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≈责任编辑 李 禾  
• °2‹°≤测定牡丹皮饮片中 v种活性成分的含量
王玉文 o虞 科 o程翼宇 3
k浙江大学 药学院 中药科学与工程学系 o浙江 杭州 vtssuzl
≈摘要   目的 }建立同时测定中药饮片牡丹皮中没食子酸 !芍药苷和丹皮酚 v种有效成分含量的反相高效液
相色谱分析方法 ∀方法 }采用 ≠  ≤ 2≤t{柱 o以甲醇 2s1sxh磷酸为流动相 o梯度洗脱 o针对不同类型组分 o实行分段变
波长检测 o以外标法定量 ∀结果 }没食子酸 !芍药苷和丹皮酚的线性范围分别为 s1stv s ∗ s1uyzos1s{{ s ∗ t1zyo
s1tyw ∗ v1u{ Λª~平均加样回收率分别为 tsw1vh otst1zh o||1xh ∀结论 }本方法准确可靠 o重复性好 o回收率高 o
适用于丹皮及其制剂的质量分析 ∀
≈关键词   反相高效液相色谱法 ~分段变波长紫外检测 ~牡丹皮 ~含量测定
≈中图分类号   • u{wqt ≈文献标识码   „ ≈文章编号   tsst2xvsukussylus2ty||2sv
≈收稿日期   ussx2s{2tx
≈基金项目   国家自然科学基金重大研究计划重点项目 k|s2
us|ssxl
≈通讯作者   3 程翼宇 oר¯}ksxztl{z|xuxs|o∞2°¤¬¯}¦«¨ ±ª¼¼
ƒ ½­∏q §¨∏q¦±
牡丹皮系毛茛科芍药属植物牡丹 Παεονια συφ2
φρυτιχαοσα „±§µq的根皮 o为我国传统中药材 o其主要
活性成分为丹皮酚 !芍药苷 !没食子酸及其衍生
物 ≈t  ∀近年来已有数例运用气相色谱 ≈u  !液相色
谱 ≈v2y 或毛细管电泳 ≈z 等方法测定牡丹皮及其复方
制剂中丹皮酚或芍药苷含量的报道 o但迄今为止 o同
时测定牡丹皮中 u种以上活性成分的仪器分析方法
尚未见报道 ∀
由于中药化学组成的复杂性 o各成分最大紫外吸
收波长往往存在差异 o这导致了在同一波长下较难对
多种有效成分同时进行有效检测 ∀本研究采用各成
分最大紫外吸收波长分段检测 o实现了对牡丹皮药材
中丹皮酚 !芍药苷和没食子酸含量的高灵敏测定 ∀实
验结果表明 o本法准确可靠 !重复性好 o回收率高 o可
用于牡丹皮或其复方制剂的质量分析 ∀
1 仪器和试药
„ª¬¯¨ ±·ttss型高效液相色谱仪 o配四元梯度泵 !
在线脱气机 !自动进样器 !柱温箱 !∂ • ⁄检测器 !≤«¨ °2
≥·¤·¬²±色谱工作站 ∀对照品芍药苷和丹皮酚 k中国药
品生物制品检定所 l~没食子酸为分析纯 k上海化学试
剂公司 l∀甲醇为色谱纯 k µ¨¦®公司 l~娃哈哈纯净水
k市售 o大桶装 l~其余试剂均为分析纯 ∀
牡丹皮药材饮片分别购于杭州市内 w个中药店 o
经本系生药学贺庆讲师鉴定均为毛茛科芍药属植物牡
丹 Π. συφφρυτιχαοσα的根皮 ∀
2 方法与结果
2q1 色谱条件 ≠  ≤ 2≤t{柱 kw1y °° ≅ uxs °°ox
Λ°lo柱温 vs ε ~流动相 „}水 k含 s1sxh磷酸 lo…}
