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收稿日期:2013 － 04 － 15
基金项目:中华人民共和国人力资源和社会保障部留学人员科技活动
择优资助启动类项目(2011LX003) ;辽宁省博士科研基金启
动项目(20121135)。
作者简介:袁媛(1980 －) ，女，河北武邑人，副研究员，博士后，研究方
向:中药药效物质基础研究及新药研发。
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HPLC法测定 19 个人参新炮制品 －
黑参样品中的人参皂苷含量
袁媛1，3，于艳2，徐荣培3
(1．辽宁省中医药研究院，辽宁 沈阳 110034;2．辽宁省中医院，辽宁 沈阳 110032;
3. 韩国大田大学韩医药研究所，韩国 大田 300716)
摘 要:目的:建立黑参炮制工艺标准和质量控制标准。方法: HPLC法测定 19 个人参新炮制品 －黑参样品中的人
参皂苷含量。结果:人参皂苷 Rg1、Re、Rb1 在 MSG80A180 系列中的含量普遍高于 MSG90A360( 1) 。在 MSG80A180 系列
样品中，人参皂苷 Rg1、Re、Rb1 含量先增加后减少。在 MSG90A180 系列中，人参皂苷 Rg1、Re、Rb1 含量先降低后升高。
在 MSG110B120 系列样品中，人参皂苷 Rg1 和 Re 含量先减少后增加，而 Rb1 正好相反。在 MSG121B060 系列样品中，
Rg1 呈现先增加后减少的趋势，而 Rb1 和 Re呈现增加 －减少 －增加的趋势。在 MSG121B120 系列样品中，3 种人参皂苷
含量降低得很快，Rg1 和 Re 几乎检测不到。BGKBRG 样品中不含这 3 种人参皂苷成分，RGKINH 样品中含有 Rg1 和
Rb1，但含量很低。显然，成分变化在这些样品中没有呈现连续性，说明温度、压力和时间都对黑参炮制工艺有影响。而
且，通过横向比较，更多的峰数和更高的峰值产生在无压力的样品中。随着蒸制次数的增加，这 3 种人参皂苷成分应变
化成其他皂苷成分。结论:温度、压力和时间对黑参制作工艺有影响。有必要对黑参的炮制进一步深入研究。同时，在
以后的研究中，应通过寻找黑参独有的标志性成分来建立和完善其炮制工艺标准和质量控制标准。
关键词:黑参; 人参皂苷; HPLC
中图分类号:R927． 2 文献标志码:B 文章编号:1000 － 1719(2013)10 － 1993 － 03
Simultaneous Quantification of Ginsenosides in 19 Black Ginseng
Samples Developed grom Panax Ginseng by HPLC
YUAN Yuan1，3，YU Yan2，XU Rongpei3
(1． Liaoning Institute of TCM，Shenyang 110034，Liaoning，China;2． Liaoning Provincial Hospital of TCM，
Shenyang 110032，Liaoning，China;3． College of Oriental Medicine，Deajeon University，Deajeon 300716，Korea)
Abstract:Objective:This experimental study was performed to establish manufacture process standard and quality control
standard of black ginseng． Methods:Ginsenosides contents in 19 black ginseng samples were simultaneously determined by HPLC．
Results:The contents of ginsenosides Rg1，Re，Rb1 in MSG80A180 series，were more than that in MSG90A360(1)． Among these
samples of MSG80A180 series，the contents of ginsenosides Rg1，Re，Rb1 were all firstly increased and then decreased． The con-
tents of ginsenosides Rg1，Re，Rb1 in MSG90A180 series were firstly declined and then increased． In MSG110B120 series，the
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DOI:10.13192/j.issn.1000-1719.2013.10.069
contents of ginsenoside Rg1 and Re were firstly decreased and then increased，but ginsenoside Rb1 was on the contrary． Ginsen-
oside Rg1 was in a rise － decline trend，while ginsenoside Rb1 and Re were in a rise － decline － rise trend in MSG121B060 series．
In MSG121B120 series，three kinds of ginsenosides were decreased rapidly，Rg1 and Re were almost not detected． Company A＇s
