全 文 ：毛菊苣药材不同部位主要活性成分含量
再娜布·吐合达洪１，仲婕２，信学雷２，阿吉艾克拜尔·艾萨２
１．新疆医科大学 药学院，新疆 乌鲁木齐８３００５４；
２．中国科学院 新疆理化技术研究所，新疆 乌鲁木齐 ８３０００１）
［摘要］ 目的：比较毛菊苣 根、茎、种子３个部位中绿原酸、秦皮乙素、山莴苣素和山莴苣苦素的含量。方法：Ｉｎｅｒｔｓｉｌ
ＯＤＳＳＰ色谱柱（４６ｍｍ×２５０ｍｍ，５μｍ），流速１０ｍＬ· ｍｉｎ－１，柱温３２℃，流动相甲醇０２％甲酸，０～４０ｍｉｎ，３０％～７０％
甲醇梯度洗脱，进样量５μＬ；检测波长分别为２５６，３５０，２９９和２２９ｎｍ。结果：绿原酸、秦皮乙素、山莴苣素和山莴苣苦素的回
收率分别为 ９８２％，９９５７％，１００５０％和 ９９４６％，线性范围分别为 ０９７～９７２（ｒ＝１０００），２２～８８０（ｒ＝０９９８９），
２１０～２１００（ｒ＝０９９９８），和２６～５３３３ｍｇ·Ｌ－１（ｒ＝１０００），ＲＳＤ分别为１６％，１５％，０７７％，２０％。毛菊苣根山莴苣
苦素和山莴苣素质量分数分别为０６７８９，０７５２０ｍｇ·ｇ－１，而种子里的分别为０２３９６，００５２０ｍｇ· ｇ－１，种子中秦皮乙素、
绿原酸的质量分数分别为００７１０，０１８９０ｍｇ· ｇ－１，而根中质量分数分别为０００４８，０００４３ｍｇ· ｇ－１。结论：本方法准确、
快速、简便、重复性好，为毛菊苣质量控制提供了依据。
［关键词］ 毛菊苣；绿原酸；秦皮乙素；山莴苣素；山莴苣苦素；含量比较；高效液相色谱法
［收稿日期］ ２００９０９１３
［基金项目］ 国家科技支撑计划项目（２００６ＢＡＩ０６Ａ１７０９）；新疆少
数民族医药现代化基金项目（２００７３３１４６４）；中国科学院知识创新工
程重要方向项目（ＫＳＣＸ２ＹＷＲ１３２）
［通信作者］ 阿吉艾克拜尔·艾萨，研究员，主要从事天然产物研
究，Ｔｅｌ：（０９９１）３８３５６７９，Ｅｍａｉｌ：ｈａｊｉ＠ ｍｓｘｊｂａｃｃｎ
毛菊苣 ＣｉｃｈｏｒｉｕｍｇｌａｎｄｕｌｏｓｕｍＢｏｉｓｓｅｔＨｕｅｔ为
菊科菊苣属一年生草本植物，在中国新疆及周边国
家广泛分布［１］，系我国维吾尔医常用药材，全草入
药，味苦、性寒，具有清肝利胆、健胃消食、利尿消肿
功效；用于湿热黄疸、胃痛食少、水肿尿少及肝炎、
肾炎、肠炎、气管炎等疾病［２］。
研究发现毛菊苣里含有的黄酮、倍半萜、香
豆素、糖等活性成分［３］，具有很强的生物活性和
药用价值，其中秦皮乙素等香豆素类成分，山莴
苣苦素，山莴苣素等主要倍半萜类成分具有保肝
作用、抗肿瘤、抗拒食、抗菌抗疟、抗病毒等作
用［４］。这些物质在药材中含量高，专属性强，有
很高的活性，因此，制备这些成分的标准品对于
该植物制剂的开发研究具有指导意义。本文对
毛菊苣全草，建立绿原酸、秦皮乙素、山莴苣素和
山莴苣苦素同步分析的高效液相色谱（ＨＰＬＣ）方
法，比较了毛菊苣 ３种部位 ４种成分含量的差
