全 文 ：T B敷伤膜中甲硝哇的 P H比法测定
武警医学院 (天津 0 30 16 2 )雷鹅森 .
解放军石家庄高等医学专科学校 丛月珠 刘景东
摘要 介绍用 L P H C法测定 T B膜中甲硝哇的含量 。 此法测定的回收率与药典法结果 一 致 , 说明
方法准确 、 可行。
关健词 H P L C法 紫外分光光度法 T B膜 甲硝哇
甲硝哇用于抗厌氧菌感染文献报道较多 〔 1 , 幻 。 T B敷伤膜系由甲硝哇 、 洗必泰 、 七叶 一
枝花 、 大黄 、 虎杖 、 地偷 、 当归等 中西药物组成的复方制剂 , 具有杭菌 、 消炎 、 止痛作用 ,
而且可作为防水敷料应用 。 经部队试用于外伤和蚊虫叮咬后破损 , 效果很好 , 深受欢迎 。 为
了制定 T B敷伤膜 的质控指标 , 采用 H P L C ( 高效液相色谱 ) 测定其中主要成分甲硝 哇 。 用
H P L C测定甲硝哇国内外均有报道 〔 3~ 5〕 , 但测定中西药复方制剂中甲硝哇尚未见报 道 。 我
们用乙醚和 0 . l m ol H C I萃 取 制剂中甲硝哇 , 并用甲醇与磷酸缓冲液做流动相的反相色谱法
测定甲硝哇含量 , 结果满意 。
仪器与实验条件
高效液相色谱仪 : 日本 岛 津 L C 一 4 A ;
g田、,个
S P D一 Z A S可变波长紫外检测器 ; C R 一 ZA X
数据处理机 , 色 谱 柱 : z o r b o x 一 o n s ,
D u p o n t公司 , 流动相 : 甲醉一 0 . l m ol / L磷
酸缓冲液 ( p H = 4 . 0 ) ( z : 理 ) ; 检测 器波
长 3 2 5 n m ,灵敏度 0 . o ZA U F S ; 纸速 :
m in , 室温测定 ( 20 ℃
光光度计 ( 日本岛津 )
) ; U V
一 2 0 。紫外分
。 色谱分离见图 。
2 试剂及样品
所用试剂均为分析纯 ,
图 色谱图
A
一甲硝哇 B 一 T B膜样品
双重蒸馏水 , 甲硝哇 : 天津河北制药厂产品 ( 批号 : 8 7 o 8 2 7 2’
含量 : 9 . 8 17 % ) , T B敷伤膜 : 石家庄高等医学专科学校提供 。
3 甲硝哇标准曲线
精密称取经 105 ℃千燥恒重的甲硝哇标准品 0 . 2 7 159 , 置于 2 5 o m l量瓶中 ,用 0 . l m ol / L H c l
溶解并稀释至刻度 。 分别量取 2 0 、 2 0 、 5 0 、 20 0 、 5 00卜1此溶液于 5个 z o m l量瓶中 ,加 o . l m o l
/ L H CI 稀释至刻度 。 各取 5衅进样 , 所得数据求得浓度 与峰面积值之间线性回归方程 : A =
14 1 3 + 2 7 1
.
7 A , 相关系数 r = 0 . 9 9 9 7 , 变异系数在 0 . 2 3% ~ 0 . 6 9% 之间 。
4 T B敷伤膜的测定
4
.
1 样品的制备 : 取 T B敷伤膜约 19 , 精密称重 , 置25 m l分漏斗中 , 加乙醚功 m l , 0 . l m ol
/ L H C I 10 m l
, 强力振摇 拍 m in , 使成雪片状。 分取水层液 , 再依法萃取 2次 , 水 层 液 用
0
.
l m ol / L H C I定容至 50 m l , 经用 。 . 45 协微孔滤膜过滤后 , 进样测定 , 色谱分离见图 。
取醚层液 , 置水浴上 , 挥去乙醚 , 用 0 . l m ol / L H C I定容至 50 m l , 用 0 . 凌5件微孔滤 膜过
滤后 , 进行测定 。 色谱图上无甲硝哇峰 。
.
A d d r e s s
:
L e i P e n 吕 s e n A r m 。 d P o l ie 。 m a n M e d i e a l C o l l e g e , T 三a n j ! n
《 中草药 》 19 9 5年第 2 6卷第 4 期 · 18 7 ·
水与醚均不能溶解的高分子化合物 , 加
无水乙醇 20 m l , 强力振摇 ,使成胶体溶液 。 加
入 。一 m o l / L H e l Z o m l ,使高分 J几化合物析
出 ,过滤 ,滤液定容至 s o m l , 少月0 . 4 5卜微孔滤
膜过滤 ,进样测定 。 色谱图上几无 甲硝哩峰 。
4
.
2 样品测定结果 :用本法测定了 6批样品 ,
表
批号 含量 ( % )
样品测定结果
平均 ( % ) S D C V ( % )
结果见表 。
回收率试验
将标准品加入到样品溶液中 ,
8 7 0 1 2 0 1 0
。
8 9 0
。
8 7 0
。
9 1 0
。
8 6 0
。
0 2 2
.
