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Determination of capsaicin, dihydrocapsaicin, and capsanthin in Capsicum annuum from various habitats

不同产地辣椒中辣椒碱、二氢辣椒碱与辣椒红色素的测定



全 文 :中草药 Chinese Traditional and Herbal Drugs 第 42 卷 第 11 期 2011 年 11 月

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不同产地辣椒中辣椒碱、二氢辣椒碱与辣椒红色素的测定
安士影 1, 2,孟兆青 1, 2,景 娇 1,程宁波 1, 2,贺顺伟 1, 2,萧 伟 1, 2*
1. 江苏康缘药业股份有限公司,江苏 连云港 222001
2. 中药制药过程新技术国家重点实验室(筹),江苏 连云港 222001
摘 要:目的 通过测定不同产地辣椒中辣椒碱与辣椒红色素的量,为辣椒原料的选择提供科学依据。方法 采用《中国药典》
2010 版方法测定辣椒中辣椒碱、二氢辣椒碱;采用 GB10783-2008 方法测定辣椒中红色素的色价。结果 江西、云南产辣椒中
辣椒碱、二氢辣椒碱的量较高,河北、河南产辣椒中红色素的量较高。结论 不同产地辣椒中辣椒碱和红色素的量差异较大。
关键词:辣椒;辣椒碱;辣椒红色素;二氢辣椒碱;定量测定
中图分类号:R286.022 文献标志码:A 文章编号:0253 - 2670(2011)11 - 2258 - 03
Determination of capsaicin, dihydrocapsaicin, and capsanthin in Capsicum annuum
from various habitats
AN Shi-ying1, 2, MENG Zhao-qing1, 2, JING Jiao1, CHENG Ning-bo1, 2, HE Shun-wei1, 2, XIAO Wei1, 2
1. Jiangsu Kanion Pharmaceutical Co., Ltd., Lianyungang 222001, China
2. State Key Laboratory of Pharmaceutical Processing New-tech for Chinese Materia Medica, Lianyungang 222001, China
Key words: Capsicum annuum L.; capsaicin; capsanthin; dihydrocapsaicin; quantitative determination

辣椒 Capsicum annuum L.在我国已有 400 多年
的应用历史,其分布地区广,品种多,应用范围广,
具一定药用价值。《中国药典》2010 版(一部)将
其作为新增品种加以规定,并通过高效液相色谱法
测定辣椒碱、二氢辣椒碱的量来控制其质量。
辣椒碱类化合物具有镇痛、消炎、杀菌的作用,
现已被广泛应用于治疗风湿、跌打损伤、镇痛等方
面[1-2]。辣椒碱及其软膏制剂已经收载于美国药典,
被广泛应用于治疗关节炎、肌肉疼痛、背痛、运动
扭伤和带状疱疹后遗留神经痛等疾病。辣椒中另外
一类主要成分——辣椒红色素是国际上最好的天然
植物色素,具有色泽鲜艳,色价高,着色力强,保
色效果好的优点;并且具有安全性高,调节生理代
谢、抗癌美容的特点。近年来辣椒红色素作为食品
用色素更是出口增长的热点品种,广销日本、美国、
欧洲各国。因此研究不同地区辣椒中这两类物质量
的差异,具有一定的现实意义。
国内对少数几个产地辣椒中辣椒碱进行了分
析[3-4],本实验对 21 个产地 24 批辣椒中的辣椒碱、
二氢辣椒碱、辣椒红色素进行了较为系统的研究。
1 材料与仪器
不同产地的 24 份辣椒样品由 21 个省区收集,
经江苏康缘药业股份有限公司王振中研究员鉴定,
样品均为茄科植物辣椒 Capsicum annuum L. 的干
燥果实。将其烘干,粉碎,置干燥器内,备用。
安捷伦高效液相色谱仪(Agilent 1100,VWD
检测器);UV2401 PC 紫外可见分光光度计(上海
科器岛津仪器);250 W 电脑型超声清洗机(上海
杰恩普超声设备有限公司);AE 240 电子分析天
平(梅特勒-托利多仪器-上海有限公司);辣椒碱
(批号 110839-200403)、二氢辣椒碱对照品(批
号 111666-200401)由中国药品生物制品检定所
提供;乙腈为色谱纯,水为纯净水,丙酮,甲醇,
四氢呋喃均为分析纯。
2 辣椒碱和二氢辣椒碱的测定
2.1 对照品溶液的制备
精密称取辣椒碱对照品 0.050 0 g,二氢辣椒碱
0.020 0 g 于 50 mL 量瓶中,加甲醇溶解并稀释至刻
度,得辣椒碱对照品溶液 1 mg/mL、二氢辣椒碱对
照品溶液 0.4 mg/mL。

