全 文 ：u种工艺提取的龙血竭中
对羟基苯甲酸乙酯的含量测定
宋月英 o张庆云 o胡迎庆 3 o邓昌沪
k中国人民武装警察部队 医学院 o天津 vsstyul
≈摘要 目的 }测定不同工艺提取的龙血竭中对羟基苯甲酸乙酯的含量 ∀方法 }样品用甲醇溶解 o经 ×≤分离
甲醇洗脱后 o再以 ≤t{键合硅胶为固定相 o乙腈2t h冰醋酸kvtΒy|l为流动相 o检测波长 uxz ±° o外标法定量 ∀结果 }
对羟基苯甲酸乙酯在 s qusy ∗ w qtu ±ª有良好线性关系 oρ s q||| { o方法平均回收率为 |z qu h o ≥⁄为 t qw h ∀结
论 }免加热工艺提取的龙血竭中对羟基苯甲酸乙酯含量高于传统工艺提取的血竭 ∀
≈关键词 龙血竭 ~免加热工艺 ~传统工艺 ~°≤ ~对羟基苯甲酸乙酯
≈中图分类号 u{v o u{w qt ≈文献标识码 ≈文章编号 tsst2xvsukusswlsw2svuv2sv
龙血竭具有活血散瘀 !消炎止痛 !收敛止血 !生
肌敛疮 !补血益气等功效 o其中主要含龙血素 o龙
血素
oz owχ2二羟基黄酮和 x oz2二羟基2wχ2甲氧基
黄酮等黄酮类化合物 o紫檀 !白藜芦醇以及甾醇类
和皂苷类化合物等成分≈t ou ot|||年国家药品监督
管理局颁布的国家标准≈ • ≥v2s{uk2styl2||kl
中 o作为一类新药材收载 ∀龙血竭为树脂类药材 o系
采用传统的乙醇提取工艺自剑叶龙血树 ∆ραχαενα
χοχηινχηινενσισk²∏µql ≥ q≤ q≤«¨ ±的含脂木材中提取
的树脂 o目前国内市场上采用传统提取工艺生产的
龙血竭主要有芒果牌血竭 !柬龙牌血竭和大观牌血
竭等 ∀厦门今润丰华医药科学有限公司采用一种新
型的免加热提取工艺k即运用压力交变法 o给浸泡药
材的溶媒施加压强 o强制植物细胞几何形状改变 o改
善细胞壁两侧的渗透压 o溶出细胞内各成分 o分离除
去固相杂质 o再利用低温干燥空气热平衡法干燥 o得
到提取物l进行提取 o得到的/龙血竭0为疏松的薄片
状物 ∀作者对 u种不同提取工艺提取的龙血竭进行
分析 o发现免加热工艺提取的龙血竭中各含化合物
含量与传统工艺提取具较大差异 o其中免加热提取
工艺的龙血竭中主要有效成分二氢查耳酮类化合物
龙血素 o
的含量均高于传统工艺提取龙血竭中
≈收稿日期 ussv2tu2sx
≈基金项目 国家科技创新计划ksu≤2tx2st2s{l
≈通讯作者 3 胡迎庆 oר¯ }ksuulysxz{t|{ o∞2°¤¬¯}¼¬±ª´¬±ª«∏
«²·°¤¬¯q¦²°
的含量 o而具有抗真菌作用的 类化合物紫檀 的
含量却低于传统工艺提取龙血竭中的含量≈v ow ∀作
者对 u种不同工艺的龙血竭进行抗真菌研究 o结果
显示免加热工艺龙血竭的抗真菌作用明显优于传统
工艺提取龙血竭 ∀林启云≈x 报道广西血竭对 ts种
常见的细菌和皮肤癣菌具有较好的抑制作用 o对羟
基苯甲酸乙酯具有抗菌防腐作用 o在血竭中是否为
抗细菌 !真菌和其他抗微生物的主要成分之一呢
作者将样品用甲醇溶解 o经 ×≤ 分离 o甲醇洗脱后 o
用反相 °≤法测定 u种不同工艺提取的龙血竭中
对羟基苯甲酸乙酯的含量 ∀
1 仪器与药品
1 q1 仪器 日本岛津 ∂ p tyst紫外分光光度仪 ~
日本岛津 ≤ p ts×高效液相色谱仪 o≥°⁄p ts紫
外检测仪 o≤ p { 记录仪 o≤× p ts≥柱箱 ∀ ¬¯¯2
¶²±微量移液器k法国l ∀
1 q2 药品 免加热工艺提取血竭k厦门今润丰华医
药科学有限公司 o批号stsystl ~柬龙牌血竭k中
