’2°u株中
无显著意义 ∀
4 讨论
细菌通过一种细胞密度依赖的 ±≥系统来进行
菌种内和菌种间信号传递 o并以此来调控毒力因子
在内的各种生物特性 ∀铜绿假单胞菌 ±≥系统参与
调控弹性蛋白酶 o绿脓菌素 o蛋白水解酶的活性和生
物被膜的形成 ∀ ±≥缺陷株与野生株生长无差异 o且
能有效抑制 ±≥系统而减弱毒力因子表达的呋喃酮
#ytst#
第 vt卷第 tu期
ussy年 y月
中 国 中 药 杂 志
Χηινα ϑουρναλ οφ Χηινεσε Ματερια Μεδιχα
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≤2vs对野生株无生长抑制作用≈t ox  ∀
已有研究显示 o通过 ±≥抑制剂抑制 ±≥系统 o
可以减弱毒力因子的表达和降低生物被膜的耐药
性 o因而有助于清除感染≈v oy oz  ∀冯星火等研究发
现穿心莲几乎无杀菌作用 o但穿心莲与抗生素联合
应用可恢复抗生素杀菌作用≈{  ∀提示穿心莲有可能
通过其他途径实现其抗感染作用 ∀
本结果显示 o穿心莲内酯对铜绿假单胞菌生
长状态无明显影响 o说明穿心莲临床疗效并非通
过杀菌实现 ∀对绿脓菌素的实验观察发现 o穿心
莲内酯能有效抑制铜绿假单胞菌绿脓菌素的表
达 ∀在对胞外水解酶和弹性蛋白酶活性检测结果
显示 o缺陷株 u种酶活性极低 o而穿心莲内酯能明
显减弱野生株的这 u种酶活性 ∀因此 o穿心莲内酯
可能通过抑制铜绿假单胞菌毒力因子产生而实现
抗感染作用 ∀
目前研究的 ±≥系统抑制剂中 o主要有海藻中
提取剂 ≤2vs和 ≤2xy以及人工合成的 ±≥信号分子
类似物 o这些 ±≥抑制剂能显著减少铜绿假单胞菌
毒力因子的表达≈t ov oy  ∀本次观察穿心莲内酯有与
±≥抑制剂相似的作用 o提示其可能通过抑制 ±≥系
统而减弱毒力因子表达 ∀
≈参考文献 
≈t  ‹ ±¨·½¨ µ o • ∏‹ o„±§¨µ¶¨±…o ετ αλ. „·¨±∏¤·¬²± ²© Πσευδοµονασ
αερυγινοσα √¬µ∏¯ ±¨¦¨ ¥¼ ∏´²µ∏° ¶¨±¶¬±ª¬±«¬¥¬·²µ¶q Εµβο ϑ , ussv ouu
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½¤·¬²± ²© ª¨ ±¨ ¶©²µ¤ ¶¨¦²±§ ¤±·«µ¤±¬¯¤·¨ ¶¼±·«¤¶¨ ¬± Πσευδοµονασ
αερυγινοσα}¬±·¨µ¦«¤±ª¨¤¥¬¯¬·¼ ²©·«¨ ·º² ¤±·«µ¤±¬¯¤·¨ ¶¼±·«¤¶¨¶ ¤±§
√¨²¯∏·¬²±¤µ¼¬°³¯¬¦¤·¬²±¶q ϑ Βαχτεριολ, t||s otzukul }{{w1
≈v  ‹ ±¨·½¨ µ o •¬¨§¨¯ Žo •¤¶°∏¶¶¨± × …o ετ αλ. Œ±«¬¥¬·¬²± ²© ∏´²µ∏°
¶¨±¶¬±ª¬± Πσευδοµονασ αερυγινοσα ¥¬²©¬¯° ¥¤¦·¨µ¬¤ ¥¼ ¤ «¤¯²ª¨ ±¤·¨§
©∏µ¤±²±¨ ¦²°³²∏±§q Μιχροβιολογψ, ussu otw{k°·tl }{z1
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αερυγινοσα ∏´²µ∏° ¶¨±¶¬±ª ¥¼ ¶¼±·«¨·¬¦¤∏·²¬±§∏¦¨µ¤±¤¯²ª¶q Χηεµ
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µ∏°2¶¨±¶¬±ª¤±§ ±¨«¤±¦¨ ¥¤¦·¨µ¬¤¯ ¦¯ ¤¨µ¤±¦¨ ¬± Πσευδοµονασ αερυγι2
νοσα ∏¯±ª¬±©¨¦·¬²±¬± °¬¦¨ q ϑ Αντιµιχροβ Χηεµοτηερ, ussw oxvkyl }
tsxw1
≈{  冯星火 o赵广福 o崔连东 o等 q铜绿假单胞菌生物被膜对抗菌
药物作用的实验研究 q微生物学报 ousss ows }uts1
Εφφεχτ οφ ανδρογραπηολιδε ον ΘΣ ρεγυλατινγ ϖιρυλενχεφαχτορσ
προδυχτιον ιν Πσευδοµονασ αερυγινοσα
Œ ‹²±ª2·¤²o±Œ‘‹∏¬2°¬±o • „‘Š • ¬¨2«∏¤oŒ Š∏²2­∏±o • ˜ ≤«∏±2°¬±ªo≥’‘Š ¬¤±2¬¬±
( Τονγϕι Ηοσπιταλ, Ηυαζηονγ Υνιϖερσιτψ οφ Σχιενχε ανδ Τεχηνολογψ, Ωυηαν wvssvs , Χηινα)
[ Αβστραχτ] Οβϕεχτιϖε : ײ ¬±√ ¶¨·¬ª¤·¨ ·«¨ ©¨©¨¦·²© ¤±§µ²ªµ¤³«²¯¬§¨ ²± √¬µ∏¯ ±¨¦¨ ©¤¦·²µ¶³µ²§∏¦·¬²± ¬± Πσευδοµονασ αερυγινοσα .
Μετηοδ : Šµ²º·«µ¤·¨o³¼²¦¼¤±¬±o³µ²·¨²¯¼·¬¦¤¦·¬√¬·¼ ¤±§¨¯¤¶·¤¶¨ ¤¦·¬√¬·¼ º µ¨¨ ° ¤¨¶∏µ¨§º¬·«²µº¬·«²∏··«¨ ³µ¨¶¨±¦¨ ²©¤±§µ²ªµ¤³«²¯¬§¨ q׫¨
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≈责任编辑 古云侠 
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第 vt卷第 tu期
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中 国 中 药 杂 志
Χηινα ϑουρναλ οφ Χηινεσε Ματερια Μεδιχα
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