全 文 ：表 2　样品中甘露醇含量测定结果 ( n= 3)
批号 甘露醇含量 (% , g /g) RSD(% )
980302 1. 27 0. 87
990823 1. 31 1. 02
991107 1. 24 1. 21
　　用本法测定复方虫草颗粒中的甘露醇时 ,其它
成分不干扰测定。 但若枸杞和莱菔子的用量超过处
方用量时 ,测定结果会偏高。配制高碘酸钾溶液时 ,
要注意盐酸的用量 ,最适用量为每 0. 015 mol高碘
酸钾用 0. 12 mol /L的盐酸 1000 mL溶解 ,可使呈
色物颜色均匀而稳定。
由于本法测定的结果可排除样品中其他还原性
物质的干扰 ,其测得的结果较容量法更能代表甘露
醇的实际值 ,本法比容量法可靠 ,而且比容量法快速
简便。
本法可以作为复方虫草颗粒质量标准中甘露醇
含量的测定方法 ,也可以作为含有虫草的其他制剂
中甘露醇含量测定的方法。
参考文献:
[1 ]　李雪芹 ,包天桐 ,王　雁 ,等 . 比色法测定冬虫夏草中甘露醇的
含量 [ J] .中草药 , 1999, 30( 1): 19-21.
[2 ]　中国药典 [ S] . 2000年版 .二部 .
HPLC法同时测定黄连上清丸中大黄素、大黄酚、大黄素甲醚的含量
姚仲青⒇
(南京中医院中医药研究所 ,江苏 南京　 210001)
摘　要: 目的　同时测定了黄连上清丸中 3种蒽醌类成分大黄素、大黄酚、大黄素甲醚的含量。 方法　采用 HPLC
法 ,以乙腈-0. 1%磷酸水溶液 ( 90∶ 10)为流动相 ,使用 C18柱。 结果　能使样品中的 3种蒽醌类成分得到良好分离 ,
分离度> 2,平均回收率为: 大黄素 98. 71% , RSD= 1. 11% ;大黄酚 98. 83% , RSD= 1. 41% ;大黄素甲醚 99. 25% ,
RSD= 1. 29%。 结论　应用本法能准确测定黄连上清丸中的此 3种有效成分 ,重现性好。
关键词: HPLC法 ;黄连上清丸 ;大黄素 ;大黄酚 ;大黄素甲醚
中图分类号: R927. 2　　　文献标识码: B　　　文章编号: 0253 2670( 2001) 08 0699 02
Determination of emodin, chrysophanol, and physcion in
HUANGLIAN SHANGQING PILL
*
by HPLC
YAO Zhong-qing
　　 ( Institute of TCM , Nanjing Hospital of TCM , Nanjing Jiangsu 210001, China)
Key words: HPLC; HU ANGLIAN SHANGQIN G PILL; emodin; chry sophanol; phy scion
* HUANGLIAN SHANGQ ING PILL is a tradi tional Chinese compound medicine.
　　黄连上清丸为传统的中药制剂 ,收载于《中国药
典》1995年版、 2000年版。有文献报道对其中的小檗
碱 [1 ]、蒽醌类 [2 ]、黄芩苷 [ 3]、栀子苷 [ 4]作了定性或定
量分析 ,但对其质量标准的研究仍不完善。大黄为方
中主药之一 ,占全方的 24. 4% ,蒽醌类成分为其主
要活性成分。对蒽醌类成分的定量分析未见报道。本
文报道采用 HPLC法同时测定黄连上清丸中 3种
蒽醌类成分大黄素、大黄酚、大黄素甲醚的含量 ,为
完善黄连上清丸的质量标准提供了依据。
1　仪器与试剂
日本岛津 LC-6A高效液相色谱仪 , SPV -6AV
紫外 -可见检测器 ; C-R3A数据处理器 ; SCL-6A系
统控制器 , RHEODYN E 7125进样阀 , CTO-6A柱
温箱 , Spheriso rb C18柱 ( 4. 6 mm× 300 mm 5μm,大
连依利特公司 )。
大黄素、大黄酚、大黄素甲醚对照品 ,购自中国
药品生物制品检定所 ;黄连上清丸 ,市售 ,产地: 河
南 ;乙腈为色谱纯 ,其余试剂为分析纯。
2　方法与结果
2. 1　色谱条件: 流动相: 乙腈 -0. 1磷酸水溶液
( 90∶ 10) ,流速 0. 6 mL /min,检测波长 254 nm ,纸
速 1 mm /min,灵敏度 0. 04AU FS,柱温: 45℃。
2. 2　标准曲线的绘制:精密称取大黄素、大黄酚、大
黄素甲醚对照品 ,以氯仿溶液 ,分别制成 0. 2, 0. 18,
