全 文 ：乙素 ,宁国贝母中测到相对多量的西贝素 ,以前均未
见文献报道 ,有待进一步研究确证。西贝苷目前仅在
平贝母和伊贝母中发现 [9, 10 ] ,本实验结果与之相符。
从本研究结果来看 ,湖北贝母和宁国贝母中药效成
分含量相对较高 ,提示有进一步开发应用的价值。
参考文献:
[1]　钱伯初 ,许衡钧 . 浙贝母碱和去氢浙贝母碱的镇咳镇静作用
[ J ]. 药学学报 , 1985, 20( 4): 306-308.
[2 ]　王筠默 ,王恒芬 ,许长照 ,等 . 中药研究与文献检索 [M ] . 上
海:上海远东出版社 , 1994: 251-252.
[3 ]　 Rohm na A, Choudhary M , Farooq A, et al . St ructure-activi ty
relat ionships of im perialine deriv atives and thei r anticholiner-
gic activi ty [ J] . Plan ta Med , 1998, 64: 172-174.
[ 4]　李　萍 ,刘理南 ,徐国钧 . 12种贝母的西贝素含量测定 [ J] .中
草药 , 1991, 22( 5): 205-206.
[5 ]　晁若冰 ,胡　玲 . 高效液相色谱法测定贝母中贝母辛的含量
[ J] .药学学报 , 1993, 28( 9): 705-708.
[ 6]　吴宗好 ,李清华 . 皖贝母与浙贝母、川贝母有效成分生物碱的
对比分析 [ J] .中草药 , 1993, 24( 7): 351-353.
[7 ]　李文彦 ,毕开顺 ,乔延江 ,等 . 柱前衍生化高效液相色谱法测定
伊贝母中西贝素的含量 [ J ]. 中国药学杂志 , 1997, 32( 6): 363-
365.
[8 ]　徐汝明 ,陆　阳 ,陈泽乃 . 紫外分光光度法测定贝母中腺苷、胸
苷含量 [ J] .中国中药杂志 , 1997, 22( 11): 682-683.
[ 9 ]　徐东铭 ,张　本 ,祁　彦 ,等 . 平贝母生物碱研究 (Ⅱ ) [ J ]. 中
草药 , 1983, 14( 2): 7-8.
[10 ]　徐东铭 ,黄恩喜 ,王淑琴 ,等 . 伊贝母生物碱研究 [ J] .植物学
报 , 1990, 32( 10): 789-793.
RP-HPLC法测定大豆提取物中
大豆苷元、染料木素、大豆苷、染料木苷的含量
张　立
(西安天诚医药生物工程有限公司 ,陕西 西安　 710075)
摘　要: 目的　建立 RP-HPLC法分离检测大豆提取物中大豆苷元、染料木素、大豆苷、染料木苷 4成分含量的方
法。方法　用 Zo rbax SB-C18色谱柱 ,以甲醇-乙腈 -0. 1% 磷酸 ( 30∶ 8∶ 62)和甲醇 -乙腈 -0. 1% 磷酸 ( 16∶ 24∶ 60)
为流动相分别测定大豆苷元、染料木素和大豆苷、染料木苷 ,检测波长为 254 nm。结果　大豆苷元、染料木素、大豆
苷、染料木苷 4成分的平均回收率分别为 98. 7% , 99. 5% , 98. 4% , 98. 6% ; R SD分别为 1. 4% , 0. 9% , 0. 9% , 1. 7%
(n= 4)。 结论　方法简便、准确、重复性好。
关键词: 大豆苷元 ;染料木素 ;大豆苷 ;染料木苷 ; RP-HPLC
中图分类号: R927. 2　　　文献标识码: B　　　文章编号: 0253 2670( 2001) 02-0118 03
RP-HPLC determination of daidzein, genistein, daidzin and
genistin in soybean extract
ZHAN G Li
　　 ( Xi′an Tiancheng Drug & Bio-engineering Co. , Ltd. , Xi′an Shanxi 710075, China)
Abstract: Object　 A method fo r the determination of daidzein, g enistein, daidzin and genistin in soy-
bean ex t ract by RP-HPLC was established. Methods　 Zo rbax SB-C18 column ( 4. 6× 15 mm, 5μm) w as
used. Daidzein and genistein w ere sepa ra ted wi th mobi le phaseⅠ ∶ methanol-acetoni t ri le-0. 1% phospho-
ric acid so lution ( 30∶ 8∶ 62) . Daidzin and genistin w ere separated w ith mobile phaseⅡ∶ methano l-ace-
toni t rie-0. 1% phospho ric acid so lution ( 16∶ 24∶ 60) . The UV detection w aveleng th w as 254 nm. Results
　 The average recoveries of daidzein, genistein, daidzin and genistin w ere 98. 7% , 99. 5% , 98. 4% ,
98. 6% and the precision ( RSD ) were 1. 4% , 0. 9% , 0. 9% , 1. 7% ( n= 4) respectively. Conclusion: 　
The method was accurate, rapid and with good reproducibi li ty.
