全 文 ：人参研究 GINSENG RESEARCH 2012 年第 1 期
黑 参 中 7 种 人 参 皂 苷 含 量 测 定
乔 雪 李月茹
（吉林农业大学中药材学院·吉林 长春·130118）
摘 要： 目的 采用高效液相（HPLC）法测定黑参中 7种人参皂苷 Rf、Rg2、Rh1、Rc、Rb2、Rb3、Rd的含量，并
建立同时测定 7种人参皂苷含量的方法。 方法 采用 Agilent Eclipse XDB-C18（4.6mm×250 mm，
5μm）色谱柱，以乙腈-水溶液为流动相，梯度洗脱，流速为 1.0 mL·min-1，检测波长 203nm，以外
标法进行定量 。 结果 7 种人参皂苷 Rf、Rg2、Rh1、Rc、Rb2、Rb3、Rd 含量分别为 0.06%、0.05%、
0.03%、0.02%、0.40%、0.08%、0.23%。 结论 首次同时对黑参中的人参皂苷进行了含量测定，可作
为参类药材同时测定 7种人参皂苷含量的方法。
关键词：黑参；人参皂苷；HPLC
Determination of Seven Kinds of Ginsenosides in Black Ginseng
QIAO Xue, LI Yue-ru
（College of Chinese Medicinal Materials, Jilin Agricultural University, Changchun 130118, China）
Abstract: Purpose To establish the method for determining simultaneously seven kinds of ginsenosides Rf, Rg2, Rh1, Rc, Rb2, Rb3, Rd
and their contents in black ginseng by HPLC. Methods HPLC was carried out on Agilent Eclipse XDB-C18（4.6mm×250 mm,
5μm）with acetonitrile-water, gradient elution, the volume of flow 1.0 mL·min-1 and detection wavelength 203nm. Results
The contents of seven kinds of ginsenosides in black ginseng were 0.06% ,0.05% ,0.03% ,0.02% ,0.40% ,0.08% ,0.23% .
Conclusions The contents of ginsenosides ingredients in black ginseng were determined in the first time. The established
method can be used in determining the contents of multiple ginsenosides in herb ginseng simultanesly.
Keyword: Black ginseng; ginsenosides; HPLC
2000 多年以前在亚洲的很多地区，人参（五加科
人参属，梅伊尔）传统地被当做一件昂贵的、珍贵的医
药药品[1，2]。人参皂苷是人参中含有的起主要作用的成
分，是抗糖尿病药、抗炎药和抗肿瘤的活性成分[3]。 到
目前为止，30 多种不同的人参皂苷已经被离析出来
并具有其自身地特点， 而且显示出不同地药理学作
用。 基于他们的苷元配质部分，人参皂苷能被分成两
类：原人参二醇（Rb1、Rb2、Rc、Rd、Rg3、Rs3）和原人参
三醇（包括 Re、Rg1和 Rf）[4～6]。
黑参是用白参在 98℃的高温下循环蒸煮 9 次而
得的人参深加工产品，与人参相同，含有多种皂苷类
成分，药理作用也有相似[7]。国内有关人参皂苷的报道
很多，但黑参中人参皂苷的高效液相色谱分析法未见
报道，目前韩国对黑参的研究比较深入[8～11]。 为完善黑
参的质量分析方法，并为其临床用药提供质量控制标
准，本工作采用 HPLC 法对实验室自制黑参中 7 种人
参皂苷 Rf、Rg2、Rh1、Rc、Rb2、Rb3、Rd 进行了含量测
定， 建立了同时测定 7 种人参皂苷的含量测定方法，
为黑参的进一步研究和质量评价提供科学参考。
1 材料与方法
1.1 材料与试剂
人参为 5年生采于抚松，经吉林农业大学中药材
学院郑毅男教授鉴定为人参 （Panax ginseng C.A.
