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Effects of Annao tablet on S100B and NPY of cortex in chronic epilepsy rats

安脑片对慢性点燃癫痫大鼠脑皮质S100B蛋白和神经肽的影响



全 文 :细管电泳分离 ≈ q福州大学学报 k自然科学版 loussxovv
kyl}{uuq
≈{  许启泰 o杜钢军 o林海红 q板蓝根醇沉物的药理作用 ≈ q中
国医院药学杂志 oussvouvktsl} x{zq
Μεχηανισµ στυδψ οφ αντι2ινφλυενζα εφφεχτσ οφ Ρ αδιξ Ισατιδισωατερ εξτραχτ
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(t. Ινστιτυτε οφ Βιοτεχηνολογψ, Φυζηου Υνιϖερσιτψ, Φυζηου vxsssu, Χηινα ;
u. Τεχηνολογψ Χεντρε οφ Φυϕιαν Εντρψ2Εξιτ Ινσπεχτιον ανδ Θυαραντινε Βυρεαυ, Φυζηου vxsssu, Χηινα)
[ Αβστραχτ] Οβϕεχτιϖε: ײ µ¨¶¨¤µ¦«·«¨ ° ¦¨«¤±¬¶° ²©·«¨ ¬±«¬¥¬·¬²± ©¨©¨¦·¶²©…• ∞ ²± ¦¨¯¯ ¤·¤¦«° ±¨·²©¬±©¯∏¨ ±½¤√¬µ∏¶¥¼ ¦¤³2
¬¯¯¤µ¼ ¨¯ ¦¨·µ²³«²µ¨¶¬¶q Μετηοδ : ׫¨ °²µ³«²¯²ª¬¦§¬©©¨µ¨±¦¨ ²©µ¨§¦¨¯¯¶¤©·¨µ·µ¨¤·¬±ªº¬·«…• ∞ ¬±©¨¦·¨§¥¼ ¬±©¯∏¨ ±½¤√¬µ∏¶º¤¶§¨ ·¨¦·¨§
º¬·«°¬¦µ²¶¦²³¨ o ¦¤³¬¯¯¤µ¼ ¨¯ ¦¨·µ²³«²µ¨¶¬¶¤±§‹„q Ρ εσυλτ: ׫¨ ³µ¨·µ¨¤·° ±¨·²©·«¨ ±²µ°¤¯ ¦¨ ¯¯¶º¬·«…• ∞ ¬±«¬¥¬·¨§·«¨ ¤·¤¦«° ±¨·²©
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Χονχλυσιον: ׫¨ µ¨¶∏¯·¶¬±§¬¦¤·¨·«¤··«¨ ¬±«¬¥¬·¬²± ©¨©¨¦·¶²©…• ∞ ²± ¦¨¯¯ ¤·¤¦«° ±¨·²©¬±©¯∏¨ ±½¤ √¬µ∏¶°¤¼ ¥¨ ¤± ¬°³²µ·¤±·° ¦¨«¤2
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[ Κεψ ωορδσ] Œ¶¤·¬§¬¶• ²²·¶~ µ¨§¥¯²²§¦¨¯¯~ ¦¤³¬¯¯¤µ¼ ¨¯ ¦¨·µ²³«²µ¨¶¬¶~ ¬±©¯∏¨ ±½¤√¬µ∏¶~ ¤±·¬√¬µ¤¯ ° ¦¨«¤±¬¶°
≈责任编辑 刘  
≈收稿日期   ussx2tt2vs
≈通讯作者   3 方永奇 o ר¯}ksuslvyx|twxso ∞2°¤¬¯}ƒ¤±ª¼´ uƒ tyv1¦²°
安脑片对慢性点燃癫痫大鼠脑皮质 ≥tss…
蛋白和神经肽的影响
方若鸣 o方更利 o方永奇 3
k广州中医药大学 o广东 广州 xtswsxl