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⒇ 收稿日期: 2000-09-14
0. 12 mg /mL的溶液 ,分别精密吸取 1 mL,置同一
10 mL量瓶内 ,加氯仿稀释至刻度 ,作为对照品液。
精密吸取对照品液 4, 6, 8, 10, 12μL,分别注入液相
色谱仪 ,记录峰面积 ,以峰面积为横坐标 ,进样量
(μg )为纵坐标 ,绘制标准曲线 ,回归方程分别为:
大黄素: Y1 = ( 3. 13+ 0. 16X )× 10- 4　 r1 =
0. 999 9
大黄酚: Y2 = ( 2. 70+ 0. 10X )× 10- 4　 r2 =
0. 999 8
大黄素甲醚: Y1= ( 2. 03+ 0. 08X )× 10- 4　 r3=
0. 999 9
线性范围为: 大黄素 0. 08～ 0. 24μg;大黄酚
0. 048～ 0. 144μg;大黄素甲醚 0. 072～ 0. 216μg。
2. 3　样品的测定: 样品研成细粉 ,取 1 g ,精密称
定 ,置索氏提取器内 ,加氯仿浸泡过夜 ,提取 8 h,提
取液以 0. 5% 氢氧化钠水溶液 100 mL分次洗涤 ,
至洗涤液无色 ,并合并至 100 mL量瓶内 ,定容 ,作
为供试品液。精密吸取对照品液 4, 12μL,供试品液
10μL,分别注入液相色谱仪 ,以外标两点法计算含
量 ,结果见表 1。
　表 1　黄连上清丸 3种蒽醌成分含量 (n= 3) (% )
批号 大黄素 大黄酚 大黄素甲醚
970703 0. 137 8 0. 025 1 0. 059 2
990404 0. 107 7 0. 026 9 0. 031 2
991201 0. 117 6 0. 021 9 0. 049 6
000303 0. 109 1 0. 0209 0. 037 3
2. 4　样品的阴性对照试验: 按《中国药典》 95年版
处方 ,准确称取除大黄外的其余 16味 ,粉碎成细粉 ,
取 1 g ,精密称定 ,按 2. 3项下操作 ,测定 ,结果见图
1。 在阴性对照品中 ,未检出与已知 3种对照品及样
品保留时间相同的色谱峰 ,证明本法可行。
2. 5　精密度试验:精密吸取对照品液 10μL,重复
进样 5次 ,测定各成分的峰面积 ,计算 ,结果为大黄
素 RSD= 0. 87% ;大黄酚 RSD= 1. 02% ;大黄素甲
醚 RSD= 0. 96% 。
2. 6　样品的重复性试验:取批号为 970703的样品
细粉 5份 ,每份 1 g ,精密称定 ,按 2. 3项下操作、测
1-对照品　 2-样品　 3-阴性对照
Ⅰ -溶剂　Ⅱ -大黄素　Ⅲ -大黄酚　Ⅳ -大黄素甲醚
图 1　黄连上清丸 HPLC图
定 ,结果为:大黄素 0. 135% , RSD= 1. 29% ;大黄酚
0. 0254% , RSD= 1. 72% ;大黄素甲醚 0. 0591% ,
RSD= 1. 15%。
2. 7　回收率试验: 取批号为 990404的样品细粉
0. 5 g ,精密称定 ,分别精密加入大黄素对照品液
( 0. 2 mg /mL) 3 mL、大黄酚对照品液 ( 0. 18 mg /
mL)、大黄素甲醚对照品液 ( 0. 12 mg /m L)各 1 mL,
按 2. 3项下操作、测定 ,结果回收率分别为大黄素:
97. 81% , RSD= 1. 23% ;大黄酚: 98. 83% , RSD=
1. 79% ;大黄素甲醚: 99. 25% , RSD= 1. 17%
3　讨论
大黄为方中主药之一 ,大黄素、大黄酚、大黄素
甲醚等大黄蒽醌为其主要活性成分 , 2000年版《中
国药典》大黄项下已规定 ,大黄素、大黄酚的总量不
少于 0. 5% 。因此 ,建议黄连上清丸质量标准项下 ,
增加大黄游离蒽醌的含量测定。
参考文献:
[ 1 ]　薛玉梅 . 黄连上清系列品种的质量比较 [ J] .中成药 , 1995, 17
( 10): 17-19.
[ 2]　王达妹 ,李雪宁 ,陈伟力 ,等 . HPLC法测定黄连上清片中黄连
素的含量 [ J ]. 中成药 , 1995, 17( 2): 16-17.
[ 3 ]　姚仲青 ,金芳 . HPLC法测定黄连上清丸中黄芩苷含量 [ J ].中
草药 , 1999, 30( 8): 590.
[4 ]　李　丽 . HPLC法测定黄连上清丸中栀子苷的含量 [ J] . 中成
药 , 2000, 22( 2): 133-134.
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