全 文 ：i n s t a l l
e d a n d
u s e d t o o p t im iz e t h e S C F E e o n d i t i o n s f o r t h e e f f e e t i v e e x t r a e t io n o f a e t iv e e o m P o n e n t s f r o m
l
e a v e s o f G i
n k g o b ; l o b a l
, 二 E f f e e t s o f s ix v a r ia b l e s ( p r e s s u r e , t e m p e r a t u r e , e x t r a e t i n g t im e , f l u i d s r a t i o ,
C O : r a t i o
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5 1: e o f p o w d e r e d l e a v e s ) o n t h e y i e l d a n d q u a li t y o f p r o d u e t w e r e s t u d ie d
.
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s u p e r e r it i e a l f l
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e x t r a e t io n ( S C F E ) e f f e e t iv e e o m p o n e n t s
干姜 、 姜皮 、 炮姜中辣味成分的 H P L C 测定△
山东农业大学食 品科学系 (泰安 27 1 01 8)
山 东林业学校
黄雪松 奉 汪建 民
王 兆升
摘 要 采用 H P L C 法测定 了干姜 、 姜皮 、 炮姜 中的姜酚含量分别为 1 . 0 2 、 0 . 28 和 0 . 25 9 / 10 0 9 ;
姜 酮含量分 别为 0 . 9。 、 。 . 1 8 和 4 . 8 9 / k g ;炮 姜 中的姜脑 含量 为 0 . 4 9 /k g , 姜粉 、 姜 皮 中含微量姜
脑 。 该测定方法快速 、 准确 、 简便 。
关键词 生姜 辣味成分 姜 皮 炮 姜 H P L C 法
姜 Z i n g i b e r Q fj 奋c i n a l e R o s e o e 的辣味成
分包括姜酚 、 姜脑和 姜酮卜习 ,其 中的姜酚又
包括 6一姜酚〔1一 ( 3 ` 一甲氧基 一经基 苯卜3 酮 一 5 -
轻基癸 烷 ] , 8一姜酚 [ 1一 ( 3 ` 一甲氧 基 一 4 ` 经基
苯 关 3一酮一 5一经基十二烷」, 1 0一姜 酚 [ 1一 ( 3 ` 一甲
氧基 一 4 ` 一经基苯卜 3一酮 一 5一轻基十四烷 〕等 。 它
们是姜中重要的药效成分 , 具有抗氧化 lj[ 、 抑
制 胃粘膜损伤阁 、 保肝利胆阁 、 镇痛解 热 [’, 5〕
等重要作用 。 近年研究发现辣味物质有抗衰
老 、 抗肿瘤等作用川 , 因此辣味物质含量高低
对姜的药用功效有重要影 响 。 但因其分离困
难 , 测定时干扰成分较多及无标样等 问题而
难 以定量测定 。 笔者报道用 H P L C 法测定 干
姜 、 姜皮与炮姜 中的辣味成分 。
1 材料方法
1
,
1 材料 : ①干姜 : 生姜原料购 自山东农业
大学标本园种植 “ 莱芜生姜 ” 品种 。 将新鲜生
姜洗净泥砂 ,控干明水 ,在高效多切机上切成
2 ~ 3 m m 厚薄 片 , 铺在竹 匾上 , 自然干燥至
含水 量 10 % (以 二 甲苯 为溶 剂 , 蒸 馏 法 测
定图 ) , 得干燥姜片 , 干燥率为 8 . 3 : 1 。 干姜
磨碎 , 过 2 0 目筛 ,得姜粉 。
②炮姜 : 请本校药剂师侯听代为加工制
作 , 即取干姜片置铁锅中炒至发炮鼓起 ,表面
呈焦黄色时 , 取出喷少许清水 , 晾干 , 同姜粉
磨碎 、 过筛 。
③姜皮 : 洗净新鲜生姜泥砂 ,浸于清水中
过夜 , 剥取外皮晒干 , 同干姜测定含水量 ,磨
碎 、 过筛 。
1
.
2 主要试剂 : 乙睛 , 甲醇 , A R ;其它为实验
常规试剂 。
1
.
3 测定方法
1
.