≈摘要   目的 }研究安脑片 k主成分 Β2细辛醚 l对慢性点燃癫痫大鼠脑皮质 ≥tss…蛋白和神经肽 ≠ k‘°≠ l的
影响 ∀方法 }大鼠随机分为 x组 o安脑片高 !中 !低 k相当于 Β2细辛醚 tssoxsoux °ª# ®ªpt l剂量组 o阳性药对照组
k苯妥英钠 lo阴性对照组 k基质 l∀灌胃给药 o观察安脑片对抗青霉素点燃癫痫的作用 o测定脑皮质 ≥tss…蛋白和
‘°≠的含量 ∀结果 }安脑片能降低癫痫的发作级别 o延长发作潜伏期 o减少湿狗样抖动次数 ~能降低癫痫大鼠脑皮
质 ≥tss…蛋白和 ‘°≠的含量 ∀结论 }安脑片有显著抗癫痫作用 o能减轻因癫痫发作引起的神经元损伤 ∀
≈关键词   安脑片 ~Β2细辛醚 ~癫痫 ~≥tss…蛋白 ~神经肽 ≠
≈中图分类号   • u{x1x ≈文献标识码   „ ≈文章编号   tsst2xvsukussylus2tzt|2sv
Β2细辛醚是石菖蒲发挥药理作用的主要物质基
础 ≈t  ∀作者曾报道 Β2细辛醚对动物脑电有抑制作
用 o其主要功效为镇静安神 ≈uov  oΒ2细辛醚能透过血
脑屏障进入脑组织直接作用于中枢神经系统 ≈w  ∀
最近又观察到安脑片 k主成分为 Β2细辛醚 l对治疗
癫痫有确切的效果 ≈x  ∀本研究进一步观察安脑片
对慢性点燃癫痫大鼠脑皮质 ≥tss…蛋白和神经肽 ≠
k‘°≠ l的影响 ∀
#|tzt#
第 vt卷第 us期
ussy年 ts月
中 国 中 药 杂 志
Χηινα ϑουρναλοφ Χηινεσε Ματερια Μεδιχα
∂ ²¯1vtoŒ¶¶∏¨ us
’¦·²¥¨ µoussy
1 材料和方法
111 动物
≥⁄大鼠 xs只 o雌雄各半 o体重 t{s ∗ uus ªo购
自广东省医学实验动物中心 o动物合格证号 }≥≤÷Ž
k粤 lussv2sssuo粤监证字 ussx„’ts∀
112 仪器与试剂
…Œ’ • „⁄ xxs免疫酶标仪 ~ƒp uss{°≥Χ放射
免疫计数器 ~„∞ p uss电子分析天平 o ·¨¯ µ¨~vŽvs
高速冷冻离心机 k德国 ≥ŒŠ „l~ŒŽ„× p ux电动匀
浆机 k德国 l∀苯妥英钠 k上海辛帕斯制药有限公
司 o批号 swsystl~注射用青霉素钠 k°Šo华北制药
股份有限公司 o批号 °sxsuutwl∀ ≥tss…蛋白 ∞Œ„
Ž¬·k瑞典 ≤¤±„ª产品 o批号 zst2tsl~‘°≠ • Œ„ Ž¬·
k解放军总医院科技开发中心放免所 o批号
ussxs|uvo批内变异 • ≥⁄  tsh o批间变异 • ≥⁄ 
txh l∀
113 药液制备
石菖蒲 }购于广州中医药大学第一附属医院 o经
鉴定为天南星科植物石菖蒲 Αχορυσ ταταρινουιι ≥¦«²·
的干燥根茎 ∀实验用药液由本院实验中心制备 ∀
Β2细辛醚 }提取石菖蒲挥发油 o精制得到 Β2细辛
醚 o经中国广州分析测试中心 Š≤ 2 ≥o‘ • oŒ• 检
测 o证实其成分为 Β2细辛醚 o纯度 ||1xxh ∀
安脑片 }Β2细辛醚用 Β2环糊精包含 o加淀粉 !纤
维素等制成安脑片 ∀每片含 Β2细辛醚 ys °ªo实验
时配成水溶液 ∀
114 分组与给药
大鼠随机分为 x组 o安脑片高 !中 !低 k相当于
Β2细辛醚 tssoxsoux °ª# ®ªpt l剂量组 o阳性药对照
组 k苯妥英钠 lo阴性对照组 k基质 l∀灌胃给药 o每
日 u次 ∀
115 方法
