全 文 ：中草药ChineseTraditionMandHerbalDrugs第。6卷第T0期2005年Io月·1457-
成{ATPS以酸性糖为主．含质量分数为33．02％半
乳糖醛酸，中性糖部分主要由鼠李糖、阿拉伯糖和半
乳糖组成。两种茶多糖相对分子质量均小于3×
104，溶解性较好，黏度不大。动物实验表明，NTPS、
一a．TPS都能抑制四氧嘧赃糖尿病小鼠血糖的升高，
具有降血糖功能，但两者表现出的剂量效应，给药后
的质量变化均不相同，这可能与两者的单糖组成．已
糖醛酸质量分数及其形成的空间结构、电荷效应不
同有关，关于其降血糖的机制、多糖的构效靶点还得
进一步研究。NTPS、ATPS的进一步分离和纯化、
结构鉴定，多糖的构效荧系的探讨正在进行中。
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当归补血汤中组分的变化及归属分析
王亚丽“2，粱逸曾”，李博岩1，胡 芸1，胡黔楠。
(1．中南大学中药现代化研究中心，湖南长沙410083；2．甘肃中医学院科研中心，甘肃兰州730000)
摘要：目的利用HPI。C—DAD提供的色谱和光谱信息，对相同实验条件下提取的当归补血汤及其单味药当归、
黄蓖的色谱指纹图谱流出组分进行对比分析，实现了当归补血汤与其单昧药中各组分的归属分析。方法结合光
谱相关色谱方法，比较了复方与组成该复方的单味药中各组分的异同．实现了对组分的归属分析。结果 当归补血
汤色谱指纹图谱中的18个色谱峰，10个组分来源于当归+11个组分来源{二黄芪，其中5个组分为当归和黄甍的共
有组分·2个组分为新物质。结论率方法方便、快捷，可对中药复方及组成该复方的单昧药成分的色谱指纹图谱进
行快速比较分析。并为复方药理药效的比较研究奠定了基础。
关键词：中药色谱指纹图谱；当归补血汤；光谱相关色谱；归属分析
中冒分类号；R284．1 文献标识码：A 文章编号：02532870(2005)10—1457一04
Relativeadscriptionofcomponentsbetweencomplexandsingleh rb
inDangguiB xueD coction
WANGYali’一，LIANGYi—zeng2，LIBoyan7．HUYun7，HUQian—NaN。
(1·ResearchCenterofModernizationofCh neseHerbalMedicines·CentralSou hUniversity，Changsha410083，China
基收稿日期盒项目：：2国00家5自01然1科2学基金重点赘助项日(20235020，2。175036)-甘肃省攻关课题fGs022A43138)
一
堂翥熊乎勰誉”T。eh成(07坩31剃)882呕284学院1F‘a冀黜甏蒜黔麓黑虢要罂l：兰黟6析化3-ne学和t中药现代化的教学及科研工作
万方数据
·1458· 中草药ChineseTraditionMandHerbalDrugs第36卷第10期2005年10月
2-ResearchCenterofScienceandTechnology，GansuCollegeofTraditionalChineseMedicine．Lanzhou730000，China)
Keywords：chromatographicfin erprintsofChinesemateriamedicaI DangguiB xueD coction
(DBD){spectralcorrelationchromatographyI relativeadscriptionanalysis
中药材的组分十分复杂，虽然对其中的部分化
学成分已有一定的研究，但大部分的化学成分还未
知，要对所有组分进行一一定性分析几乎不可能。因
此，在组分不完全清楚的条件下，怎样有效地对复方
及其单味药的化学成分进行比较研究，找到两者在
化学成分上的异同对中药复方的研究具有十分重要
的意义。
中药色谱指纹图谱技术的提出和应用”‘23为解
决这一问题提供了一个很好的方法。HPI。C或GC
具有分离复杂样品的功能，因此成为建立中药化学
特征指纹图谱的首选工具。用高效液相色谱一二极管
阵列(HPI．C—DAD)联用仪器，将色谱的分离能力和
光谱的定性鉴定能力相结合，对相应化学组分进行
双重定性，有可能解决此问题[3“]。本实验充分利用
联用色谱提供的色谱、光谱信息，并结合光谱相关色
谱方法“。一，对相同实验条件下提取的当归补血汤
及其单味药的色谱图谱流出组分进行对比分析，为
研究当归补血汤及其单昧药中各组分的归属和变化
提供理论依据。
1理论部分
相同的化学物质具有相同的光谱或波谱。在相
同的实验条件下，尽管所得的复方和单味药的色谱
曲线中，相同组分的保留时间可能存在漂移，但它们
的光谱(或质谱)应基本相同。基于复方和单味药两
个不同的色谱曲线(指纹图谱)，通过对所有不同流
出时间点的光谱进行相关计算，可得一个类似色谱
