全 文 ：中草焉CbineueTraditionalandHerbalDrugs第38卷第11期2007年11月·1645·
寰3特征指纹■的相对峰面积
Table3 Relative弹^kareasofcharacteristic
fingerprinteaks
方法生产的山银花药材液相指纹图谱，系统地反映
了其山银花不同成分的全貌，可作为山银花不同产
地加工品的质量控制方法之一。由于样品数量有限，
只采集了安龙和贞丰2个产地的药材，但从图谱中
可以看出，2个产地的药材在化学组成及主要特征
指纹峰相对峰面积上投有显著差异。
山银花的加工主要蒸气脱水、机械化生产、机械
化炒干、土法蒸后烘干和强制通风干燥5种方法。从
指纹图谱的分析结果可以看出，5批样品的色谱图
整体相貌是相同的，说明不同产地加工方法的山银
花药材的化学组成一致性较好，质量稳定。但同时也
应看到各主要特征峰的相对峰面积还是有一定的差
别，如量较高的10、1l，12号色谱峰，在机械化生产
的山银花中分别高达1．329、1．282、1．765，而土法
蒸后烘干的山银花则分别只有0．653、0．650、
0．801}2号特征峰相对峰面积在土法蒸后烘干的山
银花中达到0．086，蒸气脱水、机械化生产和机械化
炒干的山银花则在0．025左右；7号特征峰相对峰
面积在机械化炒干的山银花中高于0．92，蒸气脱水
和机械化生产的山银花保持在0．82左右，但土法蒸
后烘干和强制通风干燥生产的药材则只有0．50。说
明山银花的加工方法不同，其药材的指纹图谱也有
较大的差异，对于选用合适的加工方法生产山银花
具有指导意义。
用药典委员会颁布的中药色谱指纹图谱相似度
评价系统2004A版1．0版对5批样品的数据进行
处理，得到了相关系数，按样品编号用平均数表示依
次为0．9953、0．987、0．9908、0．9511、0．9825，
用中位数表示依次为0．9741、0．9674、0．9727、
0．9352、0．9330。说明选用的特征指纹峰是恰当
的。据此，制定了真伪鉴别相似度值的标准，即相关
系数用中位数和均值表示均不得低于0．900，特征
指纹峰的相对保留时间RSD小于1，5％。但特征指
纹峰的相对峰面积积分值差异较大，建议在实际应
用中根据具体适应症选用固定的药材。
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RP—HPLC法测定血脂康胶囊中大豆苷元、黄豆黄素和染料木素
马学敏“2，郭树仁“”，段震文“2，王祥云1．李霄3
(1．北京大学化学与分子工程学院，北京100083I2．北京北大维信生物科技有限公司．北京100083
3．北京工业大学生命科学与生物工程学院．北京100022)
擅 要：目的建立血脂康胶囊中大豆苷元、黄豆黄素、染料木紊的测定方法。方法 采用反相高效液相色谱法，
YMC—C-a分析柱，乙腈一水(O．1“磷酸)梯度洗脱为流动相，检测波长256nm。结果大豆苷元、黄豆黄衮、染料木素
1。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。_。。。。。____●________’___●。●____________。。_____一
收穑日期：2007—0326
作者简介：马学敏(1976一)，女，山东蓬莱人，博士，现为北京大学与北京讹大维倌生物科技有限公司联合培养博士后．主要研究方向为
中药新药研发与中药指纹图谱。
-通讯作者郫树仁Tel：(010)51557550E—mail：guosrpku@263．net
万方数据
·1646· 中草焉ChineseTraditionalandHerbalDrugs第38卷第11期2007年11月
在测定范围内线性关系良好，平均加样回收率分别为97．8“、99．1“、97．9％，RSD分别为2．oz“、1．93％、1-84“
(n=5)。结论方法操作简便、准确、重现性好，可用于同时测定血脂康胶囊中大豆苷元、黄豆黄素、染料木素的量。
关t调：血脂康胶囊}大豆苷元I黄豆黄索}染料木素，高效藏相色谱
中圈分类号tR286．1 文献标识码：A 文章臻号：0253—2670(2007)11—1645—03
Determinationofda dzein，glycitein，andgenisteininXaezhikangCapsula