2 5
8 70 12 0 6 0
。
9 2 0
。
9 0 0
。
9 3 0
.
9 2 0
.
0 1 5 1
。
6 6
8 7 0 12 0 8 0
。 9 3 0
.
9 0 0
.
9 1 0
。
9 1 飞 0 。 0 1 5 1
。
6 8
8 7 0 12 1 0 0
。
9 3 0
。
9 5 1
。
0 4 0
。 匀7 0 。 0 5 9 6 . 0 2
8 7 0 1 2 1 2 0
。
8 1 0
。
8 4 0
.
8 1 0
。
8 2 0
。
0 1 7 2
。
1 1
8 7 0 12 1 5 0
。
9 0 0
。
9 0 0
。
8 7 0
。
8 9 0
。
0 1 7 1
。 9 4
按上述色谱条件测定甲硝哇的回收率 ,
进行 比较 , 结果 H P L C : 又 = 1 0 0 . 5% , s D = 1 . 16 , e v = 1 . 2 5% , u v
= 3
.
3 5 , C V = 3
.
3纬
并同时用 U V 法 〔 “ 〕
X = 10 2
.
4%
,
S D
6 讨论
6
.
1 近年来国内外有报道 , 用 2 5 4 n m 、 3 17n m波长检测 , 用甲醇一水或磷酸盐 一乙睛 作 流动
相测定甲硝哇 。 经我们反复实验 , 3 2 5n m波长检测 , 甲醇一磷酸缓冲液作流动相有利于 排 除
该制剂中其它药物干扰 。
甲 2 用 U v 法 ( 药典 、 法 ) 测定 T B膜样品时 , 结果偏高 。 由 H P L C法测定样 品 的 色 谱 图
( 见图 ) 上不难看出 , 在测定波长下 , 有其它中西药成分 的千扰 , 可见单川紫外分光光度法
难 以测定该制剂中的甲硝哇 。
参 考 文 献
E y k y n S T 一 e t a l
.
J B r i l M e n d
, 一。 7 6 ,
2
* 4 1 8
E y k y n 5 T
.
S u r g e r y
, 1 0 8 5 , 9 3 ( 1 )
.
P a r t Z: 2 0 9
W
o o l l a r d G A
。
J C h r o m a t o g r a m
,
1 9 8 4
3 0 3 ( 1 ) : 2 6 0
G i b s o n R A
,
3 0 * 7 8 4
G u P r a V D a s
。
1 3 3 1
e t a l
.
J C l i n e h e m
, 1 9 8 4
J P h a r m s c i
, 1 9 8 4 , 7 3
:
6 中国药典 . 二部 . 1 9 8 5 . 98
( 19 9 4
一 0 9 一 1 2 ,次稿 )
., r . . . .里 . 口 , . . . . . . . . , 。 健 , 叫里 , , . , . , , r ~ , . . , . . 气r 里 ~ ,— . . , ~吧 r , . , . r厂 、 , . , r , 眨. 一
龙胆苦贰对小鼠化学和免疫所致肝损害的抑制作用
K o n d o Y
, e t a l
.
P l a n t a M e d i e a
, 1 9 9 4
,
6 0 ( 5 )
: 理1 4
从龙胆科植物秦笼 G e n 一i a , a o a e ,一 o P 八夕 I l a
P a l l
. 根中分得龙胆苦 试 ( g e n t i o p i e r o s i d e ,
简称 G P S ) , 研究其对由C C I `诱导的肝炎 和由脂
多糖 ( L P S ) /卡介苗 ( B C G ) 诱导的肝炎的抑制
作用 。 结果表明 : a )在 C C l’ 诱导的肝炎小鼠中 ,
预先口服 G p s s o 一 6 o m g / k g · d , 连续 s d , 能 使肝
脏中升高的氨基转移酶 G O T , G T P水平受到抑 制 。
b ) 在先给予 B C G , 7 d后给予小 鼠非致 死 量 1 0协g
的 L P S造成严重肝炎的模型中 , 预先腹腔注射 G P S
6 o m g / k g
·
d
, 共 s d , 血清 G O T 、 G P T 显著下降 ,
且呈剂量依赖关系 。 c ) 在 B C G / L P S模 型 中 , 作
为主要炎症介质的 T N F 一肿瘤坏死因子在血清中的
浓度也随之上升 , 90 一 12 0 m in 达峰值 ,在 治疗剂量
下 , G P S能显著抑制血清中T N F 的 升 高 , 表 明
G P S是通过抑制 T N F 的生成来保护肝脏的 。
G P S抑制 T N F的生成和肝脏氨基转移酶 的释
放 。 这一事实也可以用超氧化歧化酶或过 氧 化 氢
酶对 L P S /乳糖胺诱导小鼠肝炎的保护作用 得到证
实 。 这表明活性氧在 B C G / L P S肝炎模 型 中 的重
要作用 。 已有报道 , G P S是通过游离基的生成来保
护 C C I . 诱导的肝炎 。 可以推测 : G P S在化学和免
疫诱导的肝炎中起抗氧剂的作用 。
( 陈蕙芳 摘译 )
·
18 6