11511 °Š点燃大鼠癫痫实验 大鼠 ¬³°Š { ≅ tsx ˜
# ®ªpt o每周 u次 o连续 w周 ∀停药 t周后 o用相同剂
量 °Š测试 o先记录测试时的发作级别 o再给药 z §o每
日 u次 ∀末次给药 vs °¬±后 o给相同剂量 °Š点燃癫
痫 o记录发作级别 o并观察发作潜伏期 !湿狗样抖动
k• ⁄≥l次数 k不发作者潜伏期按 vs °¬±计算 l∀
大鼠惊厥行为评分标准 ≈y  os级 }没有行为上的
发作 ~t级 }节律性点头或头部颤搐 ~u级 }阵挛性咀
嚼 ~v级 }头部颤搐加前肢阵挛性抽搐 ~w级 }袋鼠姿
势 k上身直立 l~x级 }跌倒 ~y级 }强直性惊厥 ∀
11512 取样与指标检测 癫痫实验观察完毕后大
鼠断头 o取脑皮质用预冷生理盐水 k‘≥l洗 u次 o滤
纸吸干后 o电子分析天平称重 o加冷 ‘≥ v °# ªpt o
电动匀浆机匀浆 o高速冷冻离心机 p ts ε tx sss µ
# °¬±pt离心 tx °¬±o取上清液 p ws ε 保存待测 ∀
免疫酶标法测定 ≥tss…蛋白 !放免法测定 ‘°≠∀按
试剂盒提供方法进行检测 ∀
116 统计学方法
实验数据均以 cξ ? σ表示 o用 ≥°≥≥ tt1s软件进
行统计 ∀
2 结果
211 °Š点燃大鼠癫痫的作用
°Š点燃癫痫大鼠逐渐出现唇须抖动 !阵挛性咀
嚼 !头部颤搐 !前肢阵挛性抽搐 !袋鼠姿势 k上身直
立 l!遗尿及 • ⁄≥等典型癫痫发作 ∀安脑片可降低
癫痫的发作级别 o延长发作潜伏期 o减少 • ⁄≥次数
k表 tl∀
表 t 安脑片对 °Š点燃大鼠癫痫的作用 kcξ ? σ, ν € tsl
组别
剂量 r°ª#
®ªpt # §pt
给药前后差值
惊厥级别 潜伏期 r°¬± • ⁄≥r次
基质 u{ p sqt ? sq| p uqv ? uqs sqs ? tqz
苯妥英钠 vy sq| ? sq{tl vqu ? uqsvl vqz ? uq{ul
安脑片 xs tq{ ? tquul uqy ? uq{vl uq{ ? uqxtl
tss tqz ? sq{vl uq| ? tq|vl uq{ ? tqyul
uss sq| ? sq{tl uq| ? tqtvl xqt ? uqwvl
注 }与基质对照组比较 tl Π  s. sx, u) Π  s. st, v) Π  sqsst
k表 u同 l
212 对癫痫大鼠脑皮质 ≥tss…蛋白和 ‘°≠的影响
°Š点燃癫痫大鼠脑皮质 ≥tss…蛋白和 ‘°≠明
显增高 o安脑片能显著降低癫痫大鼠脑皮质 ≥tss…
蛋白和 ‘°≠的含量 o且呈明显的量效关系 k表 ul∀
表 u 安脑片对癫痫大鼠脑皮质 ≥tss…o‘°≠
的影响 kcξ ? σ, ν € tsl
组别
剂量 r°ª#
®ªpt # §pt
≥tss…蛋白
rΛª# ªpt
‘°≠
r±ª# ªpt
基质 u{ vqt{ ? sq{v yqv{ ? sqzv
苯妥英钠 vy uqvs ? sqz|tl xqxy ? sq|stl
安脑片 xs uqu| ? sq|ttl xq|z ? sqwz
tss uqtz ? tqsvtl xqzz ? sqwwtl
uss uqtv ? sq{ztl xqyx ? sqwvtl
3 讨论
醒脑开窍药是一类具有辛香走窜之性 o以通关
开窍 !启闭醒神为主要功效的中药 ∀安脑片的成分
是醒脑开窍药石菖蒲的主要有效成分 Β2细辛醚 o成