的光谱相关系数曲线，本实验称之为光谱相关色谱。
即可方便判断出复方和单眯药的相同组分和不同
组分。
对任意两个物质纯光谱n和s，，其相关系数可
由下式计算。
， (^，i)。·(si—i．) ．．
““川一而ii河_-丽ii可
⋯
式中 1≤r(一．J)≤1，r越大，表示组分i的光谱$与组分J
的光谱雌越相似，当r一1且保留时间相近时，复方和单眯药
的色谱曲线中的两个组分应为同一化学物质。实际上，由于
噪声和测量误差等影响因隶的存在，r最大值不可能等于1．
只能接近于1。其中 ·0表示Frobenius范数，上角标T为
向量的转置，，表示光谱矢量的均值。
设某一样本化学色谱指纹图谱的某一组分纯物
质的光谱为5，为得到相对另一色谱指纹图谱中该
物质的光谱相关色谱，可通过对另一个样本的联用
色谱指纹图谱所包含的所有光谱，即其每一个保留
时间点所对应的光谱．记为X，(J=1，2⋯．，m)，m
为最大色谱保留时间点，来计算它们与该目标物质
光谱的相似系数。这样，所得到的将是相对于该目标
纯物质的光谱相关色谱。在实际的运算中，将式(1)
改写为：
， (j一；)’·(j，一孑。) ．、
““叫2可i万矿-1itji汀
”’
将相关系数r(s，z，)对色谱保留时间作图即得
到该目标物质与这一样本色谱指纹图谱的光谱相关
色谱曲线。如果目标物质存在于该样本中，则相关色
谱曲线在一定的区域内的光谱相关系数很接近1，
它所对应的色谱流出组分与目标物质相关，结合色
谱保留时间信息，从而实现在相同的实验条件下所
得的色谱指纹图谱中单味药与复方目标物质的相对
归属分析。
2实验部分
2．1 仪器与试剂：惠普Ii00系列高敢液相色谱仪
(美国Agilent公司)；G1315A型地极管阵列检测
器；恒温水浴锅(W201B．上海申生科技有限公司)，
旋转蒸发仪(AAAR～201型，上海申生科技有限公
司)．循环水式真空泵[SHZ—D(111)，巩义市英峪予华
仪器厂]。当归RadixAngelicaSinensis(RAS)由甘
肃氓县当归GAP实验园区提供，黄芪RadixAstra—
gali(RA)购自长沙九芝堂药店，经湖南省中医药研
究院中药研究所鉴定。甲醇为色谱纯(江苏汉邦科技
有限公司)，乙醇为分析纯(湖南宁乡花明楼试剂
厂)，水为二次去离子水，其余试剂为分析纯。
2．2供试品溶液的制备：将生药当归、黄芪、当归补
血汤(当归黄芪1：5)用天平各称取6．0g(过40
目筛)，分别用95％乙醇150mI。浸泡过夜。水浴回
流提取4h，滤过．药渣中再加入95％乙醇50mI。进
行热回流提取40min，两次滤液合并，真空抽滤2
次，滤液在真空旋转蒸发仪中(水浴40C)浓缩至
于，移人50ml。量瓶中，用甲醇定容后，置于4C冰
箱中保存。
2．3色谱检测条件：HypersilODS柱(250mm×
4．6mm，4．5pm，Agilent公司)，室温为25C．体积
流量：1．0ml，／rain；扫描波长范围：190～400nnl，扫
万方数据
中草药ChineseTraditionalandHerbalDrugs第36卷第lo期2005年lo月·1459·
描时间间隔：0．402S／次。色谱洗脱条件为：流动相
组成为A(HzO)，B(CH。OH)；洗脱荆B在0～10
min为l％～25跖，在10～20min为25％～50％，
在20～30min为50％～70％，在30～50min为
70％～90％。当归补血汤和黄芪供试品溶液的进样
量为20L，当归为lOpI。。
3结果与讨论
当归补血汤是当归和黄芪按1：5的比例组成
的复方。复方中的成分是单昧药的简单加和．还是有
新的组分生成，不能仅从色谱保留时间来判断，因为
不同的中药．组成的物质群不同，即使色谱条件完全
相同，其中相同的组分其色谱保留时间也会不同，可
能有以下几种原因：第一，中药成分复杂，即使完全
相同的组分，在不同的物质群中，由于组分之间的相
互作用、组分与固定相之间的相互作用以及组分的
浓度不同．导致色谱保留时间漂移；第二，由于仪器
的系统误差及一些不可控实验因素的影响，导致色
谱漂移。
现根据HPI。c—DAD所得到的当归补血汤及其
组成单味药当归和黄芪的色谱指纹图谱的色谱和光
谱数据，并结合光谱相关色谱方法对复方及单味药
的组分归属进行分析，图1为复方及单味药在296
Flm处的色谱指纹图谱，现以图1中保留时间为
30～31rain的色谱峰为例对复方及其组成单味药
的组分进行归属分析。
DBD
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DBD一当归朴血汤RAS当归RA一黄芪
DBDDangguiB xueD coctionRAS—RadixAngelicaSlnensi．s
RA—RudiaAstragMi
圈l当归补血汤复方、当归、黄芪在296nm
波长下的色谱指纹圈谱
Fig．IFingerprintofDBD，RAS。andRA
atwavelength296nm