甲醇 ~线性洗脱梯度 }s ∗ ts °¬±otsh … ∗ t{h …~
ts ∗ vs °¬±ot{h … ∗ vxh …~vs ∗ ws °¬±ovxh
… ∗ xsh …~ws ∗ xs °¬±oxsh … ∗ {xh …~xs ∗ xx
°¬±o{xh … ∗ tssh …∀检测波长 }s ∗ us °¬±ouzs
±°~us ∗ vx °¬±ouvv ±°~vx ∗ xx °¬±ouzs ±°∀流速
s1{ °# °¬±pt ~进样量 ts ˏ∀使用前 o流动相及
供试品均经 s1wx Λ°微孔滤膜过滤 ∀图 t为此色谱
条件下对照品溶液和牡丹皮提取液 ‹°≤图 ∀
#||yt#
第 vt卷第 us期
ussy年 ts月
中 国 中 药 杂 志
Χηινα ϑουρναλοφ Χηινεσε Ματερια Μεδιχα
∂ ²¯1vtoŒ¶¶∏¨ us
’¦·²¥¨ µoussy
图 t 对照品和供试品的 ‹ °≤图
„q对照品 ~ …q供试品 ~ tq没食子酸 ~ uq芍药苷 ~ vq丹皮酚
2q2 溶液配制 对照品溶液制备 }精密称取没食子
酸 !芍药苷和丹皮酚对照品 o溶于甲醇 o配制成含量
分别为 s1{wvot1sxot1yw °ª# °pt的对照品储备
液 ∀供试品溶液制备 }取适量丹皮饮片 o粉碎 o过 ws

目筛 ∀取粉末 u ªo精密称定 o加 {倍量 zsh乙醇溶
液浸泡 t «后超声提取 vs °¬±o将滤液定容至 ux
°o离心分离 kts sss µ# °¬±pt lts °¬±o上层液用
水稀释 ux倍后进行分析 ∀
2q3 线性关系 精密配制没食子酸 !芍药苷和丹皮
酚对照品混合液 o其含量分别为 s1stv sos1s{{ so
s1tyw °ª# °pt o取适量对照品溶液经 s1wx Λ°微
孔滤膜过滤 o分别进样 xotsotxous ˏ∀另将上述
对照品混合液稀释 ts倍 o分别进样 tsotxous ˏ∀
以色谱峰面积值 Ψ为纵坐标 o进样量 ΞkΛªl为横坐
标 o绘制标准曲线 o结果见表 t∀检测限按信噪比 Σ/
Ν € v计算所得 ∀
表 t 没食子酸 !芍药苷和丹皮酚的标准曲线
对照品 回归方程 ρ 线性范围 rΛª 检测限 r±ª
没食子酸 Ψ € v {ss1tΞ p w1svx s1||| | s1stv s ∗ s1uyz s1s|
芍药苷 Ψ € t xsw1{Ξ p vy1|tx s1||| z s1s{{ s ∗ t1zy t1sw
丹皮酚 Ψ € v zut1{Ξ n vt1vyv s1||| | s1tyw ∗ v1u{ y1su
2q4 精密度试验 取供试品溶液 o在上述色谱条件
下进样 ts ˏo重复进样 y次 ∀以没食子酸 !芍药苷
和丹皮酚峰面积计算 • ≥⁄o其值分别为 s1uuh o
s1vwh和 s1u|h o表明在此条件下 o进样精密度良
好 ∀同一样品连续分析 x §ov种活性成分峰面积
• ≥⁄分别为 u1xh ot1xh和 x1sh o本法日间精密度
良好 o但是丹皮酚的含量呈微降趋势 o可能与其挥发
性有关 ∀
2q5 供试品稳定性试验 常温下 o取供试品溶液按
上述色谱条件分别在 soyotuot{ouw测定没食子酸 !
