全 文 ：石柱参中８种人参皂苷的含量测定
高俊杰１，翟延君１，王荣祥１，王谷强２，王冰１，张慧１
（１辽宁中医药大学，辽宁 大连 １１６６００；
２宽甸县石柱野山参发展有限公司，辽宁 丹东 １１８０００）
［摘要］ 目的：测定石柱参中８种人参皂苷Ｒｇ１，Ｒｅ，Ｒｆ，Ｒｇ２，Ｒｂ１，Ｒｃ，Ｒｂ３，Ｒｄ的含量，并建立同时测定８种人参皂苷含量
的方法。方法：采用ＨＰＬＣＡｇｉｌｅｎｔＴＣＣ１８色谱柱（４６ｍｍ ×１５０ｍｍ，５μｍ），流动相乙腈００５％磷酸水，梯度洗脱，体积流量
１ｍＬ·ｍｉｎ－１，柱温３０℃，检测波长２０３ｎｍ。结果：８种人参皂苷 Ｒｇ１，Ｒｅ，Ｒｆ，Ｒｇ２，Ｒｂ１，Ｒｃ，Ｒｂ３，Ｒｄ质量分数分别为１３２，
２０８，０７２，０２４，２１２，１０６，０３５，０５５ｍｇ·ｇ－１。结论：首次对石柱参药材中的人参皂苷进行了含量测定，所建立的方法分离
度高，方法学验证符合要求，可作为参类药材同时测定８种人参皂苷含量的方法。
［关键词］ 石柱参；人参皂苷；ＨＰＬＣ；含量测定
［收稿日期］ ２００９１０１０
［通信作者］ 翟延君，Ｔｅｌ：１３０１９４９９３８６，Ｅｍａｉｌ：ｌｎｚｙｚｙｊ＠ｓｏｈｕｃｏｍ
［作者简介］ 高俊杰，硕士，主要从事中药鉴定与质量评价研究，
Ｔｅｌ：１３８８９５９３８９５，Ｅｍａｉｌ：ｍｎ８ｅ＠１６３ｃｏｍ
石柱参为人参野生变家种的优良品种，来源于
五加科植物人参 ＰａｎａｘｇｉｎｓｅｎｇＣＡＭｅｙ的干燥
根，产于辽宁省丹东市宽甸县振江乡石柱子村。药
用历史悠久，距今已有３００多年的栽培历史［１］。石
柱参的参池建在３０°以上山坡上，坡度较陡，虽为栽
培，但在管理上不施肥，不打药，与野山参生长环境
相近。本品的性状特点为芦头细长，个小体灵，皮老
纹深，须长而清晰，其上有珍珠疙瘩，酷似野山参。
石柱参作为人参的独特栽培品种，迄今未见有关其
含量测定的报道。本实验采用ＨＰＬＣ对人参药理活
性较强的 ８种人参皂苷 Ｒｇ１，Ｒｅ，Ｒｆ，Ｒｇ２，Ｒｂ１，Ｒｃ，
Ｒｂ３，Ｒｄ进行了含量测定研究
［２３］，建立了同时测定
８种人参皂苷的含量测定方法，为石柱参的进一步
研究和质量评价提供科学参考。
１ 材料
高效液相色谱仪（Ａｇｉｌｅｎｔ１１００型，安捷伦公
司）；紫外检测器（Ｇ２１７０ＢＡ型，安捷伦科技）；ＫＴ
２３０Ａ型柱温箱（泰兴市艾谱化工设备有限公司）；
超声波清洗器（ＫＨ３００Ｂ型，昆山禾创超声仪器有
限公司）；分析天平（ＣＰ２２５Ｄ型，北京赛多利斯仪器
系统有限公司）。
人参皂苷 Ｒｇ１（批号１１０７０３２００７０３），Ｒｆ（批号
１１７１９２００７０３）对照品购于中国药品生物制品检定
所，人参皂苷 Ｒｅ，Ｒｂ１，Ｒｄ，Ｒｃ，Ｒｇ２，Ｒｂ３对照品购于
北京慧德易科技有限公司（峰面积归一化法测定，
纯度≥９８％）；乙腈和甲醇为色谱纯，其他试剂均为
市售分析纯，水为高纯水；石柱参采自辽宁省丹东市
宽甸县振江乡石柱子村，经辽宁中医药大学中药鉴
定教研室翟延君教授鉴定为五加科植物人参
Ｐｇｉｎｓｅｎｇ的干燥根。
２ 方法与结果
２１ 色谱条件 ＡｇｉｌｅｎｔＴＣＣ１８色谱柱（４６ｍｍ ×