Key words: daidzein; g enistein; daidzin; genistin; RP-HPLC
　　异黄酮类成分是植物药提取领域公认的一类重 要物质 ,具有广泛的药理作用 [1 ]。此类成分在植物界
·118· 中草药　 Chinese T raditional and Herbal Drug s　 2001年第 32卷第 2期
收稿日期: 2000-06-23
主要分布在豆科蝶形花亚科中。 其中大豆提取物中
的异黄酮类成分因其明确的雌激素样作用等 ,用于
治疗妇女更年期综合症和骨质疏松等症 [2 ] ,有广阔
开发前景。 我们对大豆异黄酮成分中 4种主要成
分:大豆苷元、染料木素、大豆苷、染料木苷进行 RP-
HPLC测定。该方法的提出对此类成分的进一步研
究及开发提供重要依据。
1　仪器与试药
高效液相色谱仪 ,包括 Waters 600型泵、 486
紫外 -可见光检测器和大连化学物理研究所 WDL-
95工作站 ; Shimadzu 2101-PC型紫外分光光度计 ;
超声波清洗仪 ;大豆苷元、染料木素、大豆苷、染料木
苷对照品均购自 Sigma公司 ;大豆提取粉为自产和
市场贸易产品 ;乙腈、甲醇为色谱纯试剂 ;水为重蒸
水 ;试剂使用前均用 0. 45μm滤膜过滤 ;磷酸为分
析纯试剂。
2　方法与结果
2. 1　色谱条件:色谱柱: Zo rbax SB-C18 4. 6 mm×
150 mm 5μm;流速: 1. 0 mL /min;温度: 室温 ;检测
波长: 254 nm;进样量: 5μL;流动相 Ⅰ :甲醇 -乙腈 -
0. 1% 磷酸 ( 30∶ 8∶ 62) ;Ⅱ :甲醇 -乙腈 -0. 1%磷酸
( 16∶ 24∶ 60)。流动相Ⅰ用于测定大豆苷元和染料
木素 ,Ⅱ用于测定大豆苷和染料木苷。见图 1。
流动相Ⅰ 　　　　　　　　流动相Ⅱ
1-大豆苷元　 2-染料木素　 3-大豆苷　 4-染料木苷
图 1　样品 HPLC图
2. 2　工作曲线绘制:分别精密称取大豆苷元和染料
木素对照品各约 5 mg于 25 m L容量瓶中 ,再分别
称取大豆苷和染料木苷对照品各约 5 mg于另一 25
m L容量瓶中 ,分别用流动相Ⅰ 和Ⅱ定容。精密吸取
上述溶液 2. 5, 5. 0, 7. 5, 10. 0, 12. 5和 15. 0 mL,分
别在两种流动相下作工作曲线 ,结果见表 1。
2. 3　样品测定:精密称取大豆提取物 100 mg左右
表 1　 4种成分工作曲线
名称 线性范围 (μg) 回归方程 r
大豆苷元 0. 25～ 1. 0 Y= 5. 580 6X+ 0. 038 1. 000 0
染料木素 0. 5～ 4. 0 Y= 0. 673 6X+ 0. 188 0. 996 9
大豆苷 0. 5～ 2. 0 Y= 6. 804 6X+ 0. 289 0. 998 9