Meyer.）；乙腈（色谱纯） 美国 Sigma 公司；超纯水；甲
醇（色谱纯） 美国 Sigma 公司；正丁醇、乙醚为分析
纯； 人参皂苷 Rf、Rg2、Rh1、Rc、Rb2、Rb3、Rd 由中国药
作者简介：乔雪，（1985-），女，硕士研究生，学历硕士，研究方向：天然产物化学。 E-mail: qiaoxitong@live.cn
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人参研究 GINSENG RESEARCH 2012 年第 1 期
皂苷种类
Rf Rg2 Rh1 Rc Rb2 Rb3 Rd
黑参峰面积 222.14610 326.30649 186.01096 51.45395 490.77545 238.04634 736.88708
标准品峰面积 942.15778 1488.44971 1152.34424 829.42804 318.83981 846.99078 1231.32617
标品浓度（mg/mL） 0.24 0.23 0.21 0.34 0.26 0.30 0.39
含量（%） 0.06 0.05 0.03 0.02 0.40 0.08 0.23
品生物制品检定所提供。
1.2 仪器与设备
DHG-9140A 型电热恒温鼓风干燥箱 上海精宏
实验设备有限公司；YXQ-LS-50SⅡ立式高压蒸汽灭
菌器 上海博迅医疗设备厂；AL104 电子天平 梅特
勒—托利多仪器有限司；Agilent 1200Series 高效液相
色谱仪 安捷伦公司。
1.3 方法
1.3.1 黑参加工方法
选取 5年生全须人参若干，要求：大小适中、体长
10cm 以上、单支重量达到 40g 以上、无痕斑、无霉斑。
清洗除杂，自然通风晾干，40℃干燥 12h，将干燥好的
人参先用 100℃蒸汽预热 2h，平铺放入蒸汽灭菌锅中
115℃加热蒸制 2h，蒸制完成后取出放入烘箱中 40℃
干燥 12h，如此反复 9 次即得黑参。 所得黑参呈黑色
且有人参特有的香气， 掰开黑参色泽均匀呈黑色，无
碳糊味。 本工作所采用试验材料均采用本方法制备。
1.3.2 色谱条件
采用 Agilent 1200 高效液相色谱仪，配用紫外检
测器，采用梯度洗脱方式进行，检测波长为 203nm。色
谱柱为 Agilent Eclipse XDB-C18 （4.6mm×250 mm，
5μm），进样体积 10μL，柱温 40℃，流动相流速为 1.0
mL·min-1，流动相为乙腈（A） 和水（B）按不同体积比
混合溶液，梯度洗脱程序如表 1 所示。
表 1 流动相梯度洗脱程序
Table 1 Gradient elution program of mobile phase
1.3.3 样品含量测定
1.3.3.1 对照品溶液的制备 精密称定人参皂苷 Rf、
Rg2、Rh1、Rc、Rb2、Rb3、Rd 各 2.4mg、2.3mg、2.1mg、3.4mg、
2.6mg、3.0mg、3.9mg 分别加色谱甲醇定容置 10 mL 量
瓶中，摇匀，待测。
1.3.3.2 供试样溶液制备 精密称定供试样品约 1g，
用中性滤纸包好， 加乙醚索式提取， 微沸回流提取
1h，供试样品药包挥干乙醚溶剂，加入甲醇浸泡过夜，
80℃水浴回流 8h，以人参皂苷提尽为准（定性鉴别阴
性）。 合并甲醇提取液，减压蒸馏，少量甲醇提取液置
蒸发皿中， 水浴蒸干。 用蒸馏水复溶， 加水 30mL-
40mL 置分液漏斗中用水饱和的正丁醇 30mL 进行萃
取，共 4 次。 取上层液蒸干，加甲醇溶解后，转移至
10mL 量瓶中，用甲醇稀释至刻度，摇匀，备用。
1.3.3.3 标准曲线的绘制 分别取配好的混和标准储
备液稀释得到一系列不同浓度混和标准操作溶液。进
样量 20μL，以被测物浓度 C(mg/mL)为横坐标，以峰面
积 A 为纵坐标作线性回归方程， 人参皂苷在所配标
准溶液浓度 0.020mg/mL～0.500mg/mL 范围内线性关
系良好， 线性回归方程如为 A=3776.1C-20.169 （R=
0.9983）
1.3.3.4 样品含量测定 分别精密吸取对照品溶液和
供试品溶液 20μL，按上述色谱条件测定，以外标法计
算含量。
1.3.4 精密度试验
精密吸取样品溶液 20μL，连续重复进样 5次，记
录峰面积。
1.3.5 回收率试验
精密称取实验室自制黑参粉末样品 0.500g 三
份，分别加入 5.00 mL 混和标准品储备液，室温下挥
干，用索氏提取法提取，进样 20μL，计算得到加标回
收率。
2 结果与分析
2.1 黑参人参皂苷含量测定结果
经测定， 黑参中 7 种人参皂苷 Rf、Rg2、Rh1、Rc、
Rb2、Rb3、Rd 含 量 分 别 为 0.06% 、0.05% 、0.03% 、
0.02%、0.40%、0.08%、0.23%，结果见表 2。高效液相色
谱图见图 1、图 2。
乔 雪等：黑参中 7 种人参皂苷含量测定
时间/min 乙腈（A）/% 水（B）/%
0-25 19-20 81-80
25-35 20-31 80-69
35-60 31-40 69-60
60-90 40-80 60-20
90-120 80-100 20-0
表 2 样品测定结果
Table2. Contents of ginsenosides in black ginseng
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人参研究 GINSENG RESEARCH 2012 年第 1 期
图 1 标准品 HPLC谱图
Fig.1 HPLC chromatography of standard
图 2 黑参样品 HPLC谱图
Fig2. HPLC chromatography of black ginseng
2.2 精密度试验及回收率试验结果
测得 Rf、Rg2、Rh1、Rc、Rb2、Rb3、Rd RSD 分别为 0.
32%、0. 24%、0. 53%、1. 4%、0. 12%、0. 86%、1. 2%、0.
89%， 仪器精密度良好。 回收率结果显示回收率在
96.1-100.3%之间。
3 结 论
本研究首次采用 HPLC 法对黑参所含的 7 种人
参皂苷 Rf、Rg2、Rh1、Rc、Rb2、Rb3、Rd 进行了含量测
定， 通过分析发现， 黑参中 Rb2、Rd 含量相对较高
（0.4%、0.23%）， 但其他人参皂苷 Rf、Rg2、Rh1、Rc、Rb3
含量较少， 黑参 HPLC 谱图中还出现很多未知峰，其
出峰时间较晚，说明这些皂苷可能是人参皂苷的降解
成分，需要借助液质联用及核磁共振等技术对其成分
和结构进行鉴定。本工作建立了同时测定 7种人参皂
苷的含量测定方法，该方法稳定可靠，简单易行，快速
准确，可为黑参的质量分析方法提供参考，同时也可
用于参类药材各人参皂苷的定量分析。
参 考 文 献
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