异，并对其方法学进行了验证，为以这些化合物
为基础的药物开发及质量标准研究提供基础。
１ 仪器和试药
戴安高效液相色谱仪，包括 Ｐ６８０泵系统，
ＵＶＤ１７０Ｕ紫外检测器（４波长紫外检测器），ＡＳＩ
１００自动进样器和 ＴＣＣ１００柱温箱（Ｄｉｏｎｅｘ，ＣＡＬ
ＵＳＡ）；ＩｎｅｒｔｓｉｌＯＤＳＳＰ色谱柱，（４６ｍｍ×２５０ｍｍ，
５μｍ，ＧＬＳｃｉｅｎｃｅｓ，Ｔｏｋｙｏ，Ｊａｐａｎ）；旋转蒸发仪
（Ｂｕｃｈ，ＳＨＺＤ）；电子天平 （ＳＥＪ１８０４）；超声波清
洗器（ＫＱ２５０Ｂ）。
毛菊苣药材２００７年１０月购买于新疆吉木萨
尔县，由中国科学院新疆生态与地理研究所张立
运研究员鉴定，标本（标本号０５１０５４，０５１０５５）保
存于中国科学院新疆理化技术研究所；秦皮乙素
（七叶内酯，批号１１０７４１２００５０６，中国药品生物
制品检定所）；绿原酸（批号 １１０７５３２００４１３，中
国药品生物制品检定所）；山莴苣苦素、山窝苣素
对照品（自制，ＨＰＬＣ法检测纯度 ９８％，；已通过
ＵＶ，ＩＲ，ＭＳ，１ＨＮＭＲ和１３ＣＮＭＲ波谱鉴定确定
其结构）；甲醇、乙腈为色谱纯；水为双蒸水；其余
试剂为分析纯。
２ 方法与结果
２１ 色谱条件
ＩｎｅｒｔｓｉｌＯＤＳＳＰ色谱柱（４６ｍｍ×２５０ｍｍ，５
μｍ），流速１０ｍＬ· ｍｉｎ－１，柱温３２℃，流动相甲
醇０２％甲酸，０～４０ｍｉｎ，３０％ ～７０％甲醇梯度洗
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脱；进样量５μＬ；检测波长分别为 ２５６，３５０，２９９，
２２９ｎｍ；山莴苣苦素，山莴苣素在２５６ｎｍ下读取，秦
皮乙素，绿原酸在３５０ｎｍ下读取。目标峰与相邻峰
的分离度见表１，理论塔板数均不小于３０００，色谱
图见图１。
表１ 绿原酸、秦皮乙素、山莴苣素、
山莴苣苦素色谱适用性参数
成分 ｔＲ／ｍｉｎ 分离度 理论塔板数 拖尾因子
绿原酸 ６．３００ １．３９ ４５６４ １．０８
秦皮乙素 ７．３７３ １．２５ ９１０９ ０．９６
山莴苣素 ７．９００ １．８８ １２３７３ １．０５
莴苣苦素 ２２．４６７ ３．７１ ５８９３０ １．０５
Ａ对照品（２５６ｎｍ）；Ｂ对照品（３５０ｎｍ）；Ｃ样品（２５６ｎｍ）；
ａ绿原酸；ｂ秦皮乙素；ｃ山莴苣素；ｄ山莴苣苦素。
图１ 毛菊苣中４种成分测定ＨＰＬＣ图
２２ 对照品溶液的制备 精密称取各对照品适量，
加甲醇溶解，分别制成含绿原酸９７２ｍｇ·Ｌ－１、秦
皮乙素８８ｍｇ·Ｌ－１、山莴苣素２１０ｍｇ·Ｌ－１和山莴
苣苦素５３３ｍｇ·Ｌ－１的贮备液。
２３ 供试品溶液的制备 分别取毛菊苣根和茎，粉
碎，过筛 （６０目），各取约５ｇ，精密称定，加１００ｍＬ
甲醇，回流提取２ｈ，过滤，用甲醇适量洗涤药材残
渣，合并滤液与洗液，减压蒸干，残渣用加甲醇溶解，
定容至１０ｍＬ，作为根和茎测定用供试品溶液。另