#suzt#
第 vt卷第 us期
ussy年 ts月
中 国 中 药 杂 志
Χηινα ϑουρναλοφ Χηινεσε Ματερια Μεδιχα
∂ ²¯1vtoŒ¶¶∏¨ us
’¦·²¥¨ µoussy
分单一 o易于质控 ~Β2细辛醚能透过血脑屏障进入脑
组织 ≈w  o且在脑内有较高的分布 ≈z  ∀
本研究用 °Š点燃大鼠慢性癫痫 o造模 y周 o大
鼠逐渐出现唇须抖动 !阵挛性咀嚼 !头部颤搐 !前肢
阵挛性抽搐 !袋鼠姿势 !遗尿及 • ⁄≥等典型的癫痫
发作 o说明造模是成功的 ∀青霉素是 Š„…„受体拮
抗剂 o引起抑制性突触活动减弱或兴奋性突触活动
增强 o从而导致惊厥 ∀
‘°≠是由 vy个氨基酸组成的一种神经肽 o是
中枢神经系统内含量最高的神经肽之一 ∀ ‘°≠与
癫痫发作明显相关 o癫痫发作时脑内 ‘°≠明显增
多 o‘°≠ 免疫反应活性增高 ≈{  ~也有报道外源性
‘°≠有抗癫痫作用 o认为发作后 ‘°≠增多是机体抑
制癫痫发作的一种代偿机制 o是机体自我保护机制
的表现 ≈|  ∀ ≥tss…蛋白是一组低分子量 kus ®⁄l的
高级肌钙蛋白 ≤o对脑损伤有高度的敏感性和特异
性 o是一种敏感 !特异 !有效 !可靠的脑损伤生化标志
物 ≈ts  o≥tss…浓度过高会导致神经元凋亡 ≈tt  ∀本
研究选择 ‘°≠与 ≥tss…作为癫痫发作后脑损伤的
指标 o结果显示 o安脑片能降低癫痫的发作级别 o延
长发作潜伏期 o减少 • ⁄≥次数 o说明该药有抗癫痫
的作用 ∀安脑片能降低癫痫大鼠脑皮质 ≥tss…蛋
白和 ‘°≠的含量 o从一个侧面揭示了安脑片抗癫痫
作用的机制 o可能是减轻因癫痫发作引起的神经元
损伤 ∀
≈参考文献  
≈t  吴启端 o方永奇 o李 翎 o等 q石菖蒲对中枢神经系统兴奋
性的有效部位研究 ≈ q医药导报 o ussuo utkzl}v||q
≈u  方永奇 o吴启端 o王丽新 o等 q石菖蒲对中枢神经系统兴奋 2
镇静作用研究 ≈ q广西中医药 o ussto uwktl}w|q
≈v  方永奇 o李 翎 o邹衍衍 o等 q石菖蒲对缺血再灌注脑损伤大
鼠脑电图和脑水肿的影响 ≈  q中国中医急症 o ussvo tu
ktl}xxq
≈w  方永奇 o魏 刚 o柯雪红 q Š≤ 2 ≥分析石菖蒲挥发油透大鼠
血脑屏障的成分研究 ≈ q中药新药与临床药理 o ussuo tv
kvl}t{tq
≈x  方若鸣 o方更利 o方永奇 q安脑片治疗癫痫的药效观察 ≈ q
中成药 o ussyo u{kzl}tsuwq
≈y  ’±² o ≤«¤°²µµ² Šo ײ°¤∏¶ƒo ·¨¤¯q ∞¯¨ ¦·µ²¦²µ·¬¦²ªµ¤³«¬¦¤¯
²¥¶¨µ√¤·¬²± ²© ¶¨¬½∏µ¨ ¬±§∏¦¨§ ¥¼ ³¨ ±·¼¯ ±¨ ·¨¨·µ¤½²¯ ¬±­¨¦·¬²± ¬±
µ¤·¶≈ q ∞¬³ ‘¨ ∏µ¤¯o t|{uo z{}zq
≈z  吴宏斌 o方永奇 q Β2细辛醚在大鼠体内的药代动力学 ≈ q药
学学报 o usswo v|ktsl}{vyq
≈{   ²µ¬±²·² ×o ‘¤ª¤² ‹ o ≠²¶«¬°¤·¶∏ o ·¨¤¯q °¤·«²ª¨ ±¬¦µ²¯¨²©
ª¯∏·¤°¤·¨ ¬± «¼³¨ µ·«¨ µ°¬¤ ¬±§∏¦¨§ ¶¨¬½∏µ¨¶≈  q ∞³¬¯¨ ³¶¬¤o
t||vo vwktl}wwzq