sample BGKBRG did not contain ginsenosides Rg1，Re and Rb1． RGKINH did not contain Re but Rg1 and Rb1，and the contents
of Rg1 and Rb1 were relatively low． Obviously，content change didn＇t show a consistent trend，so temperature，pressure and time all
had effects on standard manufacture process of black ginseng． In addition，horizontal comparison，more peak numbers and higher
peak value were in no pressure samples． According to the pharmacopoeia criterion，only MSG80A180(5)complied with it． With
steaming more times，ginsenosides may change into other components． Conclusion:Some factors including temperature，pressure
and time all have effects on standard manufacture process of black ginseng． It＇s necessary to further study on the production of
black ginseng． Moreover，in later experiments，we should focus on other ginsenosides to find out the unique and index components
to establish the standard of black ginseng．
Key words:black ginseng;ginsenosides;HPLC
人参(Panax ginseng C． A． Mey) ，为五加科人参的
干燥根，从古至今被誉为“草药之王”。性平、味甘、微
苦，微温。用于大补元气，复脉固脱，补脾益肺，生津止
渴，安神益智。目前，黑参在韩国式人参的一种新炮制
品。有文献报道［1 － 2］，黑参比白参和红参有更强的生
物活性，如抗肿瘤、降血糖、提高免疫、抗炎等。黑参具
有很好的研发前景。人参皂苷是人参的活性成分，因
此，研究分析黑参中人参皂苷成分对黑参的进一步研
究起着至关重要的作用。
中国和韩国药典中只包含白参和红参［3 － 5］。黑参
的标准制作工艺和质量控制标注还没有建立，而且也
没有被收载入药典中。药典中，以人参皂苷 Rg1、Re
和 Rb1 对白参和红参进行质量控制。因此，本实验对
19 种人参新炮制品 －黑参中的人参皂苷成分 Rg1、Re
和 Rb1 进行了含量测定。
1 仪器与材料
Agilent 1100 高效液相色谱仪，包括四元泵、在线
脱气机、柱温箱、DAD 检测器、全自动进样(美国 Agi-
lent公司)。
人参皂苷 Rg1、Re和 Rb1 标准品购自中国食品药
品检定研究院，批号分别为 110703 － 220726，0754 －
200216，110704 － 200216。三者的纯度都大于 98%。
乙腈为色谱纯(德国默克公司) ，水为纯净水(杭
州娃哈哈集团有限公司) ，其它试剂均为分析纯(天津
科密欧化学试剂有限公司)。19 种黑参样品按表 1 设
置的温度、压力、时间和次数制备。
1. 1 色谱条件
色谱柱:Agilent TC － C18(4. 6 mm × 250 mm，5
μm) ;流动相:A为乙腈，B为水，梯度洗脱条件:0 ～ 35
min(19%A，81%B) ，35 ～ 55 min(19% ～ 29% A，81%
～71%B) ，55 ～ 70 min(29% A ～ 71% B) ，70 ～ 100 min
(29% ～40%A，71% ～60% B) ;流速:1. 5 mL·min －1;
检测波长:203 nm;柱温:25 ℃;进样量:10 μL。
1. 2 供试液制备
19 种黑参样品，各取 1 g 粉末，精密称定，用石油
醚(60 ～ 90 ℃)30 mL，超声提取 15 min，置蒸发皿中，
蒸发掉石油醚，残留物用 50 mL饱和正丁醇溶解，超声
提取 30 min，滤过，残渣用饱和正丁醇洗涤，滤过，合并
两次饱和正丁醇滤液，置蒸发皿中蒸干，残渣加甲醇溶
解，转移至 5 mL量瓶中，加甲醇至刻度，摇匀，用 0. 45
μm微孔滤膜滤过，即得。
表 1 19 种黑参样品的制备
压力
(A:no，B:yes)
温度
(℃)
时间
(min)
蒸制
(次数)
样品名称
A公司 BGKBRG
B公司 RGKINH
A 80 180 2 MSG80A180(2)
3 MSG80A180(3)
4 MSG80A180(4)
5 MSG80A180(5)
6 MSG80A180(6)
A 90 180 2 MSG90A180(2)
3 MSG90A180(3)
4 MSG90A180(4)
黑参样品制备
MSG90A360
(1)为无压力、
900 ℃、360 min
B 110 120 2 MSG110B180(2)
3 MSG110B180(3)
4 MSG110B180(4)
B 121 60 2 MSG121B060(2)
3 MSG121B060(3)
4 MSG121B060(4)
B 121 120 2 MSG121B120(2)
3 MSG121B120(2)