取毛菊苣种子，粉碎，取约５ｇ，精密称定，加１００ｍＬ
甲醇，称重，超声提取０５ｈ，擦干瓶底，用甲醇补足
减失的质量，作为种子测定供试品溶液。
２４ 线性关系考察 分别精密吸取２２项下的绿
原酸贮备液，用甲醇稀释成 ０９７２，１６２，３２４，
４８６，６４８，９７２，９７２ｍｇ·Ｌ－１的对照品溶液，分别
进样５μＬ。分别精密吸取的秦皮乙素贮备液，用甲
醇稀释成２２，４４，２２，４４，８８ｍｇ·Ｌ－１的对照品溶
液，分别进样 ５μＬ。分别精密吸取山莴苣素贮备
液，用甲醇稀释成２１，３５，７０，１４０，１７５，２１０ｍｇ·Ｌ－１
对照品溶液，分别进样５μＬ。分别精密吸取山窝苣
苦素贮备液，用甲醇稀释成 ２６７，２６６７，５３３，８０，
１０６７，１３３７，２６６７，５３３３ｍｇ·Ｌ－１对照品溶液，分
别进样５μＬ。以对照品溶液的浓度为横坐标，峰面
积为纵坐标，计算线性回归，见表２。
２５ 精密度试验 分别精密吸取５μＬ供试品溶
液，连续进样６次，以相应色谱条件测定。绿原酸、
秦皮乙素、山莴苣素和山窝苣苦素的峰面积的 ＲＳＤ
均小于２０％。
２６ 重复性试验 取同一批样品，照２３项下方
法，平行制备６份供试品溶液，分别进样测定，测得
绿原酸、秦皮乙素、山莴苣素和山莴苣苦素含量
ＲＳＤ均小于３０％。
表２ ４种被测成分线性关系考察
成分 回归方程 ｒ 线性范围／ｍｇ·Ｌ－１ 检测限／ｎｇ
绿原酸 Ｙ＝０６０３Ｘ－０２８２６ １０００ ０９７～９７２ １６２
秦皮乙素 Ｙ＝０２７６７Ｘ－０４１８５ ０９９８９ ２２～８８０ １５５
山莴苣素 Ｙ＝０１４３１Ｘ－１４２１４ ０９９９８ ２１０～２１００ １００
山莴苣苦素 Ｙ＝００８４２Ｘ－０２４１２ １０００ ２６～５３３３ １４３
２７ 稳定性试验 将对照品溶液在室温下贮存，分
别与０，２，４，６，８，１２，２４ｈ测定，结果绿原酸、秦皮乙
素、山莴苣素和山莴苣苦素含量在２４ｈ内ＲＳＤ均小
于２０％。
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２８ 加样回收率试验 取毛菊苣根２５ｇ，共６份，
置圆底烧瓶中，各精密加入 ９７２ｍｇ·Ｌ－１绿原酸
１０ｍＬ，８８ｍｇ·Ｌ－１秦皮乙素 １２ｍＬ，２１０ｍｇ·
Ｌ－１山莴苣素８ｍＬ和５３３ｍｇ·Ｌ－１山莴苣苦素３５
ｍＬ，按照２２项下制备方法制备，２１项下方法测
定，结果见表３。
表３ ４种被测成分的加样回收率 （ｎ＝６）
成分 称样量／ｇ 样品中量／ｍｇ 加入量／ｍｇ 测得量／ｍｇ 平均回收率／％ ＲＳＤ／％
绿原酸 ２．４２９１ ０．０１０４ ０．００９７ ０．０２０ ９８．２０ １．９
秦皮乙素 ２．４３０９ ０．０１１７ ０．０１０６ ０．０２２ ９９．５７ ２．１
山莴苣素 ２．４８５３ １．６８７３ １．６８００ ３．３７５７ １００．５ ２．０