国医学科学院版纳华胜制药厂 o批号|ysxtx ~l ~
芒果牌广西血竭k广西中医学院药厂生产 o批号
||sxsxl ~大观牌血竭 k昆明 大制药 厂 o批 号
ussststzl ~对羟基苯甲酸乙酯对照品k自制 o归一化
法含量 |{ qx h l ~乙腈k色谱纯 o特级品 o天津市康
科得科技有限公司 o批号 stswsxl o冰醋酸k分析纯 o
天津市化学试剂一厂l ∀
2 方法与结果
2 q1 测定波长的选择 精密称取对照品适量 o置
#vuv#
第 u|卷第 w期
ussw年 w月
中 国 中 药 杂 志
Χηινα ϑουρναλ οφ Χηινεσε Ματερια Μεδιχα
∂²¯ qu| o¶¶∏¨ w
³µ¬¯oussw
ux °量瓶中 o加甲醇溶解并稀释至刻度 o在 uus ∗
wxs ±°内进行扫描 o记录紫外吸收光谱 o结果对羟
基苯甲酸乙酯的最大紫外吸收波长为 uxz ±°∀
2 q2 对照品溶液的制备 精密称取 ys ε 干燥恒重
的对羟基苯甲酸乙酯 ts qv °ªo置 tss °量瓶中 o甲
醇超声溶解定容 o制成浓度为 tsv °ª#pt的对照品
储备溶液 ∀
2 q3 供试品溶液的制备 精密称取 ts °ª样品于 t
°量瓶中 o甲醇超声溶解定容 o在以羧甲基纤维素
钠为黏合剂的硅胶 ƒuxw薄层板kts ¦° ≅ ts ¦°l上 o
于左边距 t ¦°o底边距 !右边距 u ¦°处呈条状点样 o
于右边距 t ¦°处点浓度为 t ª#pt对照品溶液 x
Λo以石油醚2醋酸乙酯kxΒtl为展开剂展开 o置紫外
灯kuxw ±°l下观察荧光 o并与对照品荧光斑点对照 o
标记供试品与对照品相应位置的色斑 ∀按标记刮取
色斑 o于 x °量瓶中 o加甲醇至刻度 o用 s qx Λ°滤
膜滤过 o作为供试品溶液 ∀
2 q4 色谱条件 色谱柱 }³«¨ ±²°¨ ±¨ ¬ ≤t{kw qy °° ≅
uxs °° ox Λ°l o北京先明乐施科技发展有限公司 ~流
动相乙腈2t h冰醋酸kvtΒy|l ~流速 t °#°¬±pt ~检
测波长 uxz ±° ~灵敏度 s qsu ƒ≥ ~柱温 ws ε ~上述
色谱条件下 o对羟基苯甲酸乙酯的保留时间 ty °¬±
左右 ~柱效以对羟基苯甲酸乙酯计算 o理论塔板数为
w tss ∀对照品和样品 °≤色谱图见图 t ∀
图 t 对照品与样品 °≤色图谱
q对照品 ~
q免加热工艺血竭样品 ~≤ q大观牌血竭样品 ~t q对羟基苯甲酸乙酯
2 q5 线性关系 将对羟基苯甲酸乙酯对照品储备
溶液分别配置成浓度s .sts v os qswt u os qsyt { o
s qtsv s os qtww u和 s qusy s °ª#pt的对照品溶液 o
经微孔滤膜过滤器ks qwx Λ°l过滤 o在上述色谱条件
下 o进样 us Λo记录色谱图 o进样量k Ξl与峰面积
k Ψl的回归方程为 }Ψ uswyv Ξ n u{ss .z , ρ
s q||| { ~线性范围为 s qusy ∗ w qtus ±ª∀
2 q6 精密度 精密吸取同一对照品溶液 o重复进样
x次 o每次 us Λo计算对羟基苯甲酸乙酯的峰面积
积分值的平均值为 vy v{| o ≥⁄为 u qx h ∀
2 q7 重复性 同一批号样品取 x份 o分别按 2 q2 项
下操作测定 o结果对羟基苯甲酸乙酯的 ≥⁄为
v qt h ∀
2 q8 稳定性 样品制成的供试品溶液 o制成的当天
测 t次 o之后每隔 uw «测 t次 o共测 v次样品稳定 o
对羟基苯甲酸乙酯的峰面积积分值的平均值为