芍药苷和丹皮酚峰面积 o其 • ≥⁄分别为 s1x{h o
s1xyh和 s1zsh o说明常温下 uw «内 o供试品溶液
保持稳定 ∀
2q6 重复性试验 按样品处理方法重复制样 x份 o
分别按上述色谱条件测定 o没食子酸 !芍药苷和丹皮
酚峰面积 • ≥⁄分别为 t1yh ot1xh 和 u1th o结果
较满意 ∀
2q7 加样回收率试验 精密称取已知含量的牡丹
皮粉末 o按高 !中 !低 v个含量分别准确加入已知含
量的没食子酸 !芍药苷和丹皮酚混合标样 o按 2q2项
进行提取测定 o重复 v次取平均值 ∀计算得没食子
酸平均回收率为 tsw1vh o• ≥⁄ v1|h kν € |lo芍药
苷平均回收率为 tst1zh o• ≥⁄ u1|h kν € |lo丹皮
酚平均回收率为 ||1xh o• ≥⁄ w1yh kν €|l∀
2q8 样品测定 将购于不同药店的丹皮药材按上
述方法进行测定 o每个样品平行制备 x份 o每份重复
u次取平均 o测定结果见表 u∀由表 u可见 o不同药
店丹皮药材中丹皮酚的含量基本一致 o而没食子酸
和芍药苷的含量略有差异 ∀
表 u 不同药店丹皮样品含量 kcξ ? σ, ν € xl °ª# ªpt
来源 没食子酸 芍药苷 丹皮酚
„ u1xw ? s1sw tu1x ? s1t| uv1v ? s1w|
… t1v| ? s1st x1zw ? s1sv uv1x ? s1s{
≤ t1xy ? s1sx y1{u ? s1uw uu1v ? s1xw
⁄ t1wv ? s1su z1ss ? s1tw uu1s ? s1s|
3 讨论
3q1 流动相选择 若以甲醇 2水为流动相 o谱峰保
留时间较长 o谱图中未能检测到没食子酸 o拖尾现象
相当严重 o且未达基线分离 ∀以醋酸调节水相 ³‹
后发现没食子酸在 | °¬±左右出峰 o然而醋酸在低
波长吸收干扰较大 o不利于定量分析 o故最终选用甲
醇 2s1sxh磷酸作为流动相 ∀
3q2 检测波长选择 本研究运用分段变波长检测
法对此 v种化学成分进行测定 o根据各成分保留时
间差异 o在 s ∗ us °¬±设定检测波长 uzs ±°ous ∗ vx
°¬±设定检测波长 uvv ±°ovx ∗ xx °¬±设定检测波
长 uzs ±°o分别检测没食子酸 !芍药苷和丹皮酚 o使
得各成分均在其最大吸收波长下进行测定 o从而提
高了分析精度 o保证了方法稳定性 ∀
3q3 提取条件的选择 丹皮酚是易挥发成分 o根据
文献 ≈{ 报道 o本研究选择超声提取 o比较甲醇和乙
醇提取效率 o两者相当 o故选择低毒价廉的乙醇 ∀经
#sszt#
第 vt卷第 us期
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中 国 中 药 杂 志
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研究比较提取时间 vs °¬±和 ys °¬±o发现与相关文
献 ≈|ots 报道一致 ovs °¬±即可提取完全 ∀
本研究所建立的没食子酸 !芍药苷和丹皮酚含
量同时测定方法准确可靠 o重复性好 o回收率高 o适
用于丹皮及其复方制剂的质量分析 ∀运用本方法测
定了 w种不同来源的丹皮 o结果表明 o不同来源的丹
皮酚含量较为稳定 o而没食子酸和芍药苷含量则存
在一定差异 ∀
≈参考文献  
≈t  吴少华 o马云保 o罗晓东 o等 q丹皮的化学成分研究 ≈ q中草
药 oussuovvk{l}yz|q
≈u  缪海均 o柳正良 o李云华 q超临界流体萃取法 2毛细管气相色谱
法分析牡丹皮及制剂中丹皮酚的含量 ≈ q药学学报 ot||zo
vuktul}|u{q
≈v  郭宝林 o巴桑德吉 o肖培根 o等 q中药牡丹皮原植物及药材的
质量研究 ≈ q中国中药杂志 oussuouzk|l}yxwq
≈w  ‹¨÷ ‹ o ÷¬±ª⁄  o ⁄¬±ª≠ o ·¨¤¯q ⁄ ·¨¨µ°¬±¤·¬²± ²©³¤¨ ²±¬©¯²µ¬±
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≈y  ≥«¨ ±ª≠ ÷ o ¬o «¤±ªo ·¨¤¯q ≥¬°∏¯·¤± ²¨∏¶§¨ ·¨µ°¬±¤·¬²±