2 方法与结果
2. 1 标准品溶液制备
取对照品人参皂苷 Re2. 05 mg、Rg12. 52 mg、
Rb12. 13 mg，精密称定，置于 5 mL 容量瓶中，再加甲
醇溶解置刻度，摇匀，用 0. 45 μm 微孔滤膜滤过，即得
混合的人参皂苷标准品溶液。
2. 2 方法学考察
2. 2. 1 精密度试验 取同一黑参供试品溶液，按
“1. 1”色谱条件，重复进样 5 次，记录色谱峰的保留时
间和峰面积。以 Rg1 为参照，相对峰面积和相对保留
时间的 RSD均小于 0. 2%，表明仪器的精密度良好。
2. 2. 2 重复性试验 取同一黑参样品 5 份，精密称
定，按“1. 2”制备供试液，再按“1. 1”色谱条件进行
2. 2. 3 稳定试验 取同一黑参供试品溶液，室温下分
别在 0、2、4、8、24、48 h进样分析。相对峰面积 RSD均
·4991· 辽宁中医杂志 2013 年第 40 卷第 10 期
小于 0. 24%和相对保留时间的 RSD 均小于 0. 27%，
结果表明供试液室温下 48 h内稳定。
2. 3 HPLC图谱分析
相对峰面积 RSD均小于 0. 3%和相对保留时间的
RSD均小于 0. 1%，结果表明方法的重复性良好。
3 结 果
精密吸取制备好的 19 种黑参供试品溶液 10 μL，
注入液相色谱仪，按上述色谱条件测定计算样品中人
参皂苷 Rg1、Rb1、Re的含量，如表 2 所示。
表 2 19 种黑参样品中人参皂苷 Rg1、Rb1、Re的含量
Sample No. 样品名称
样品重量
(g)
平均含量(%)
Rg1 Re Rb1
1 MSG90A360(1) 1. 0375 0. 010 0. 011 0. 031
2 MSG80A180(2) 1. 0649 0. 073 0. 058 0. 070
3 MSG80A180(3) 1. 0268 0. 160 0. 082 0. 175
4 MSG80A180(4) 1. 0113 0. 148 0. 065 0. 112
5 MSG80A180(5) 1. 0039 0. 139 0. 156 0. 411
6 MSG80A180(6) 0. 9995 0. 128 0. 081 0. 211
7 MSG90A180(2) 0. 9934 0. 169 0. 140 0. 280
8 MSG90A180(3) 1. 0296 0. 039 0. 034 0. 058
9 MSG90A180(4) 0. 9993 0. 063 0. 048 0. 099
10 MSG110B120(2) 1. 0173 0. 004 0. 007 0. 033
11 MSG110B120(3) 1. 0115 0. 008 0. 004 0. 059
12 MSG110B120(4) 1. 0724 0. 014 0. 010 0. 042
13 MSG121B060(2) 1. 0434 0. 109 0. 057 0. 179
14 MSG121B060(3) 1. 0433 0. 024 0. 025 0. 046
15 MSG121B060(4) 1. 0356 0. 007 0. 030 0. 106
16 MSG121B120(2) 0. 9995 0. 013 0. 010 0. 131
17 MSG121B120(3) 1. 0055 － － 0. 026
18 BGKBRG(9) 1. 0353 － － －
19 RGKINH(1) 1. 0399 0. 009 0 0. 052
人参皂苷 Rg1、Re、Rb1 在 MSG80A180 系列中的
含量普遍高于 MSG90A360(1)。在 MSG80A180 系列
样品中，人参皂苷 Rg1、Re、Rb1 含量先增加后减少。
在 MSG90A180 系列中，人参皂苷 Rg1、Re、Rb1 含量先
降低后升高。在 MSG110B120 系列样品中，人参皂苷
Rg1 和 Re 含量先减少后增加，而 Rb1 正好相反。在
MSG121B060 系列样品中，Rg1 呈现先增加后减少的趋
势，而 Rb1 和 Re 呈现增加 －减少 －增加的趋势。在
MSG121B120 系列样品中，3 种人参皂苷含量降低得很
快，Rg1 和 Re几乎检测不到。BGKBRG样品中不含这
3 种人参皂苷成分，RGKINH 样品中含有 Rg1 和 Rb1，
但含量很低。显然，成分变化在这些样品中没有呈现
连续性，说明温度、压力和时间都对黑参炮制工艺有影
响。而且，通过横向比较，更多的峰数和更高的峰值产
生在无压力的样品中。随着蒸制次数的增加，这 3 种
人参皂苷成分应变化成其他皂苷成分。
在药典中，人参的测定标准是 Rg1 + Re≥0. 30%，
Rb1≥0. 20%，红参的测定标准是 Rg1 + Re≥0. 25%，
Rb1≥0. 20%。如果按此标准，只有 MSG80A180(5)符
合。笔者认为这是由于随着蒸制次数的增加，Rg1、
Re、Rb1 转化成了其它人参皂苷成分。因此，应研究黑
参特有的标志性成分来建立黑参炮制工艺和质量控制
标准，才能更合理、更好的开发应用黑参。
4 结 论
温度、压力和时间对黑参制作工艺有影响。有必
要对黑参的炮制进一步深入研究。同时，在以后的研
究中，应通过寻找黑参独有的标志性成分来建立和完
善其炮制工艺标准和质量控制标准，将我国人参及其
产品推向国际市场具有重要意义。
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992 － 993．
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地 址:广西民族医药研究院(广西南宁市明秀东路 234 号)
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