全 文 ：HPLC法测定川牛膝中杯苋甾酮的含量△
沈阳药科大学 ( 110015)　　马　英 　毕开顺* *　王　玺　周　欣
香港中文大学中医学院　　车镇涛
摘　要　用反相高效液相色谱法对 16个不同产地的川牛膝中所含的杯苋甾酮进行了含量测定。色谱柱为 Hypersil
ODS柱 ,流动相: 乙腈 -水 ( 1∶ 4. 9) ,流速: 0. 9 m L /min,检测波长: 243 nm,线性范围 1. 91～ 38. 28μg , r= 0. 999 9,
平均回收率 93. 1% ( n= 6)。 本法简便、快速、灵敏 ,适合川牛膝中杯苋甾酮的定量分析。
关键词　川牛膝　杯苋甾酮　反相高效液相色谱法
Determination of Cyasterone in Medicinal Cyathula
(Cyathula off icinalis ) Root by RP-HPLC
　　 Shenyang Pha rmaceutical Univ ersity ( Shenyang 110015)　 Ma Ying , Bi Kaishun, Wang Xi and Zhou Xin
　　Colleg e o f TCM , th e Chinese Univ ersity o f Hong Kong　 Che Zhentao
Abstract　　 A RP-HPLC method fo r the separation and determina tion of cyasterone in the roo t of
Cyathula of f icinalis Kuan was described. The column was 200 mm× 4. 6 mm. ID, packed wi th Hypersil
O DS ( 5μm) . The determina tion was ca rried out wi th CH3 CN-H2O ( 1∶ 4. 9) as the mobile phase, at a
f low rate of 0. 9 mL /min and detected at 243 nm. The relative standa rd dev iation o f the method w as 1. 9%
. The calibration curv e show ed good lineari ty ov er the range o f ( 1. 91～ 38. 28)μg , r= 0. 999 9. The mean
recovery was 93. 1% . The method w as show n to be simple, rapid, sensi tive and accurate and could be used
fo r the analysis o f C. of f icinal is f rom di fferent sources.
Key words　　Cyathula of f icinalis Kuan　 cyasterone　 RP-HPLC
　　川牛膝 Cyathula of f icinal is Kuan为苋科植物
川牛膝或头花蒽草的根。化学成分主要为生物碱和
甾酮类 ,如:杯苋甾酮 ( cyasterone)、头花蒽草甾酮
等 [1 ]。其味甘、微苦、性平 ,具有活血祛瘀、祛风利湿
之功效。现代药理研究证明 ,川牛膝具有抗生育、活
血、利胆、降脂等作用。 川牛膝与其它中药配伍组成
复方 ,治疗痛经、大骨节病、小儿麻痹后遗症、热淋及
牙龈肿痛 ,效果良好 [ 2] ,有较高的药用开发价值。我
们采用反相高效液相色谱法 ,测定了 16个不同产地
川牛膝中杯苋甾酮的含量 ,方法简便、快速、灵敏。
1　仪器与试药
岛津 LC-10AD液相色谱仪 , SPD-10A检测器 ,
C-R6A积分仪。 试剂:乙腈、甲醇为色谱纯 ,无水乙
醇、正丁醇为分析纯 ,水为重蒸水。
对照品杯苋甾酮由四川省中药研究所提供。药
材川牛膝样品购自各地药材公司或药店 ,由沈阳药
科大学许春泉高级工程师鉴定。
2　方法与结果
2. 1　色谱条件: 色谱柱: Hypersil-ODS( 200 mm×