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¬¶·µ¤·¬²± ²©≥¬2• ∏ §¨ ¦²¦·¬²±≈ q …¬²° §¨ ≤«µ²°¤·²ªµo usswot{
ktsl}z{xq
≈z  杨更亮 o宋秀荣 o张红医 o等 q胶束毛细管电泳法测定牡丹皮
及芍药中牡丹酚和芍药苷 ≈ q分析化学 ot|||ouzktl}tq
≈{  赵新峰 o孙毓庆 q胶束电动毛细管色谱法测定牡丹皮及六味
地黄丸中丹皮酚的含量 ≈  q沈阳药科大学学报 oussuot|
ktl}vxq
≈|  丁安伟 o郭 戎 o徐菊如 o等 q丹皮炭中丹皮酚含量的高效液
相色谱测定 ≈ q中国中药杂志 ot||youtktl}uvq
≈ts  葛 萍 o雷岁合 o曹新宪 q‹ °≤法测定益智壮骨冲剂中芍药
苷的含量 ≈ q中成药 ot||yot{kul}tvq
Σιµ υλτανεουσ δετερµ ινατιον οφ τηρεε αχτιϖε χονστιτυεντσ ιν Χορτεξ
Μουταν βψ Ρ Π2ΗΠΛΧ
• „‘Š ≠∏2º ±¨o ≠ ˜ Ž¨ o ≤‹∞‘Š ≠¬2¼∏
(∆επαρτµ εντ οφ Χηινεσε Μεδιχινε Σχιενχε ανδ Ενγινεερινγ , Χολλεγε οφ Πηαρµ αχευτιχαλΣχιενχεσ,
Ζηεϕιανγ Υνιϖερσιτψ, Ηανγζηου vtssuz, Χηινα)
[ Αβστραχτ] Οβϕεχτιϖε: ײ ¶¨·¤¥¯¬¶«¤• °2‹ °≤ ° ·¨«²§©²µ·«¨ ¶¬°∏¯·¤± ²¨∏¶§¨ ·¨µ°¬±¤·¬²± ²©ª¤¯ ¬¯¦¤¦¬§o ³¤¨ ²±¬©¯²µ¬± ¤±§³¤¨ 2
²±²¯ ¬± ≤²µ·¨¬  ²∏·¤±q Μετηοδ : ׫¨ ¤±¤¯¼¶¬¶º¤¶¦¤µµ¬¨§²∏·²± ¤¦²¯∏°± ²©≠  ≤ 2≤t{ kw1y °° ≅ uxs °°o x Λ°lo ¤±§ªµ¤§¬¨±·¨ ∏¯2
·¬²± º¤¶∏¶¨§©²µ·«¨ ¥¤¶¨ ¬¯±¨¶¨³¤µ¤·¬²± ²©·«¨ ¶¨ ·«µ¨¨¦²±¶·¬·∏¨ ±·¶º¬·«·«¨ §¬©©¨µ¨±·§¨ ·¨¦·¬²± º¤√¨¯ ±¨ª·«q Ρ εσυλτ: ׫¨ ¬¯± ¤¨µµ¤±ª¨ ¶
©²µª¤¯ ¬¯¦¤¦¬§o ³¤¨ ²±¬©¯²µ¬± ¤±§³¤¨ ²±²¯ º µ¨¨ s1stv s2s1uyzo s1s{{ s2t1zy ¤±§s1tyw2v1u{ Λªo µ¨¶³¨ ¦·¬√¨¯¼q ׫¨ ¬µ¤√ µ¨¤ª¨ µ¨¦²√ µ¨2
¬¨¶º µ¨¨ tsw1vh o tst1zh ¤±§||1xh o µ¨¶³¨ ¦·¬√¨¯¼q Χονχλυσιον: ׫¨ ° ·¨«²§º¤¶¶∏¦¦¨¶¶©∏¯ ¼¯ ¤³³¯¬¨§·²·«¨ §¨ ·¨µ°¬±¤·¬²± ²©ª¤¯ ¬¯¦
¤¦¬§o ³¤¨ ²±¬©¯²µ¬± ¤±§³¤¨ ²±²¯ ¬± ≤²µ·¨¬  ²∏·¤± ©µ²° ·«¨ §¬©©¨µ¨±·§µ∏ª¶·²µ¨¶q Œ·º¤¶¶«²º± ¬± ·«¬¶¶·∏§¼ ·«¤··«¨ ³µ²³²¶¨§ ° ·¨«²§
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[ Κεψ ωορδσ] • °2‹ °≤~ °∏¯·¬³¯¨§¨ ·¨¦·¬²± º¤√¨¯ ±¨ª·«¶~ ≤²µ·¨¬  ²∏·¤±~ ∏´¤±·¬·¤·¬√¨¤±¤¯¼¶¬¶
≈责任编辑 李 禾  
本刊投稿须知
本刊目前一律不收网上投稿 o请作者务必以邮寄方式投稿 ∀
来稿应为打印稿 o一式两份 ~投稿时不必附软盘 ~实验性文章应附单位介绍信 ∀
投稿同时请从邮局汇寄处理费 kxs元 r篇 lo切勿在稿件中夹带现金 ~汇款时请注明文章第一作者姓名及稿件题目 ∀本刊
将于收到稿件后的 t个月之内给予回执及发票 ∀
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