vx |zu o ≥⁄为 u qw h ∀
2 q9 样品测定 精密吸取经微孔滤膜过滤器ks qwx
Λ°l过滤后的样品溶液 us Λo在上述色谱条件下进
行分析 o以外标法计算样品中对羟基苯甲酸乙酯含
量 o结果见表 u ∀
表 u 样品中对羟基苯甲酸乙酯的含量测定结果k ν vl
样品来源
及批号
对羟基苯甲酸乙酯含量
rΛª#ªpt
≥⁄
r h
柬龙牌k|ysxtxl v q|t u qu
芒果牌k||sxsxl w qxy u qu
大观牌kussststzl x qtv u qw
免加热工艺提取血竭 { quz t qz
2 q10 加样回收率试验 精密称取已测含量的免加
热工艺提取的血竭 x °ªo分别加入浓度为 s qusy ª#
pt的对羟基苯甲酸乙酯对照品溶液 txs ouss和 uxs
Λo按 2 q3供试品制备项下制备 o测定样品含量 ∀对
羟基苯甲酸乙酯平均回收率为|z qu h o ≥⁄为
t qw h k ν yl o结果见表 v ∀
3 讨论
3 q1 龙血竭中的化学成分主要为极性小的黄酮类
化合物 ~对羟基苯甲酸乙酯为极性较小化合物之一 o
它与龙血竭中多种化合物的极性相近≈x o采用本实
验中 °≤条件测定未经前处理的龙血竭样品进行
#wuv#
第 u|卷第 w期
ussw年 w月
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Χηινα ϑουρναλ οφ Χηινεσε Ματερια Μεδιχα
∂²¯ qu| o¶¶∏¨ w
³µ¬¯oussw
时 o不但样品检测时间长 o而且对羟基苯甲酸乙酯与
其他化合物不易分离 ~对样品进行薄层层析分离的
预处理后 o可使对羟基苯甲酸乙酯与其他化合物完
全分离 o本方法减少样品测定时间 o实现了快速分
析 ∀
表 v 免加热工艺提取血竭中
对羟基苯甲酸乙酯的加样回收实验结果k ν yl
样品含量
r±ª
加样量
r±ª
测得量
r±ª
回收率
r h
ξ
r h
≥⁄
r h
wu qt{ vs q|s zu qsy |y qz
wv qss vs q|s zu qww |x qv
wt qvx wt qus {u qtv || qs |z qu t qwwu qt{ wt qus {u quy |z qv
ws qxu xt qxs |t qty |{ qv
wt qvx xt qxs |t qtv |y qz
3 q2 文献报道血竭对 ts种常见的细菌和皮肤癣菌
具有较好的抑制作用 o其最低抑菌浓度为 s qt ∗ xs ª
#pt o若按实验结果计算 o对羟基苯甲酸乙酯的含
量极低仅为 vrtss万 ∗ {rtss万 o如果使用对羟基苯
甲酸乙酯单体在该浓度下也难以发挥抗细菌 !真菌
作用 o因此推测血竭中抗菌作用为其他化合物共同
作用得结果 ∀
3 q3 实验结果表明 o免加热工艺提取的龙血竭中对
羟基苯甲酸乙酯的含量均高于传统工艺提取的 v个
品牌龙血竭中的含量 o比柬龙牌和芒果牌血竭高一
倍 o与紫外光谱的数据相吻合 o证实新型免加热提取
工艺提取的龙血竭中又一化学成分的含量明显高与
传统提取工艺 o使用新型免加热提取工艺 o使化学成
分的含量明显提高 o有利于药材的充分利用和植物
资源的保护 o在中药的研究与生产中推行免加热提
取技术 o将使药的提取收率提高 o同时降低能源的损
耗 o产品的成本降低 o提高企业的效益 o并将促进中
药现代化的研究 ∀
≈参考文献
≈t 胡迎庆 o宫 飙 o屠鹏飞 q龙血树属植物化学成分及生物活性研
究进展 q国外医学#植物药分册 ousss otxktl }x q