１５０ｍｍ，５μｍ）；流动相 乙腈（Ａ）００５％磷酸水
（Ｂ），梯度洗脱：０～１０ｍｉｎ，０％ ～２１％Ａ；１０～２２
ｍｉｎ，２１％～２３％Ａ；２２～３２ｍｉｎ，２３％ ～３１％Ａ；３２～
４０ｍｉｎ，３１％ ～３３％Ａ；４０～４６ｍｉｎ，３３％ ～３０％Ａ；
４６～５２ｍｉｎ，３０％～３５％Ａ；５２～５５ｍｉｎ，３５％ ～３７％
Ａ；５５～６０ｍｉｎ，３７％ ～４０％Ａ；体积流量 １ｍＬ·
ｍｉｎ－１；柱温３０℃，检测波长２０３ｎｍ，理论塔板数按
Ｒｇ１峰计算不低于６０００，进样量１５μＬ。
２２ 对照品溶液的制备 精密称取人参皂苷各对
照品适量，加甲醇配制成每 １ｍＬ含 Ｒｇ１，Ｒｅ，Ｒｆ，
Ｒｇ２，Ｒｂ１，Ｒｃ，Ｒｂ３，Ｒｄ分别为 １０１０，０６０９，０５０４，
０１３８，１０３２，０５１２，０２３５，０１６１ｍｇ的溶液，作为
对照品溶液储备液，分别取上述对照品 Ｒｇ１，Ｒｆ，
Ｒｇ２，Ｒｂ３储备液１ｍＬ，对照品 Ｒｅ，Ｒｂ１，Ｒｃ，Ｒｄ储备
液２ｍＬ，置５ｍＬ量瓶中，作为对照品溶液，密封置４
℃冰箱保存。
２３ 供试品溶液的制备 取本品粉末（过４号筛）
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约１ｇ，精密称定，置索氏提取器中，加三氯甲烷适量
加热回流３ｈ，药渣挥干溶剂，连同滤纸筒移入１００
ｍＬ锥形瓶中，精密加入水饱和正丁醇５０ｍＬ，密塞，
放置过夜，超声提取３０ｍｉｎ，滤过，精密量取续滤液
２５ｍＬ，置蒸发皿中蒸干，残渣加甲醇溶解并转移至
５ｍＬ量瓶中，加甲醇至刻度，摇匀，滤过，即得。
２４ 线性关系考察 分别精密吸取各对照品储备
液，以１，５，１０，１５，２０μＬ按上述色谱条件连续进样，
测得峰面积积分值。以进样量（μｇ）为横坐标（Ｘ），
色谱峰面积为纵坐标（Ｙ），进行线性回归。结果表
明，各组分在各自浓度范围内线性关系良好，线性方
程、线性范围及相关系数见表１。
表１ ８种人参皂苷的线性范围和线性关系
对照品 线性方程 线性范围／μｇ ｒ
Ｒｇ１ Ｙ＝４１５８８Ｘ－１１３８００ １０１０～２００２０ ０９９９９
Ｒｅ Ｙ＝３５１７１Ｘ－７７１４８ ０６０９～１２１８０ ０９９９８
Ｒｆ Ｙ＝３６１３１Ｘ＋６７０００ ０５０４～１００８０ ０９９９８
Ｒｇ２ Ｙ＝３９７０２Ｘ－７２００ ０１３８～２７５２ ０９９９９
Ｒｂ１ Ｙ＝２７７２６Ｘ＋６６９００ １０３２～２０６４０ ０９９９８
Ｒｃ Ｙ＝３１７４４Ｘ－１７６８０ ０５１２～１０２４０ ０９９９８
Ｒｂ３ Ｙ＝２５７４０Ｘ＋３９６９ ０２３５～４７００ ０９９９７
Ｒｄ Ｙ＝３４８１７Ｘ－２３９３８ ０１６１～３２２４ ０９９９９
２５ 精密度试验 精密吸取样品溶液１５μＬ，连续
重复进样５次，记录峰面积，测得 Ｒｇ１，Ｒｅ，Ｒｆ，Ｒｇ２，
Ｒｂ１，Ｒｃ，Ｒｂ３，Ｒｄ含量的 ＲＳＤ分别为 ０３６％，
０２６％，０５２％，１２％，０３２％，０９６％，１０％，
０９９％，仪器精密度良好。
２６ 重复性试验 取同一份样品，平行制备５份供
试品溶液，分别进样１５μＬ，测定上述８种人参皂苷