收稿日期:2011-02-29
基金项目:创新中药中试放大研究技术平台(2009ZX09313-032)
作者简介:安士影(1983—),女,黑龙江人,硕士。Tel: 18914772204 E-mail: anshiying@126.com
*通讯作者 萧 伟 E-mail: wzhzh-nj@tom.com
中草药 Chinese Traditional and Herbal Drugs 第 42 卷 第 11 期 2011 年 11 月

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2.2 供试品溶液的制备
取本品粗粉 0.5 g,精密称定,置具塞锥形瓶中,
精密加入甲醇-四氢呋喃(1∶1)25 mL,称定质量,
超声处理 30 min,放冷,再称定质量,甲醇-四氢呋
喃(1∶1)补足减失的质量,摇匀,滤过,取续滤
液,即得[5]。
2.3 色谱条件
Kromasil ODS 色谱柱(250 mm×4.6 mm,5
μm),流动相为甲醇-水(50∶50);体积流量 1.0
mL/min;检测波长 280 nm;柱温 40 ℃[5]。分别取
对照品溶液和供试品溶液各 10 μL 注入色谱仪,按
上述色谱条件,记录色谱图(图 1)。理论塔板数以
辣椒碱峰计算应不低于 3 000。


1-辣椒碱 2-二氢辣椒碱
1- capsaicin 2- dihydrocapsaicin
图 1 辣椒碱及二氢辣椒碱对照品(A)和辣椒
供试品(B)的 HPLC 图
Fig. 1 HPLC chromatograms of capsaicin and
dihydrocapsaicin refetence substances (A)
and C. annuum sample (B)
2.4 线性关系考察
精密吸取 0.1、0.5、1.0、2.0、3.0、4.0 mL 的
对照品贮备液,分别置于 10 mL 量瓶中,用甲醇稀
释,得辣椒碱为 10、50、100、200、300、400 μg/mL,
二氢辣椒碱为 4、20、40、80、120、160 μg/mL 的
对照品溶液。吸取上述不同质量浓度的对照品溶液
各 10 μL,分别进样测定,以峰面积(Y)为纵坐标,
以对照品进样量(μg)为横坐标(X)绘制标准曲
线,得辣椒碱回归方程为 Y=589.44 X-0.342 8,r=
0.999 9,线性范围 0.100~4.000 μg;二氢辣椒碱的
回归方程 Y=544.2 X+2.266 8,r=0.999 9,线性范
围 0.040 0~1.600 0 μg。
2.5 精密度试验
取 50 μg/mL 辣椒碱、20 μg/mL 二氢辣椒碱的
对照品溶液各 10 μL,连续测定 5 次,记录峰面积
并计算,辣椒碱峰面积 RSD 为 0.38%,二氢辣椒碱
峰面积 RSD 为 0.78%。
2.6 稳定性试验
取云南砚山县 1 号药材供试品溶液在 0、2、4、
8、12 h 分别进样 10 μL,记录峰面积,辣椒碱峰面
积的 RSD 为 0.67%,二氢辣椒碱峰面积的 RSD 为
0.29%,表明供试品溶液在 12 h 内稳定。
2.7 重现性试验
取同一样品(云南砚山县 1 号药材)6 份,按供
试品溶液制备方法提取、测定,结果辣椒碱为 5.890
mg/g,RSD 为 0.13%,二氢辣椒碱为 3.009 mg/g,
RSD 为 0.65%。
2.8 加样回收率试验
精密称取已测定样品(云南砚山县 1 号药材)
约 0.6 g,共 9 份,精密加入辣椒碱为 1.0 mg/mL、
二氢辣椒碱为 0.4 mg/mL 的对照品溶液 2.8、3.5、
4.2 mL,制备供试品溶液,在上述色谱条件下进样
10 μL 进行分析,重复 3 次,辣椒碱平均回收率为
100.17%,RSD 为 1.17%;二氢辣椒碱平均回收率
为 99.73%,RSD 为 0.63%。
2.9 样品测定
取不同产地的辣椒样品,按照“2.2”项方法制
备供试品溶液,取供试品溶液各 10 μL,注入高效
液相色谱仪,测定,计算辣椒碱与二氢辣椒碱的量,
结果见表 1。
3 辣椒红色素的测定
3.1 供试品溶液的制备
取本品粗粉约 20.0 g,精密称定,置 500 mL
圆底烧瓶中,加入 10 倍量丙酮,60 ℃热回流提
取 2.0 h,滤过,残渣按上法再提 1 次,合并滤液,
回收溶剂,干燥,得辣椒红色素。精密称定 0.100 0 g
辣椒红色素于 100 mL 量瓶中,丙酮溶解并稀释
至刻度,摇匀后精密移取 10 mL 于 100 mL 量瓶
中,丙酮定容,摇匀,作为辣椒红色素供试品溶
4 6 8 10 12
A
1
2