≈|  陈丽丽 o杨晓苏 o肖 波 o等 q癫痫大鼠海马中神经肽 ≠表
达的动态观察及其作用探讨 q中国神经免疫学和神经病学杂
志 ousswottkul}zyq
≈ts  苏 亮 o胡世红 q ≥tss蛋白与脑损伤 ≈ q广西医科大学学
报 o usswo utkvl}wyuq
≈tt  ° ·¨µ²√¤× ∂ o ‹∏o ∂ ¤± ∞ §¯¬®q  ²§∏¯¤·¬²± ²©ª¯¬¤¯ ¤¦·¬√¤·¬²±
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¦¼·¨ ¤±§ °¬¦µ²ª¯¬¤¯ ¦∏¯·∏µ¨¶≈  q …µ¤¬± • ¶¨¨¤µ¦«o ussso {xv}
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Εφφεχτσ οφ Ανναο ταβλετ ον ΣtssΒ ανδ ΝΠΨ οφ χορτεξ ιν χηρονιχ επιλεπσψ ρατσ
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(Γυανγζηου Υνιϖερσιτψ οφ ΤραδιτιοναλΧηινεσε Μεδιχινε, Γυανγζηου xtswsx, Χηινα)
[ Αβστραχτ] Οβϕεχτιϖε: ײ ¶·∏§¼ ·«¨ ©¨©¨¦·¶²©„±±¤² ·¤¥¯ ·¨k°¤¬± ¦²°³²± ±¨·¬¶Β2¤¶¤µ²± l¨ ²± ≥tss… ¤±§‘°≠ ²©¦²µ·¨¬ ¬±
¦«µ²±¬¦ ³¨¬¯¨ ³¶¼ µ¤·¶q Μετηοδ : ׫¨ µ¨° §¨¼ º¤¶¤§°¬±¬¶·¨µ¨§²µ¤¯ ¼¯q ׫¨ ©¨©¨¦·¶º µ¨¨ ²¥¶¨µ√ §¨¬± ¦²±√∏¯¶¬²± °²§¨ ¯¬±§∏¦¨§¥¼ °Šo
·«¨ ± ≥tss… ³µ²·¨¬± ¤±§‘°≠ ²©¦²µ·¨¬º µ¨¨ §¨ ·¨µ°¬± §¨q Ρ εσυλτ: „±±¤²·¤¥¯ ·¨¦²∏¯§§¨ ³µ¨¶¶·«¨ ³¨¬¯¨ ³·¬¦§¨ ªµ¨ o¨ ³²¶·³²±¨¶³¤¶° ¤¯2
·¨±·³¨ µ¬²§¤±§µ¨§∏¦¨ ·«¨ º ·¨§²ª¶¤°³¯¨k• ⁄≥l ·¬° ¶¨q ׫¨ µ¨° §¨¼ ¦²∏¯§§¨ ¦¯¬±¨≥tss… ¤±§‘°≠ ²©¦²µ·¨¬¬± ¦«µ²±¬¦ ³¨¬¯¨ ³¶¼ µ¤·¶q
Χονχλυσιον: „±±¤²·¤¥¯ ·¨«¤¶²¥√¬²∏¶¤±·¬¨³¬¯¨ ³·¬¦ ©¨©¨¦·¶¤±§¦¤± µ¨§∏¦¨ ·«¨ ± µ¨√¨¦¨¯¯ §¤°¤ª¨ ¬±§∏¦¨§¥¼ ³¨¬¯¨ ³¶¼q
[ Κεψ ωορδσ] „±±¤²·¤¥¯ ·¨~ Β2¤¶¤µ²± ~¨ ³¨¬¯¨ ³¶¼~ ≥tss…~ ‘°≠
≈责任编辑 古云侠  
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第 vt卷第 us期
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中 国 中 药 杂 志
Χηινα ϑουρναλοφ Χηινεσε Ματερια Μεδιχα
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