含量并计算 ＲＳＤ分别为 １５％，２１％，１３％，
１２％，１６％，１９％，１２％，１８％，表明该方法重复
性好。
２７ 稳定性试验 取同一份供试品溶液，分别在
０，２，４，８，１２，２０，２４ｈ测定８种人参皂苷的峰面积。
结果显示 ８种人参皂苷 Ｒｇ１，Ｒｅ，Ｒｆ，Ｒｇ２，Ｒｂ１，Ｒｃ，
Ｒｂ３，Ｒｄ峰面积的ＲＳＤ均小于２％，表明供试品溶液
在２４ｈ内稳定。
２８ 回收率试验 取石柱参药材６份，每份约０５
ｇ，精密称定，每份精密加入人参皂苷混合对照品溶
液１ｍＬ（其中含人参皂苷Ｒｇ１，Ｒｅ，Ｒｆ，Ｒｇ２，Ｒｂ１，Ｒｃ，
Ｒｂ３，Ｒｄ分别为０６５５，１０５６，０４０８，０１１９，１０７８，
０５２８，０２０２，０３０６ｍｇ）制备供试品溶液，分别进样
１５μＬ，注入液相色谱仪，测定并计算加样回收率和
ＲＳＤ，８种人参皂苷 Ｒｇ１，Ｒｅ，Ｒｆ，Ｒｇ２，Ｒｂ１，Ｒｃ，Ｒｂ３，
Ｒｄ的平均回收率和 ＲＳＤ（ｎ＝６）分别 ９８５４％
（１５％），９８２８％ （０９８％），９９１４％ （２２％），
９８５１％ （１２％），１００１３％ （１７％），９８１５％
（０８０％），９８７６％（１０％），９８９５％（２２％）。
２９ 样品含量测定 按２３项下方法制备供试品
溶液，在上述色谱条件下，进样量 ｌ５μＬ，测得峰面
积，根据标准曲线计算样品中８种人参皂苷的含量，
结果８种人参皂苷 Ｒｇ１，Ｒｅ，Ｒｆ，Ｒｇ２，Ｒｂ１，Ｒｃ，Ｒｂ３，
Ｒｄ质量分数分别为 １３２，２０８，０７２，０２４，２１２，
１０６，０３５，０５５ｍｇ·ｇ－１，见图１。
１Ｒｇｌ；２Ｒｅ；３Ｒｆ；４Ｒｇ２；５Ｒｂｌ；６Ｒｃ；７Ｒｂ３；８Ｒｄ。
图１ 混合对照品（Ａ）、石柱参（Ｂ）ＨＰＬＣ图
３ 讨论
本研究首次采用ＨＰＬＣ法对石柱参所含的８种
人参皂苷 Ｒｇ１，Ｒｅ，Ｒｆ，Ｒｇ２，Ｒｂ１，Ｒｃ，Ｒｂ３，Ｒｄ进行了
含量测定，建立了同时测定８种人参皂苷的含量测
定方法。该方法稳定可靠，简单易行，快速准确，可
为石柱参的质量分析方法提供参考，同时也可用于
参类药材各人参皂苷的定量分析。
实验中发现以甲醇为溶媒进行提取，人参皂苷
的含量较高，但同时提取的杂质也多，必须经纯化处
理，处理后皂苷含量不仅有损失，与药典方法测定的
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含量结果相近；而且还因杂质多导致部分色谱峰的
分离度不合格，不能同时测定８种人参皂苷的含量。
故本研究仍采用药典法制备供试品溶液，结果各色
谱峰均达到了良好的分离效果。
２００５年版《中国药典》中人参含量测定项下的
流动相为乙腈和水，本实验将水相改为００５％磷酸
水后，基线稳定，样品峰对称性高，分离度好。
目前报道的有关同时测定多种人参皂苷含量所
使用的色谱柱，大都是长度２５０ｍｍ，粒径５μｍ或长
度１００ｍｍ，粒径３５μｍ。本研究首次使用长度１５０
ｍｍ，粒径５μｍ的ＡｇｉｌｅｎｔＴＣＣ１８色谱柱，石柱参的
色谱峰依然达到了良好的分离效果，且分析时间较
短，又同时测定了８种人参皂苷的含量。
迄今尚未发现有关石柱参含量测定的研究报