≈u 卢文杰 o王雪芬 o陈家源 o等 q剑叶龙血树氯仿部分化学成分的
研究 q药学学报 ot||{ ovvktsl }zxx q
≈v 胡迎庆 o韩慧文 o宋月英 o等 q不同工艺提取血竭中紫檀 的含
量测定 q中成药 oussu ouwk{l }yty q
≈w 胡迎庆 o张庆云 o胡孝国 o等 q不同工艺提取的龙血竭中龙血素
o
的含量的测定 q中成药 oussu ouwktul }|yu q
≈x 林启云 q广西血竭的药理作用及毒性试验 q广西中医药 ot|{y o|
kyl }vv q
≈y 胡迎庆 o张静泽 o刘岱琳 q龙血竭的真伪鉴别 o中草药 oussu ovv
kwl }vx{ q
Θυαντιτατιϖε δετερµινατιον οφ ετηψλ2π2ηψδροξψβενζοατε
ιν ρεσινσ εξτραχτεδ φροµ ∆ραχαενα χοχηινχηινενσισ ωιτη τωο τεχηνολογιεσ
≥ ≠∏¨2¼¬±ªo ±¬±ª2¼∏±o ≠¬±ª2 ¬´±ªo⁄∞ ≤«¤±ª2«∏
( Μεδιχαλ Χολλεγε οφ Χηινεσε Πεοπλε. σ Αρµεδ Πολιχε Φορχεσ, Τιανϕιν , vsstyu , Χηινα)
[ Αβστραχτ] Οβϕεχτιϖε : ±∏¤±·¬·¤·¬√¨§¨·¨µ°¬±¤·¬²± º¤¶°¤§¨ ²© ·¨«¼¯2³2«¼§µ²¬¼¥¨ ±½²¤·¨¬± ∆ραχαενα χοχηινχηινενσισ ¬¨·µ¤¦·¨§º¬·«·º²
·¨¦«±²¯²ª¬¨¶q Μετηοδ :׫¨ ¶¤°³¯¨º¤¶µ¨¶²¯√ §¨º¬·«° ·¨«¤±²¯ ¤±§¬¶²¯¤·¨§¥¼ ×≤ o³∏µª¨§º¬·«° ·¨«¤±²¯ qת¨ ¶¤°³¯¨¶²¯∏·¬²± º¤¶¦«µ²°¤·²
ªµ¤³«¨ §²± ¤ ≤t{ ¦²¯∏°± º¬·«¤¦¨·²±¬·µ¬¯¨ 2t h ¤¦¨·¬¦¤¦¬§kvtΒy|l ¤¶°²¥¬¯¨ ³«¤¶¨ o§¨·¨¦·¬±ª¤·uxz ±° ¤±§¦²±·¨±·º¤¶¦¤¯¦∏¯¤·¨§º¬·« ¬¨2
·¨µ±¤¯ ¶·¤±§¤µ§° ·¨«²§q Ρεσυλτ : ׫¨ ¶·¤±§¤µ§¦∏µ√ ¶¨²© ·¨«¼¯2³2«¼§µ²¬¼¥¨ ±½²¤·¨ º µ¨¨ ¬¯±¨ ¤µ¬±·«¨ µ¤±ª¨ ²©s qusy ∗ w qtu ±ªoρ s q||| { q
׫¨ ¤√ µ¨¤ª¨ µ¨¦²√ µ¨¼ º¤¶|z qu h ¤±§ ≥⁄ º¤¶t qw h q Χονχλυσιον :׫¨ ¦²±·¨±·²© ·¨«¼¯2³2«¼§µ²¬¼¥¨ ±½²¤·¨ ¬± ∆ . χοχηινχηινενσισ ¬¨·µ¤¦·¨§
º¬·««¨ ¤·¬±ª2·µ¨¨·¨¦«±²±ª¼¬¶«¬ª«¨µ·«¤±·«¤·º¬·«·µ¤§¬·¬²±§·¨¦«±²¯²ª¼q
[ Κεψ ωορδσ] ∆ραχαενα χοχηινχηινενσισ~«¨ ¤·¬±ª2·µ¨¨·¨¦«±²±ª¼~·µ¤§¬·¬²±¤¯ ·¨¦«±²¯²ª¼~ °≤ ~ ·¨«¼¯2³2«¼§µ²¬¼¥¨ ±½²¤·¨
≈责任编辑 袁桂京
#xuv#
第 u|卷第 w期
ussw年 w月
中 国 中 药 杂 志
Χηινα ϑουρναλ οφ Χηινεσε Ματερια Μεδιχα
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