3
.
1 标样的获得 : ①姜酚 : 用干姜 粉提取
姜油树脂 , 并经硅胶 干柱层析 、 硅 胶薄板层
析 、 葡聚糖凝胶层析等分离纯化方法获得 6 ,
8 , 1 0
一姜酚同系数物 1 . 14 2 9 , 并经紫外 可见
光谱 、 红外光谱 、 质谱分析证实川 。 以香草醛
为内标 , 在 75 2 一C 紫外分光光度计 上于 280
n m 测定其含量为 98 . 5% 。
②姜酮 、 姜脑的制备及含量 : 见文献 l[, 8〕 。
1
.
3
.
2 姜酚 、 姜酮 、 姜脑标准曲线的测定 :
①仪器 : W at er s 高效液相 色谱 仪 , M 一 49 0 紫
A d d r e s s
:
H u a n g X u e s o n g
,
黄雪松 男 , 4 2 岁 , 博士 , 教授
研成果奖励 7 项 。
△ 山东 省教委资助课题
eD p
a r t m e n t o f F o od cS i
e讹 e s a nd T e e h n o lo g y , S h a n d o n g A g r i e u l t u r a l U n iv e r s i t y , T a i a n
, 主要从事食 品科学 、加工工 艺和功能食品领域的研究 , 共发表论文 60 余篇 ,获省 、 校级科
《中草药 》 1 9 9 9 年第 3 0 卷第 6 期 一 4 2 3 ·
9
.
n
.
娇卜.0
外检测器 , U 6 K 进样系统 , M 7 30 微处理机 ;
色谱条件 : 检测波长 2 7 0 n m ; 流动相 : 甲醇 ;
流速 : l m L /m i n ,色谱柱 : 拜一 B o n d p a k C I。柱 , 4
m m 火 2 5 c m ; 内标 : 香草醛 。
②姜酚 、 姜酮 、 姜脑的标准 曲线 : 准确称
取含姜酚 、 姜酮 、 姜脑各 0 . 1 0 0 9 的标样 。 用
甲醇配制成 10 0 m L 储备液 , 再 以 贮备液分
别配制 5 . 0 、 1 0 . 0 、 1 5 . 0 、 2 0 . 0 拜g /m L 的溶
液 , 按 H P L C 测定条件分别测定其峰面积响
应值 。 其标准曲线回归方程为 :
A = 1 9 3 4X 十 3 7 8 2 ( r ~ 0 . 9 9 9 8 , n 一 4 )
B = 1 8 1 6X 十 4 2 5 4 ( r ~ 0 . 9 9 9 0 , n = 4 )
C = 1 4 6 8X + 5 3 7 5 ( r = 0
.
9 9 9 2
, n = 4 )
式中 : A 、 B 、 C 分别表示姜酚 、 姜脑 、 姜酮
的含量 , X 为峰面积响应值 。
1
.
3
.
3 样品的测定 : 称取干姜粉 、姜皮 、 炮姜
各 1 9 ,分别加人约 10 m L 甲醇 , 静置浸泡 12
h
,其间摇动 3一 5 次 。取出浸泡液后再同法浸
泡 ,重复 5 次 。 收集所有浸泡液 ,用 甲醇定容
至 5 0 m L 。 测定姜酚时将样液稀释 1 0 0 0 倍 ,
测定姜酮 、 姜脑时将样液稀释 10 0 倍 , 其测定
条件同 1 . 3 . 2②并据前述标准回归 曲线测样
品中辣味成分的含量 。
1
.
3
.
4 回收率的测定 : 每个样 品处理重复 5
次 , 以检验其精密度 。
分别取 1 . 3 . 2②中含姜酚 、 姜酮 、 姜脑均
为 15 , 。 m g / m L 的储备液各 s m L , 混匀成为
含姜酚 、 姜酮 、 姜脑均为 5 . 0 产g /m L 的混合
标样 ; 再取 1 . 3 . 3 中定容稀释后的 5 个姜粉
样品溶液各 1 m L , 分别加人 混合标样 1 、 2 、
3
、
4
、
s m L
, 混匀后按 1 . 3 . 3 方法测定 , 计算
姜酚 、 姜酮含量 ,并计算 回收率 。
2 结果与分析
2
.