MAXRe—rainl一，GUOShu—tenl一，DUANZhen—wenl一，WANGXiang—yunl，LIXia03
(1．InstituteofCh mistryandMoleculeEngineering，PekingUniversity·Beijing100083，ChinaI2．BeijingWBL
PekingUniversityBiotechCo．，Ltd．，Beijing100083，Chinal3．Col egeofLifeScience＆Bioengineering,
BeijingU iversityofTechnology，Beijing100022，China)
Keywords：XuezhikangCapsula；daidzein；glycitein；genistein；HPLC
血脂康胶囊是以红曲为原料的制剂，具有降血
脂、抗动脉粥样硬化、抗癌、抗骨质疏松等l临床疗
效[1】。血脂康胶囊中含有大豆苷元、黄豆黄素、染料
木素等大豆异黄酮成分。大豆异黄酮具有抗癌、抗肿
瘤、降血脂、抗动脉粥样硬化等广泛的生物效应口。]。
其测定方法目前主要有比色法、纸色谱法、薄层色谱
法，气相色谱法和液相色谱法n“]。比色法干扰多，
专属性差．测定结果偏差大}纸色谱法和薄层色谱法
分离效果差，定量分析误差大I气相色谱法需要复杂
的前处理，影响结果的重现性。本实验采用HPLC
法同时对血脂康胶囊制剂中的活性成分大豆苷元、
黄豆黄素、染料木素进行了测定，为较全面地分析和
控制其质量提供了简便的方法。
1仪器与试药
岛津LC—zoAT高效液相色谱仪(日本岛津公
司)，SPD—M20A检测器，sIL一20A自动进样器，
CLASS--VP色谱工作站；MettlerAE200万分之一
电子天平(瑞士)。
大豆苷元、黄豆黄索、染料木素对照品为自制，
质量分数大于99％；血脂康胶囊由北大维信生物科
技有限公司提供；乙腈为色谱纯，水为重蒸水，其他
试剂为分析纯。
2方法与结果
2．1 色谱条件：YMC—ClB(250mm×4．6mm，5
“m)色谱柱I流动相：乙腈(A)-0．1％磷酸水溶液
(B)，梯度洗脱：0rain(25％A)一15rain(45％A)一
20rain(95％A)，检测波长为256nm；柱温为室温}
体积流量为1．0mL／min；进样量10pL。色谱柱理
论塔板数以大豆苷元峰计不低于3000。
2．z对照品溶液的制备：精密称取大豆苷元、黄豆黄
素、染料木素对照品适量，以MeOH—DMSO(1l 1)
准确配制成含大豆苷元6．8pg／mL、黄豆黄素4．0
pg／mL、染料木素12．0pg／mL的混合对照品溶液。
2．3供试品溶液的制备：取本品约0．3g，精密称定
后置于50mL圆底烧瓶中，加入30mL乙腈65℃水
浴提取3次，30min／次。合并3次提取液，减压蒸干，
残渣以MeOH—DMSO(1，1)转溶至5mL量瓶中，
并以MeOH—DMSO(1t 1)定容至刻度，摇匀，即得。
2．4标准曲线的制备：取混合对照品溶液，自动进
样2、4、6、8、10、12ptL，按上述色谱条件测定峰面
积。以峰面积积分值为纵坐标，对照品进样体积为横
坐标，绘制标准曲线，得回归方程。大豆苷元：y=
29952X+424．4，r=0．9999；黄豆黄素；Y=21073
X一809．4，，=1．0000；染料木素：Y=87470X+
453．0，，一1．000。结果表明大豆苷元在13．6～
81．6ng，黄豆黄素在8．0～48．0ng，染料木素在
24．0～144．0ng时，与峰面积呈良好线性关系。
2．5精密度试验：精密吸取混合对照品溶液，连续
进样6次 在上述色谱条件下测定对照品峰面积积
分值，其RsD分别为大豆苷元0．69％、黄豆黄素
0．98％、染料木素0．75％。
2．6稳定性试验：取同一供试品溶液，按上述色谱
条件分别在0、2、4、6、8h进样，测得供试品溶液中
大豆苷元、黄豆黄素，染料木素在8h内峰面积的
RSD分别为0．98％、1．34％、1．07％，说明供试品溶
液在8h内稳定。
2．7重现性试验：精密称取同一批血脂康胶囊内容
物0．3g，共6份，制备供试品溶液，进样测定。结果
大豆苷元质量分数为89．2pg／g、黄豆黄素54．4