山莴苣苦素 ２．４３０９ １．８２８０ １．８６５５ ３．６８３５ ９９．４６ １．６
２９ 样品的测定 分别精密吸取对照品溶液和供
试品溶液各５μＬ，按２１项下色谱条件测定，得样
品色谱图，并记录绿原酸、秦皮乙素、山莴苣素、山莴
苣苦素的峰面积，按外标法计算样品中对应化合物
的含量，结果见图１和表４。
表４ 毛菊苣药材中４个指标成分的质量分数
ｍｇ·ｇ－１
样品 绿原酸 秦皮乙素 山莴苣素 山莴苣苦素
毛菊苣根 ０．００４３ ０．００４８ ０．６７８９ ０．７５２０
毛菊苣茎 ０．００６９ ０．００７２ ０．０５１９ ０．０１９５
毛菊苣种子 ０．１８９０ ０．０７１０ ０．２３９６ ０．０５２０
毛菊苣种子 － ０．１４６６１） － －
注：样品皆为甲醇回流提取，１）为超声提取。
３ 讨论
本文采用高效液相色谱方法，比较了毛菊苣根、
茎、种子部位４种成分含量的差异，结果发现，山莴
苣苦素和山莴苣素在根中含量较高，而种子中秦皮
乙素和绿原酸的含量较高。
绿原酸在３２６ｎｍ有最大吸收峰；山莴苣素和山
莴苣苦素的最大吸收在２５６ｎｍ处；在紫外分光光度
计上，于２００～５００ｎｍ扫描，秦皮乙素在３５０，２２９，
２９９，２５７ｎｍ有吸收峰，其中在３５０ｎｍ的吸收值比
２５７ｎｍ的吸收值高２２倍，故本文选择２个波长分
别读取２组化合物，即绿原酸和秦皮乙素在３５０ｎｍ
下读取，山莴苣素和山莴苣苦素在２５６ｎｍ下读取，
操作方法简便、快捷，测定误差小，可以在普通双波
长检测器的高效液相色谱仪上完成上述操作。
供试品溶液的制备采用热回流和超声提取
方法，经比较发现热回流提取方法适合根和茎，
提取物中山莴苣苦素和山莴苣素等倍半萜成分
的含量较高；而针对种子，用热回流提取方法得
到的秦皮乙素的含量较超声提取方法明显降低，
这可能与种子的物态性质以及秦皮乙素易挥发
的性质有关［６］。另外，根和茎热回流提取后，如
果再用醋酸乙酯萃取，所得的色谱图清晰，得到
的谱图杂质少，分离效果好，主峰明显增高，但同
时发现，在醋酸乙酯萃取过程中，倍半萜类成分
有明显损失。
［参考文献］
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卫生出版社，１９９９：３６７
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Ｃｏｍｐａｒａｔｉｖｅｓｔｕｄｉｅｓｉｎｃｏｎｔｅｎｔｏｆｍａｊｏｒａｃｔｉｖｅｃｏｍｐｏｓｉｔｉｏｎｓｉｎｄｉｆｆｅｒｅｎｔ
ｐａｒｔｓｏｆＣｉｃｈｏｒｉｕｍｇｌａｎｄｕｌｏｓｕｍ
ＺＡＹＮＡＰＴｏｈｔａｈｏｎ１，ＺＨＯＮＧＪｉｅ２，ＸＩＮＸｕｅｌｅｉ２，ＨＡＪＩＡＫＢＥＲＡｉｓａ２
（１ＣｏｌｅｇｅｏｆＴｒａｄｉｔｉｏｎａｌＣｈｉｎｅｓｅＭｅｄｉｃａｌ，ＸｉｎｊｉａｎｇＭｅｄｉｃａｌＵｎｉｖｅｒｓｉｔｙ，Ｕｒｕｍｑｉ８３００５４，Ｃｈｉｎａ；