1 姜酚 、 姜 酮 、 姜脑的 H P L C 色谱图 : 见
图 1 。
由图 1 知 : 在 本实验条 件下 , 未能将 6 -
姜酚 、 8一姜酚 、 10一姜酚分离开 , 但作为总姜酚
的定量方法 ,分离效果可以达到要求 。
由图 1 可看出 , 以 C 。 柱为固定相 、 以 甲
醇 为流动相 时 , 姜酮 保 留时 间最 短 ( 1 . 10
.
4 2 4
.
岁叹
r
. .
。 只甘、减 卜
4 一认一-
C
A
一姜酚 B 一姜酮 C一姜脑
图 1 H p L C 图谱
m i n )
,姜酚次之 ( 3 . 0 2 m i n ) , 姜脑最长 ( 7 . 3 0
m i n )
,该结果与 B a r a n o w s k i ( 1 9 8 5 )所获得结
果基本一致闭 。
2
.
2 姜粉 、 姜皮和炮 姜中辣 味成分 的含量 :
见表 1 。
表 1 姜粉 、 炮姜 、 姜皮 中辣味物质的含 t
原料 姜酚 (g / 10 09 )
姜粉 1 . 0 22士 0 . 01 1
姜皮 0 . 28士 0 . 00 3
炮姜 0 . 2 5士 0 . 00 4
姜脑 (g /k g )
< 0
.
0 1
( 0
.
0 1
4 9士 0 . 0 14
姜酮 ( g /k g )
0
.
9 0士 0 . 01 0
0 18士 0 . 00 8
4 8士 0 . 0 12
辣味成分总
量 ( g / 1 009 )
1
.
1 1 3
0
.
2 9 9
0
.
35 7
2
.
3 精密度与收率的测定 : 5 个姜粉定容样
液的姜酚含量为 (2 0 . 4 4 士 0 . 1 3 )% ( m g /m L ) ,
姜酮含量为 (4 . 5 2士 0 . 0 7 6)% ( m g /m L ) , 变异
系数较小 , 表明该测定方法精密度较高 、 重现
性较好 ; 姜酚 、 姜酮测定 回收率分别为 (95 . 4
士 2 . 功% , (9 8 . 1 士 0 . 9 1)% , 说明该测定方法可
靠性强 。 姜酚回收率小于 1 0 % ,这可能与其
易于氧化有关 。
3 讨论
3
.
1 姜中辣味成分的测定方法 : 姜中姜酚等
辣味成分难以分离 , 常规分析方法难 以获得
准确结果 , ~ 川 。 姜酚易受热发生逆经醛缩
合 降解 ( r e t r o 一 a l d o l d e g r a d a t i o n ) 反应 , 在气
相色谱分析中也难以获得准确结果 。 H P L C
法分离效果最好 , 且在常温下操作 ,是测定姜
酚等辣味成分的理想方法 。
3
.
2 辣 味成分的含量与干姜 、 姜皮 、 炮姜 的
药效 :中医认为 , 干姜味辛性温 ,姜皮 味辛性
凉 , 这可能与干姜中辣味物质含量高 ,姜皮中
辣味物质含量低有关 。
参 考 文 献
1 黄雪松 . 生姜抗 氧化成分研究 (1 )一一提取 、 分 离 、 鉴定
与应用 (博士学 位 论文 ) . 武汉 : 华 中农业 大学 食科 系 ,
1 9 9 8
2 黄启荣 , 国外医学一中医 中药分册 , 19 8 9 , n (6 ) : 3 2
3 李 玉平译 , 国外医学 一中医 中药分册 , 1 986 , 8 ( l ) : 24
4 池 田正 书 ,等 . 国外 医学 一中医 中药分 册 , 1 9 8 3 ,总 l() 7
5 朱守川 ,等 . 国外医 学 一中医 中药分册 , 19 87 , 9( 3) : 32
6 原次健 . 日本公开特许公报 , 昭 6 0一 17 8 8 18 , 1 9 8 5
7 无锡 轻工学 院等编 . 食 品分析 . 北 京 : 轻 工业 出版社 ,
1 9 8 3
: 8 1
8 C h e n C h u
一 e h i n
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.