腿／g、染料木素158．8ug／g，RSD分别为1．17％，
1．25％、0．97％。
2．8加样回收率试验：取同一批(大豆苷元89．2
pg／g、黄豆黄素54．4pg／g、染料木素158．8Pg／g)
的血脂康胶囊内容物0．15g，精密称定，共6份，分
别精密加入混合对照品溶液2mL(其中大豆苷元
6．8pg／mL、黄豆黄素4．0pg／mL、染料木素12．0
万方数据
中簟蒋ChineseTraditionalandHerbalDrngs第38卷第11期2007年11月·1647·
}tg／mL)，按供试品溶液制备方法处理，测定大豆苷
元、黄豆黄素、染料木素的质量分数，计算平均回收
率。结果大豆苷元97．8％、黄豆黄紊99．1％、染料木
素97．9％，RSD分别为2．02％、1．93％、1．84％。
2．9样品测定：取3批血脂康胶囊，每批重复测定
3次，外标法计算大豆异黄酮的质量分数，色谱图见
图1，结果见表l
“，川
B
1
l『
0 6 Il 16 21 26 jI
t／mln
l一大豆苷元2一黄豆黄素3一染料木素
I-deidiein2-glyciteia3-gemstem
圈1血脂康胶■(A)和混台对照品(B)的HPLC围
Fig．1HPLCChromatograntsofXuezhikangCapsula
(A)andmixedreferencesubstances(B)
3讨论
大豆苷元、黄豆黄素、染料木素的紫外最大吸收分
别是247、256、260nm，由于3者中黄豆黄素的量最
小，为提高其检测灵敏度，选择256nm为检测波长。
血脂康胶囊为红曲发酵产品，含大量色素类成
采1血脂康胶囊中异黄酮的测定结果抽一3)
Table1 DeterminationofboflavonesinXuezhikang
Capsuin(_=3)
分，以甲醇或75％乙醇作为提取溶剂时，色素类成
分提取得较多，提取液颜色很深，影响色谱柱寿命。
以乙腈作为提取溶剂，色素类成分提取得少，对色谱
柱损伤小。同时经过试验，使用乙腈加热回流提取3
次能将被测组分提取完全。
大豆异黄酮在各种溶剂中的溶解度较差，0．3g
血脂康胶囊内容物的乙腈提取物完全转溶至5mL
量瓶中也比较困难，选用MeOH—DMSO(1：1)作为
溶剂，可以很好地克服溶解问题，并且对色谱行为没
有影响。‘
笔者曾检测过样品中相应大豆苷量的情况，结
果发现血脂康胶囊中大豆苷的量极少，推测在发酵
过程中，苷在微生物的作用下转化成了相应的苷元。
根据文献报道[2]，苷元的生物活性较苷的生物活性
更强。
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《中草药》杂志被评为“第五届中国百种杰出学术期刊”
2006年lo月27日中国科学技术信息研究所公布了“第五届中国百种杰出学术期刊”名单，《中草药》杂
志获此殊荣——。第五届中国百种杰出学术期刊”。这个名单是按照期刊指标评价体系对重要指标(影响因
子、总被引频次、他引总引比、基金论文比和即年指标)进行打分的结果，并在近几年来召开了20余场专家研
讨会，对评价指标不断进行推敲和改进而评出的。
摘引自中国科学技术信息研究所《2005年度中国科技论文统计与分析年度研究报告》
万方数据
RP-HPLC法测定血脂康胶囊中大豆苷元、黄豆黄素和染料木素
作者： 马学敏， 郭树仁， 段震文， 王祥云， 李霄， MA Xue-min， GUO Shu-ren， DUAN Zhen-
wen， WANG Xiang-yun， LI Xiao
作者单位： 马学敏,郭树仁,段震文,MA Xue-min,GUO Shu-ren,DUAN Zhen-wen(北京大学化学与分子工程
学院,北京,100083;北京北大维信生物科技有限公司,北京,100083)， 王祥云,WANG Xiang-
yun(北京大学化学与分子工程学院,北京,100083)， 李霄,LI Xiao(北京工业大学生命科学
与生物工程学院,北京,100022)
刊名： 中草药
英文刊名： CHINESE TRADITIONAL AND HERBAL DRUGS
年，卷(期)： 2007,38(11)

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