B
2.5 5.0 7.5 10.0 12.5 15.0 17.5 20.0
t / min
中草药 Chinese Traditional and Herbal Drugs 第 42 卷 第 11 期 2011 年 11 月

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液,备用[6]。
3.2 色价的测定
取不同产地辣椒样品,按照“3.1”项方法
制备供试品溶液,辣椒红色素色价测定方法参见
GB 10783-2008《食品添加剂 辣椒红》[6],用分光光
度计在 460 nm 波长处,丙酮作参比液,于 1 cm 比
色皿中测定其吸光度,计算辣椒红色素的色价,结
果见表 1。
表 1 不同产地辣椒中辣椒碱、二氢辣椒碱、辣椒红色素的量
Table 1 Determination of capsaicin, dihydrocapsaicin, and capsanthin in C. annuum from various habitats
序号 产 地 辣椒碱/% 二氢辣椒碱/% 辣椒红色素色价
1 河北里县 0.200 0 0.104 5 125
2 山东武城县 0.251 8 0.127 8 82
3 安徽砀山县 0.320 2 0.165 8 55
4 河南清丰县 0.198 5 0.100 2 109
5 北京 0.205 4 0.098 1 94
6 辽宁沈阳 0.224 9 0.119 2 67
7 江西樟树 0.629 0 0.304 5 17
8 江西九江 0.516 3 0.263 1 18
9 江西余干县 0.591 3 0.304 6 20
10 广西桂林 0.560 9 0.281 6 21
11 广东平远县 0.421 9 0.223 9 36
12 湖南龙山县 0.385 1 0.201 8 38
13 四川威远县 0.391 8 0.190 2 28
14 云南丘北县 0.544 9 0.289 1 27
15 云南砚山县 1 号 0.586 8 0.301 5 25
16 云南砚山县 2 号 0.403 5 0.198 3 41
17 云南砚山县 3 号 0.464 1 0.236 9 44
18 云南砚山县 4 号 0.380 5 0.195 4 69
19 甘肃兰州市 0.451 6 0.226 5 25
20 新疆鄢吉 0.381 4 0.205 8 51
21 湖北十堰市 0.406 3 0.194 3 38
22 内蒙古开鲁县 0.261 9 0.116 4 54
23 江苏南京市 0.361 4 0.198 2 16
24 山西太谷县 0.312 8 0.145 2 67

4 讨论
本研究结果表明,江西、云南等产区的辣椒中辣
椒碱、二氢辣椒碱量较高,最高分别可达到 0.629 0%
和 0.304 6%;而河南、河北、安徽、北京等长江以
北地区的辣椒碱、二氢辣椒碱量偏低,最低分别为
0.198 5%和 0.098 1%;不同产地辣椒中红色素色价
相差也较大,其中以河南、河北等长江以北的辣椒
中红色素色价较高,长江以南的辣椒中红色素色价
普遍偏低。
本研究表明不同产地辣椒中辣椒碱和红色素
的量差异较大,环境温度可能是其中一个影响因
素。长江以南地区气温较高,辣椒碱量较高,而红
色素量较低;长江以北地区气温较低,红色素量较
高,而辣椒碱量较低。但影响辣椒中辣椒碱和红色
素量差异的真正原因还有待深入系统研究。
本研究将为辣椒碱和辣椒红色素生产企业原料选
择提供一定参考,亦可为辣椒的临床使用提供指导。
参考文献
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附 3-附 4.
[2] 朱一亮, 谢强敏, 陈季强, 等. 甘草黄酮对辣椒素诱导
豚鼠咳嗽反射的抑制作用 [J]. 中草药, 2006, 37(7):
1048-1051.
[3] 胥秀英, 郑一敏, 傅善权, 等. 不同产地辣椒中辣椒素
含量测定研究 [J]. 食品工业科技, 2007(128): 11.
[4] 李 坚, 龙晓英, 孙 娟, 等. HPLC 法测定不同品种
辣椒药材中辣椒碱的含量 [J]. 中药新药与临床药理,
2006, 17(3): 202-205.
[5] 中国药典 [S]. 一部. 2010.
[6] 食品添加剂辣椒红 [S]. GB 10783-2008, 2008.