２ＸｉｎｊｉａｎｇＴｅｃｈｎｉｃａｌＩｎｓｔｉｔｕｔｅｏｆＰｈｙｓｗｓａｎｄＣｈｅｍｉｓｔｒｙ，ＣｈｉｎｅｓｅＡｃａｄｅｍｙｏｆＳｃｉｅｎｃｅｓ，Ｕｒｕｍｑｉ８３００１１，Ｃｈｉｎａ）
［Ａｂｓｔｒａｃｔ］ Ｏｂｊｅｃｔｉｖｅ：Ｔｈｅｆｏｕｒｍａｊｏｒａｃｔｉｖｅｃｏｍｐｏｓｉｔｉｏｎｓ，ｎａｍｅｌｙｅｓｃｕｌｅｔｉｎ，ｌａｃｔｕｃｉｎ，ｌａｃｔｕｃｏｐｉｃｒｉｎａｎｄｃｈｌｏｒｏｇｅｎｉｃａｃｉｄｉｎ
ｓｅｅｄ，ｓｔｅｍａｎｄｒｏｏｔｏｆｔｈｅＣｉｃｈｏｒｉｕｍｇｌａｎｄｕｌｏｓｕｍＢｏｉｓｓｅｔＨｕｅｔｔｈａｔｐｌａｎｔｅｄｉｎＸｉｎｊｉａｎｇｈａｖｅｂｅｅｎｑｕａｎｔｉｆｉｅｄｂｙＨＰＬＣＭｅｔｈｏｄ：
ＨＰＬＣｍｅｔｈｏｄｗａｓｕｓｅｄ，ｗｉｔｈＩｎｅｒｔｓｉｌＯＤＳＳＰｃｏｌｕｍｎ（４６ｍｍ×２５０ｍｍ，５μｍ）Ｔｈｅｆｌｏｗｒａｔｅｗａｓ１０ｍＬ·ｍｉｎ－１Ｔｈｅｃｏｌｕｍｎ
ｔｅｍｐｅｒａｔｕｒｅｗａｓｓｅｔａｔ３２℃Ｔｈｅｍｏｂｉｌｅｐｈａｓｅｗａｓｍｅｔｈａｎｏｌ０２％ ｆｏｒｍｉｃａｃｉｄ，０４０ｍｉｎ，ｍｅｔｈａｎｏｌ３０％７０％ ｇｒａｄｉｅｎｔｓＩｎｊｅｃｔｉｏｎ
ｖｏｌｕｍｅｗａｓ５μＬＴｈｅｄｅｔｅｃｔｉｎｇｗａｖｅｌｅｎｇｔｈｗｅｒｅ２５６，３５０，２９９ａｎｄ２２９ｎｍ，ｒｅｓｐｅｃｔｉｖｅｌｙＲｅｓｕｌｔ：Ｔｈｅｐｅｒｃｅｎｔａｇｅｒｅｃｏｖｅｒｉｅｓｗｅｒｅ
９８２％，９９５７％，１００５０％，ａｎｄ９９４６％ ｆｏｒｃｈｌｏｒｏｇｅｎｉｃａｃｉｄ，ｅｓｃｕｌｅｔｉｎ，ｌａｃｔｕｃｉｎ，ａｎｄｌａｃｔｕｃｏｐｉｃｒｉｎ，ｒｅｓｐｅｃｔｉｖｅｌｙＴｈｅｃｏｒｅｌａｔｉｏｎ
ｃｏｅｆｉｃｉｅｎｔｓ（ｒ）ｗｅｒｅ１０００，０９９８９，０９９９８，１０００ａｎｄＲＳＤｗｅｒｅ１６％，１５％，０７７％，２０％ ｆｏｒｃｈｌｏｒｏｇｅｎｉｃａｃｉｄ，ｅｓｃｕｌｅ
ｔｉｎ，ｌａｃｔｕｃｉｎ，ａｎｄｌａｃｔｕｃｏｐｉｃｒｉｎ，ｒｅｓｐｅｃｔｉｖｅｌｙＴｈｅｃｏｎｔｅｎｔｓｏｆｔｈｅｃｈｌｏｒｏｇｅｎｉｃａｃｉｄ，ｅｓｃｕｌｅｔｉｎ，ｌａｃｔｕｃｉｎａｎｄｌａｃｔｕｃｏｐｉｃｒｉｎｗｅｒｅ
０００４８，０００４３，０６７８９，０７５２０ｍｇ·ｇ－１，ｒｅｓｐｅｃｔｉｖｅｌｙｉｎｔｈｅｒｏｏｔ，ａｎｄ００７１０，０１８９０，０２３９６ａｎｄ００５２０ｍｇ·ｇ－１ｉｎ
ｔｈｅｓｅｅｄｓｏｆＣｇｌａｎｄｕｌｏｓｕｍ，ｒｅｓｐｅｃｔｉｖｅｌｙＣｏｎｃｌｕｓｉｏｎ：Ｔｈｉｓｍｅｔｈｏｄｗａｓｓｅｎｓｉｔｉｖｅ，ｒａｐｉｄａｎｄｓｉｍｐｌｅ，ｗｉｔｈｇｏｏｄｌｉｎｅａｒｉｔｙ，ｒｅｃｏｖｅｒｙ
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ｄｏｉ：１０．４２６８／ｃｊｃｍｍ２０１００８１７
［责任编辑 王亚君］
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