全 文 ：312 x种不同原植物的花粉和 t{批商品药材
中均含有这两种化合物 o而且含量较高 o药理研
究证明两种化合物均为蒲黄的有效成分 o我们
将两种化合物的含量作蒲黄质量标准中的含量
测定指标 ∀部分商品药材中含量偏低 o可能是
混杂有其它杂质k如花丝l所致 ∀
4 参考文献
t 高光耀 o廖矛川 o冯毓秀 q中药蒲黄黄酮成分高效液相色谱
测定及质量评价 q药学学报 ot||{ ovvkwl }vss
u 刘斌 o陆蕴如 q高效液相色谱法测定蒲黄中 u种黄酮苷的
含量 q药物分析杂志 ot||{ ot{kul }{s
v 杨永华 o刘桂焕 o徐华雄 o等 q窄叶香蒲与长苞香蒲化学成
分的分析研究 q中药通报 ot|{y ottktul }v|
w 贾世山 o杨树民 q中药蒲黄黄酮类成分的含量测定 q中草
药 ot|{{ ot|ktl }wz
t||{2tu2sz收稿
薄层扫描法测定天然牛黄中胆酸含量的研究
常增荣 邸峰 周富荣k北京市药品检验所 北京 tsssvxl
摘要 目的 }测定牛黄中胆酸的含量 ∀方法 }硅胶 薄层板 o异辛烷2醋酸丁酯2冰醋酸2甲酸k{ΒwΒu
Βtl展开 oΚ≥ v{s±° oΚ yxs±° o反射法锯齿形扫描 ∀结果 }回收率为 |y qxw h oΡΣ∆为 t qy{ h ∀结论 }
该方法可作为牛黄中胆酸的质量控制方法 ∀
关键词 薄层扫描 牛黄 水解 胆酸
牛黄为牛科动物牛干燥的胆结石 ∀ 5中国
药典6t||x年版牛黄中胆酸采用比色法测定含
量 o由于其它成分的干扰 o样品和对照品显色后
最大吸收不同 o使测定结果和真实值有一定的
差距 o故改用薄层扫描法测定胆酸的含量 ∀据
文献报道 o牛黄中胆汁酸类分为游离胆汁酸和
结合胆汁酸 o游离胆汁酸中主要为胆酸和去氧
胆酸及少量的鹅去氧胆酸 o结合胆汁酸中主要
为牛磺胆酸 !甘氨胆酸及少量的牛磺去氧胆酸 !
牛磺鹅去氧胆酸 !甘氨去氧胆酸 !甘氨鹅去氧胆
酸 ∀由于牛黄中游离和结合型胆酸的比例在自
然存放中有变化 o故采用水解后薄层扫描法测
定游离和结合胆汁酸中主成分胆酸的总和 ∀
1 仪器 !试剂与样品
牛黄由北京同仁堂集团公司提供 o经本所
周富荣主任药师鉴定均为牛科动物牛 Βοσ
ταυρσδοµεστιχυσ °¨¯¬±干燥的胆结石 ∀
岛津 ≤≥2|sss型薄层扫描仪 o定量毛细管
点样器k⁄µ∏°²µ²¯ ≤²l o硅胶 薄层板k烟台化
工研究所l o对照品由中国药品生物制品检定所
提供k批号为 sz{2{|tsl o试剂均为分析纯 ∀
2 实验方法
2 q1 薄层条件及扫描条件
硅胶 薄层板 o展开系统曾试用 ≠ 异辛烷
醋酸丁酯2冰醋酸kwΒuΒtl o异辛烷2醋酸丁酯2
冰醋酸2甲酸k{ΒwΒuΒtl o≈异辛烷2醋酸乙酯2冰
醋酸kxΒxΒtl o…异辛烷2醋酸丁酯2冰醋酸kwΒvΒ
ul o结果展开系统 分离效果最好 ∀展距 tw ∗
tz¦°时分离达到完全 ∀经光谱扫描测定 oΚ≥
v{s±° oΚ yxs±° o反射法锯齿形扫描 o≥÷
v ∀薄层层析图谱见图 t ∀
图 t 对照品及供试品薄层层析图谱
t q供试品 u q胆酸 v q去氧胆酸 w q鹅去氧胆酸
2 q2 对照品及供试品液的制备
胆酸对照品加甲醇制成 s qw{°ª# °¯ p t的溶
液为对照品溶液 ∀
#w{y# 中国中药杂志 t|||年第 uw卷第 tt期
本品粉末约 s qtªo精密称定 o置具塞锥形
瓶中 o加 us h氢氧化钠溶液 ts °¯ o水浴中加热
回流 u«o冷却 o加稀盐酸 t| °¯ 调至酸性 o醋酸
乙酯提取 w次kux oux ous ous °¯ l o合并提取液 o
蒸干 o残渣加甲醇溶解至 ts °¯ 量瓶中 o甲醇稀
释至刻度 o摇匀 o为供试品液 ∀
2 q2 q3 水解条件及提取方法的确定
采用 x h ots h otx h ous h 氢氧化钠溶液
于水浴中分别回流 t ou«o测定胆酸的峰面积 o