在图1中，30～31min保留时间段当归补血汤
的色谱峰10与当归97和黄芪8”的色谱峰的保留时
间非常接近．为确定补血汤的色谱峰lo对应的组分
是来源于当归9’还是黄芪8”，首先，经色谱峰纯度
检验”M，确认补血汤的色谱峰10为纯组分，其光谱
记为轧，然后根据公式(2)分别计算当归和黄芪中
的每一色谱保留时间对应的光谱与蛳的相关系
数r。通过相关系数r对保留时间t作图，得到光谱
相关色谱曲线(图2和图3)。当归补血汤的色谱峰
10对应于当归9’的组分和黄芪8”的相关系灵敏分
别为rl(10，9’)一0．8045，r2(10，8，f)一0．9998，见
(图2和3)。说明黄苠色谱指纹图谱的组分8”与当
归补血汤的组分10的光谱十分相似，而当归组分9
7
与当归补血汤的组分10的光谱相关性差，最大点也
只有0．8045，不可能为同一物质。这样．通过光谱相
关色谱，找到了当归补血汤色谱指纹图中组分10在
黄苠色谱指纹图谱中的对应组分8”，从而实现了复
方与单味药的对应归属分析。值得提出的是，光谱是
物质定性分析的重要依据，进一步比较组分10、9’
和8”的光谱曲线(图4)，组分10和8”的光谱曲线极
为相似，而组分lO和97的光谱相差较大，这迸一步
说明了当归补血汤的色谱峰10与黄苠的色谱峰8”
代表的是同一物质。
IlⅧ)．∥)
V”u一’一≯。‰K一一。o，1
二i二!卅■ 一．j
川
．～，。，虮。胤、一且L蔓一。：，j。，卅峨。^艘oi型!』==二j0 5 10 】5 20 25 30 35 40 45
f1(10，9‘)组分10与9’的光谱相关系数
rlfl0．9’)一Correlationcoefficientofcomponent10a d9
7
田2当归补血汤复方与当归在296nln波长下的色谨
指纹里潜和当归补血场组分10与当归各组分的
光谱相关色谱曲墁
Fig-2FingerprintofDBDandRASatwavelength296
nmandcorrelativechromatogramofcomponent
10ofDBDvsthosefRAS
根据以上的分析方法，对复方当归补血汤色谱
指纹图谱中的浓度较高的主要组分与单味当归和黄
芪色谱指纹图谱中的组分进行了归属分析，分析结
果见表1。在图1标出的当归补血汤的18个色谱峰
中，10个组分来源于当归，11个组分来源于黄芪，其
÷|一m虬。m■～j，
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万方数据
‘1460。 中*g-NChineseTraditionalandHerbalDrugs第36卷第10期2005年10月
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图4当归补血汤组分10、当归组分9’、
黄芪组分8”的光谱曲线
Fig·4SpectralcHrveofcomponent10i DBD．
9’inRAS．and∥InRA
中5个组分为当归和黄芪的共有组分，2个组分为
新物质。
本实验利用联用色谱仪器并结合光谱相关色谱
方法简便、快捷地对复方及组成其单味药的化学成
分进行比较研究，得到其组分归属。单殊药组成复方
后，有新物质生成，同时单味药中的一些组分在复方
中检测不到或消失·可能是在复方的组成中生成了
其他物质。本研究为以后当归补血汤的药理药效研
究奠定了基础。
裹1 当归补血汤、当归，黄芪各组分的归属分析结果
TableAdscrlptlonanalysisofeachcomponent
jnDBD．RAS．andRA
峰标号／保留时间(rain)
当归补血汤 当归 黄苠
备沣
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—
BD
、～I小
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ol“。4L_】∞=～喃』。
万方数据
当归补血汤中组分的变化及归属分析
作者： 王亚丽， 梁逸曾， 李博岩， 胡芸， 胡黔楠， WANG Ya-li， LIANG Yi-zeng， LI Bo-
yan， HU Yun， HU Qian-nan
作者单位： 王亚丽,WANG Ya-li(中南大学,中药现代化研究中心,湖南,长沙,410083;甘肃中医学院,科研
中心,甘肃,兰州,730000)， 梁逸曾,李博岩,胡芸,胡黔楠,LIANG Yi-zeng,LI Bo-yan,HU
Yun,HU Qian-nan(中南大学,中药现代化研究中心,湖南,长沙,410083)
刊名： 中草药
英文刊名： CHINESE TRADITIONAL AND HERBAL DRUGS
年，卷(期)： 2005,36(10)
被引用次数： 7次

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