染料木苷 0. 5～ 2. 0 Y= 0. 747 6X - 0. 111 0. 999 8
于 50 mL容量瓶中 ,加入适量流动相超声波提取
15 min,用流动相定容。 用 0. 45μm滤膜过滤为供
试溶液。吸取对照品溶液和样品供试溶液进样 ,照上
述色谱条件测定 ,用外标法计算。 结果见表 2。
　　表 2　大豆提取物中 4成分含量测定结果
(% )
批号 大豆苷元 染料木素 大豆苷 染料木苷
990621 0. 6 0. 5 10. 4 13. 9
990809 0. 5 0. 6 10. 0 14. 0
990917 1. 0 0. 8 17. 1 21. 2
991023 0. 2 0. 2 6. 0 7. 6
991204 0. 2 0. 1 8. 0 9. 8
2. 4　精密度试验:吸取对照品溶液 ,反复进样测定
6次 ,其日内和日间峰面积误差 ,见表 3。
表 3　 4成分误差 RSD (% )
大豆苷元 染料木素 大豆苷 染料木苷
日内 0. 57 0. 86 0. 46 0. 35
日间 1. 17 2. 01 2. 16 1. 77
2. 5　回收率实验:精密称取已知含量的样品 ,分别
加入一定量的对照品溶液 ,依样品操作项下方法测
定 ,计算回收率。大豆苷元、染料木素、大豆苷、染料
木苷 回 收 率 分别 为 98. 7% , 99. 5% , 98. 4% ,
98. 6%。 RSD 分别为 1. 4% , 0. 9% , 0. 9% , 1. 7%
(n= 4)。
3　讨论
3. 1　测定波长的选择: 用紫外分光光度计测定 4
成分的紫外吸收光谱图 ,染料木素与染料木苷的
λmax为 ( 259± 1) nm,大豆苷元与大豆苷的 λmax为
( 250± 1) nm。为用流动相Ⅰ ,Ⅱ分别同时测定大豆
苷元、染料木素和大豆苷、染料木苷 ,故选 ( 254± 1)
nm作为检测波长。
3. 2　流动相选择:经过反复试验 ,我们确定了用流
动相Ⅰ ,Ⅱ分别同时测定大豆苷元、染料木素和大豆
苷、染料木苷 4成分 ,不但样品峰能得到很好的分
离 ,而且不受杂质峰干扰。此方法快捷、简便、准确 ,
较之梯度法具有对仪器要求低、稳定性好的特点。
3. 3　稳定性实验:将供试样品溶液放置 4℃ 冰箱
冷藏 ,定期进行分析测定 , 1月内基本保持不变。
致谢:本文在完成过程中得到了惠玉虎老师的
多方指导。
·119·中草药　 Chinese T raditional and Herbal Drug s　 2001年第 32卷第 2期
参考文献:
[1 ]　肖志艳 ,陈迪华 . 异黄酮类成分在植物界的分布、药理作用及
应用研究概况 [ J] . 国外医药 -植物药分册 , 1998, 13( 4): 157-
163.
[ 2 ]　毛峻琴 ,宓鹤鸣 .大豆异黄酮的研究进展 [ J] . 中草药 , 2000,
31( 1): 61-64.