J A g r i
e
F o o d C h e m
.
1 9 8 6
,
( 3 4 )
:
4 7 7
9 B a r a n o w
s
k i JD
.
J o f C h r o m a t o g
r , 1 9 8 5 , ( 3 1 9 )
: 4 7 1
1 0 张维勤 . 山东农业科学 , 1 9 9 1 , ( 6 ) : 1 1
n 黄雪松 , 等 . 中国 调味 品 , 19 96 . (8 ) : 31
( 1 9 9 8
一
0 9
一
2 1 收稿 )
D e t e r m i n a t i o n o f t h e P u n g e n t P r i n c i P l e s i n G i n g e r P o w d e r
,
G i n g e r S k i n a n d B a k e d G i n g e r
H
u a n g X u e s o n g
,
W
a n g J ia n h u a a n d Z h a n g X ia o f a n ( D e p a r t m e n t o f F o o d S e ie n e e a n d T e e h n o lo g y
,
S h a n
-
d o n g A g r ie u lt u r a l U n iv e r s l t y
,
T a ia n 2 7 1 0 1 8 )
A b s t r a e t T h e p u n g e n t p r in e ip le s in g in g e r ( Z in g i占e r Q fj 王c i n a z。 R o s c . ) w a s m e a s u r e d b y H p I J C . T h e
c o n t e n t s o f g in g
e r o l i n g i n g e r p o w d e r
,
g in g e r s k in a n d b a k e d g in g e r w e r e 1
.
0 2 2
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4 9 9 / k g s h o g a o l
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b u t t h e r e w e r e o n ly t r a e e s o f s h o g a o l i n g in g e r s k in a n d p o w d e r
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K
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n g e r o n e
H P L C 测定银杏愈伤组织内醋 A 的研究△
浙 江大学西溪校 区 生命科学学院 (杭州 3 1 0 0 12) 陈云龙 晰 徐 程 徐礼根 杨志竖
摘 要 建立 了一种 可用于银杏 离体细胞培养物 中内醋 A 含量分析 的 R P 一H P L C 方法 。 样 品经低
浓度 甲醇提取后 , 用中性或 酸性氧化铝固相萃取柱 纯化 , 用示 差检测器检测 , 银杏 内醋 A 的最低检
测限 为 o , 0 12 产g ,方法回收率 为 (9 6 . 。土 2) % , R S D 为 3 . 1% 。
关键词 银杏 愈伤组织 银杏 内酷 A H P L C
银杏 内醋 ( 包括 内醋 A 、 B 、 C ) 作为一类
特 异有效 的血 小板 活化 因 子 ( p l a t e l e t 一 a e t i-
v a t i n g f a e t o r ) 受体拮抗剂 , 近年来受到 了世
界各国药学工作者的广泛关注 。 由于这类化
合物分子立体结构复杂 , 人工合成的技术难
度大 , 目前仍以银杏 叶作为提取银杏 内醋化
合物的主要来源川 。 关于银杏离体培养产生
内醋化合物的研究 ,尽管做了大量工作 ,但由
于分析测试技术上的限制 , 银杏细胞培养中
内醋含量分析尚有一定 困难 [2一 4〕。 笔者通过
采用细直径 H P L C 快速分析柱 , 检测到了愈
伤组织培养物中银杏内醋 A 化合物 。
1 仪器和材料
高效 液相 色谱仪 : 日本 岛津 , 包括 L C -
认黑es货鱿梦器戮)程黯址当盆器 ) ,呈皆烤笑撰靓劣篙添 用基础研究 , 是 “ 银杏叶提取物新生产工艺研究 ”成果 的主要完成人之 一 , 已 发表研究论文 10 多篇 ,现 主持省 自然科 学基金项 目 1 项 , 主持或参加省教委项目
△ 浙江省 自然科学基金资助项 目 ( 2 9 7 0 6 6)
《中草药万19亏百车爵百6盔角万丽 . 4 2 5 ·