结果见表 t o故选用 us h氢氧化钠溶液水解 ∀
表 t 碱液浓度的确定
碱浓度
h
水解时间
« 峰面积
碱浓度
h
水解时间
« 峰面积
x t ysyvz tx t {vtxu
u {tvwz u {ysst
ts t zstuu us t {xvyt
u {ssxw u {|xtv
本品加 us h氢氧化钠溶液分别水解 s ot o
u ov ow ox«o测定胆酸的峰面积 ∀结果 o峰面积分
别为 zuxtx o|z{vu ots{{xs otsvw{u o|{u{z o
{vtxv o故选择 us h氢氧化钠水解 u«∀
除采用水浴中水解外 o曾采用 tus ε o
tts ε 水解 o结果胆酸斑点均极浅 ∀另经试验 o
样品水解后调至酸性 o用醋酸乙酯萃取 w次即
可提取完全 ∀
2 q3 线性关系的考察
精密吸取胆酸对照品溶液 ks qwsw{°ª#
°¯ p tlt ou ov ow oxΛ¯ o分别点于同一硅胶 薄层
板上 o展开 o扫描 o以胆酸的微克数为横坐标 o峰
面积为纵坐标 o绘制标准曲线 o其回归方程为 Ψ
tuv|w .x n uzxyu .x Ξ , ρ s q|||t ∀结果表
明 o胆酸在 s qw ∗ u qsΛª范围内 o线性关系良好 ∀
2 q4 稳定性实验
取供试品溶液 o展开显色后 o每隔 vs°¬±扫
描一次 o结果峰面积在 v«内基本稳定 oΡΣ∆
s qy{ h ∀
2 q5 精密度实验
取同一供试品溶液各 uΛ¯ o在同一硅胶 薄
层板上分别点 x个点 o测定 o其峰面积 ΡΣ∆
u qsx h ∀
2 q6 样品测定
精密吸取供试品溶液 uΛ¯ o对照品溶液 ¯o
vΛ¯ o分别交叉点于同一硅胶 薄层板上 o测定
胆酸的含量 o并与5药典6比色法测定结果进行
比较 o结果见表 u ∀
表 u 样品测定结果 h
样品 比色法 扫描法 样品 比色法 扫描法
t { q{ w qz{ z z qw w qvu
u z qw w qs{ { z qu w qxs
v z qu v qsy | z qv w qzz
w z qy w quw ts z qu w qux
x y q{ v qvz tt { q{ x qxu
y | qs x qwx tu | q{ x qyw
2 q7 重现性实验
取样品 x份 o测定 o结果 ΡΣ∆为 v qw h ∀
2 q8 回收率测定
取已知含量的样品 s qsxªo分别精密加入
胆酸对照品ku qy{°ª# °¯ p tlt °¯ o按样品测定条
件测定 o结果见表 v ∀
表 v 回收率测定结果
样品量
°ª
加入量
°ª
测得量
°ª
回收率
h
ξ
h
ΡΣ∆
h
u quzs u qy{s w q{u{ |x qwx
u qv{u u qy{s w q|{x |z qtv
u quyx u qy{s w q{s| |w q|v |y qxw t qy{
u qsz| u qy{s w qyxy |y qty
u qvt{ u qy{s w q|zu || qsv
3 讨论
3 q1 由于牛黄中结合型胆酸和游离胆酸在自
然存放条件下比例发生变化 o故采用水解后测
定游离和结合型胆酸之和比单独测定一种状态
的胆酸更为客观和科学 ∀
3 q2 5中国药典6t||x年版采用比色法测定胆
酸含量 o其测定的是以胆酸计的胆汁酸的总量 ∀
采用本法水解后主要为胆酸和去氧胆酸以及少
量的鹅去氧胆酸 o因去氧胆酸和鹅去氧胆酸分
离的重现性差 o故仅测定胆酸的含量 ∀其数据
低于比色法测定的总胆酸含量 ∀
4 参考文献
t 张启明 o钱丽华 o严克东 o等 q培植牛黄与天然牛黄胆汁酸
的含量测定 q中成药 ot||u otwktul }vx
u 张启明 o李社花 o程静 o等 q牛黄中游离胆汁酸的薄层色谱
定量 q中国中药杂志 ot||s otxkyl }ws
t||{2tu2sz收稿
#x{y# 中国中药杂志 t|||年第 uw卷第 tt期