中药口服液生产新工艺及其设备
李十中 ,吴丽莉 ,陈　炜
(天津大学化工学院 ,天津　 300072)
摘　要: 目的　提出一种中药口服液生产新工艺 ,解决原工艺口服液沉淀问题 ,可有效地保留药物有效成分 ,连续
化生产。 方法　设计制作了超滤设备 TUO L-1型口服液过滤装置。结果　既保持了药液的滤速 ,又使膜受外力最
小 ,使超滤膜能够适用于浊度高、粘度大的中药液处理。结论　适用于中药口服液生产 ,应用效果良好。
关键词: 中药口服液 ;超滤设备 ;生产新工艺
中图分类号: TQ461　　　文献标识码: B　　　文章编号: 0253 2670( 2001) 02 0120 03
New process and its equipment for production of TCM oral liquid
L I Shi-zhong , WU Li-li, CHEN Wei
　　 ( Schoo l of Chemical Engineering , T ianjin Univ e rsity , Tianjin 300072, China )
Abstract: Object　 A new process fo r the continuous production of TCM oral liquid w as proposed
w ithout handicapped by the problem of sediment forma tion and loss of activ e ingredients. Methods　 By de-
signing and instal la tion of an ul t rafi lt ration equipment ( Type T UO L-1) which may inflict a minimal ex ter-
nal fo rce on the filtering membrane whi le maintaining a no rmal fi lt ration ra te. Results　 The equipment
w as found to be sui table fo r the fil t ra tion o f highly viscous and turbid TCM oral liquid. Conclusion　 The
new ult rafilt ration equipment show ed satisfactory results af ter y ears of t rials.
Key words: TCM oral liquid; ul t rafi lt ration equipment; new production process
　　目前国内中药口服液制剂工艺尚需改进 ,主要
表现在制剂菌检和澄明度两项指标不合格 ,药物有
效成分损失严重 ,能耗物耗大 ,生产周期长。中药口
服液中的鞣质、树脂、淀粉、果胶、粘液质、色素等在
制剂中常视为杂质而被除去 [1, 2 ] ,但由于现行生产技
术水平所限 ,有部分杂质未能除尽 ,在放置过程中成
品会出现沉淀 [3 ]。 中药口服液生产主要采用水提醇
沉法或渗漉法。水提醇沉法各种药物有效成分 (黄酮
类、皂苷类、生物碱类、有机酸类 )一次醇沉损失率约
在 10% ～ 15% [4 ];而渗漉法生产的蜂乳精 ,据天津
药物研究院测定 ,某厂按配方配制的药液中人参皂
苷含量为 0. 194 mg /10 m L,而到成品灌装时其含
量仅为 0. 039 mg /10 mL,仅占配方含量的 20. 1% ,
大部分在冷冻静置和过滤过程中损失掉了。
中药口服液中的高分子杂质具有亲水基和疏水
基 ,其水溶液为胶体溶液 ,是产品产生沉淀的主要原
因。 膜分离技术的发展为去除中药口服液中的高分
子杂质提供了一种新方法 ,超滤是溶液中大、小分子
分离的最理想的单元操作。一般中药有效成分的相
对分子质量较小 ,而无效成分的相对分子质量较大 ,
所以应用超滤法可以在不损失药物有效成分的前提
下去除高分子杂质 [5 ]。由于中药提取液浊度高、粘度
大 ,超滤法在中药口服液中的应用还处于实验探索
阶段 ,尚无应用于工业生产的技术与设备 [6～ 8 ]。作者
根据皂苷分子性质选择适当的超滤膜 ,设计制作了
超滤设备 T UO L-1型口服液过滤装置 ,既保持药液
的滤速 ,又使膜受外力最小 ,因而使强度较弱的超滤
膜能够适用于中药口服液的生产 ,并应用于生产多
年 ,取得良好效果。
1　生产流程及设备
·120· 中草药　 Chinese T raditional and Herbal Drug s　 2001年第 32卷第 2期
收稿日期: 2000-04-19
* 天津大学医院