道，实验结果可以看出石柱参中 Ｒｂ１，Ｒｅ的含量偏
高，对石柱参不同生长年限、不同采收期中各人参皂
苷的含量变化有待进一步研究。
［参考文献］
［１］ 王荣祥，赵建东，许亮．石柱参的历史考证 ［Ｊ］．辽宁中医学院
学报，２００５，７（３）：２６９．
［２］ 张萍，王金东，肖新月，等．人参化学成分分析方法的研究进展
［Ｊ］．中草药，２００４，３５（１２）：１４２９
［３］ 张萍，张南平，肖新月，等．人参皂苷类成分的化学分析 ［Ｊ］．
药物分析杂志，２００４，２４（３）：２２９．
ＤｅｔｅｒｍｉｎａｔｉｏｎｏｆｅｉｇｈｔｋｉｎｄｓｏｆｇｉｎｓｅｎｏｓｉｄｅｓｉｎＳｈｉｚｈｕｇｉｎｓｅｎｇ
ＧＡＯＪｕｎｊｉｅ１，ＺＨＡＩＹａｎｊｕｎ１，ＷＡＮＧＲｏｎｇｘｉａｎｇ１，ＷＡＮＧＧｕｑｉａｎｇ２，ＷＡＮＧＢｉｎｇ１，ＺＨＡＮＧＨｕｉ１
（１ＬｉａｏｎｉｎｇＵｎｉｖｅｒｓｉｔｙｏｆＴｒａｄｉｔｉｏｎａｌＣｈｉｎｅｓｅＭｅｄｉｃｉｎｅ，Ｄａｌｉａｎ１１６６００，Ｃｈｉｎａ；
２ＤａｎｄｏｎｇＣｉｔｙ，ＬｉａｏｎｉｎｇＰｒｏｖｉｎｃｅＳｈｉｚｈｕＷｉｌｄＫｕａｎｄｉａｎＣｏｕｎｔｙＤｅｖｅｌｏｐｍｅｎｔＣｏ，Ｌｔｄ．，Ｄａｎｄｏｎｇ１１８０００，Ｃｈｉｎａ）
［Ａｂｓｔｒａｃｔ］ Ｏｂｊｅｃｔｉｖｅ：ＴｏｅｓｔａｂｌｉｓｈｔｈｅｍｅｔｈｏｄｆｏｒｄｅｔｅｒｍｉｎｉｎｇｓｉｍｕｌｔａｎｅｏｕｓｌｙｅｉｇｈｔｋｉｎｄｓｏｆｇｉｎｓｅｎｏｓｉｄｅＲｇ１，Ｒｅ，Ｒｆ，Ｒｇ２，
Ｒｂ１，Ｒｃ，Ｒｂ３ａｎｄＲｄａｎｄｔｈｅｉｒｃｏｎｔｅｎｔｓｉｎＳｈｉｚｈｕｇｉｎｓｅｎｇＭｅｔｈｏｄ：ＨＰＬＣｗａｓｃａｒｉｅｄｏｕｔｏｎＡｇｉｌｅｎｔＴＣＣ１８（４６ｍｍ×１５０ｍｍ，５
μｍ）ｗｉｔｈａｃｅｔｏｎｉｔｒｉｌｅ００５％ ｐｈｏｓｐｈｏｒｉｃａｃｉｄ，ｇｒａｄｉｅｎｔｅｌｕｔｉｏｎ，ｔｈｅｖｏｌｕｍｅｏｆｆｌｏｗ１ｍＬ·ｍｉｎ－１，ｃｏｌｕｍｎｔｅｍｐｅｒａｔｕｒｅ３０℃ ａｎｄｄｅ
ｔｅｃｔｉｏｎｗａｖｅｌｅｎｇｔｈ２０３ｎｍＲｅｓｕｌｔ：ＴｈｅｃｏｎｔｅｎｔｓｏｆｅｉｇｈｔｋｉｎｄｓｏｆｇｉｎｓｅｎｏｓｉｄｅｓｉｎＳｈｉｚｈｕｇｉｎｓｅｎｇｗｅｒｅ１３２，２０８，０７２，０２４，
２１２，１０６，０３５，０５５ｍｇ·ｇ－１，ｒｅｓｐｅｃｔｉｖｅｌｙＣｏｎｃｌｕｓｉｏｎ：ＴｈｅｃｏｎｔｅｎｔｓｏｆｇｉｎｓｅｎｏｓｉｄｅｉｎｇｒｅｄｉｅｎｔｓｉｎＳｈｉｚｈｕｇｉｎｓｅｎｇｗｅｒｅｄｅｔｅｒ
ｍｉｎｅｄｉｎｔｈｅｆｉｒｓｔｔｉｍｅＴｈｅｅｓｔａｂｌｉｓｈｅｄｍｅｔｈｏｄｃａｎｂｅｕｓｅｄｉｎｄｅｔｅｒｍｉｎｉｎｇｔｈｅｃｏｎｔｅｎｔｓｏｆｍｕｌｔｉｐｌｅｇｅｎｓｅｎｏｓｉｄｅｓｉｎｈｅｒｂｇｉｎｓｅｎｇｓｉｍｕｌ
ｔａｎｅｏｕｓｌｙ
［Ｋｅｙｗｏｒｄｓ］ Ｓｈｉｚｈｕｇｉｎｓｅｎｇ；ｇｉｎｓｅｎｏｓｉｄｅｓ；ＨＰＬＣ；ｄｅｔｅｒｍｉｎａｔｉｏｎ
ｄｏｉ：１０．４２６８／ｃｊｃｍｍ２０１００８１０
［责任编辑 周驰］
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