4. 6 mm ID, 5μm);流动相:乙腈-水 ( 1. 0∶ 4. 9) ;流
速: 0. 9 m L /min;检测波长: 243 nm;柱温: 室温 ;灵
敏度: 0. 08 AU FS。
2. 2　标准曲线的绘制: 精密称取杯苋甾酮对照品
9. 57 mg,置 10 m L容量瓶中 ,用甲醇溶解并定容至
刻度 ,摇匀 ,制成储备液。精密吸取 0. 05, 0. 2, 0. 4,
0. 6, 0. 8和 1. 0 m L置 25 mL容量瓶中 ,用甲醇定
容至刻度 ,摇匀 ,制成系列浓度溶液。微孔滤膜过滤 ,
依次吸取续滤液 20μL,按上述色谱条件进行分析 ,
测定峰面积。 以对照品含量 ( mg )为横坐标 (X ) ,对
照品峰面积 ( A )为纵坐标 (Y ) ,得回归方程 ,相关系
数及线性范围为: Y= 1. 16× 107X - 4. 48× 103 , r=
0. 999 9, 1. 91～ 38. 28μg。
2. 3　样品溶液的制备:精密称取川牛膝干燥粉末 1
g ,置索氏提取器中 ,加无水乙醇 100 mL,回流提取
16 h。回收溶剂 ,残渣用 10 mL蒸馏水微温溶解 ,转
入 125 mL分液漏斗中 ,再用 10 mL微温蒸馏水分
·427·中草药　 Chinese T raditional and Herbal Drug s　 2000年第 31卷第 6期
Address: Ma Ying, Shenyang Pharmaceut ical Universi ty, Shenyang马　英　女 , 1997年毕业于沈阳药科大学日语药学班 ,获理学学士学位 ,现在该校攻读药物分析学硕士学位。
* * 毕开顺　男 , 1990年毕业于沈阳药科大学 ,获理学博士学位 , 1991～ 1994年赴香港中文大学从事博士后研究工作。现任沈阳药科大学药学系主任 ,药物分析学博士研究生导师 ,《药学学报》编委 ,国家新药评审委员会委员。 已发表学术论文 60余篇。
3次洗涤仪器和残渣 ,用水饱和的正丁醇 ( 10 mL× 5
次 )萃取 ,合并萃取液 ,挥干溶剂 ,用甲醇溶解 ,定量
转移至 25 mL容量瓶中 ,加甲醇稀释至刻度 ,摇匀 ,
微孔滤膜过滤 ,取续滤液备用。
2. 4　精密度试验: 精密称取 1 g川牛膝样品
( No. 13) 5份 ,按样品溶液制备法制备 ,在上述色谱
条件下取 20μL进样分析 ,计算精密度 ,结果杯苋甾
酮含量为 2. 24× 10-2 mg /g (n= 5) , RSD= 1. 9%。
2. 5　回收率试验: 精密称取 1 g川牛膝样品
( No. 13) 6份 ,分别精密加入对照溶液 0. 2, 0. 2,
0. 2, 0. 4, 0. 4和 0. 4 m L,按样品溶液制备法制备 ,
在上述色谱条件下取 20μL进样分析 ,计算回收率 ,
结果为 93. 1% , RSD= 2. 7% (n= 6)。
用本法对 16个不同产地的川牛膝中所含的杯
苋甾酮进行含量测定 ,结果见表 1,色谱图见图 1。
表 1　不同产地川牛膝中杯苋甾酮的含量测定
样品 　来源 含量 ( mg /g)
1 江西丰城 2. 62× 10-2
2 四川雅安 4. 70× 10-3
3 云南昆明 2. 87× 10-2
4 江苏扬州 1. 90× 10-2
5 四川彭县 5. 43× 10-3
6 浙江金华 3. 32× 10-2
7 辽宁沈阳 3. 19× 10-2
8 内蒙 3. 07× 10-3
9 陕西西安 1. 61× 10-2
10 江西南昌 1. 97× 10-2
11 山东济宁 2. 07× 10-2
12 湖北 3. 48× 10-2
13 四川合川 2. 24× 10-2
14 四川资中 1. 50× 10-2
15 云南 2. 81× 10-2
16 山西长治 7. 60× 10-3
A-对照品　　　 B-样品
图 1　样品色谱图
3　讨论
3. 1　根据文献 [3 ]对称样量和提取时间进行考察。称
样量考察了 1, 2, 3 g ,提取时间考察了 12, 14, 16和
18 h。结果表明 , 1 g样品回流提取 16 h使杯苋甾酮
提取完全。考察稳定性发现 ,放置一周对含量测定无
影响 ,表明杯苋甾酮很稳定。
3. 2　比较不同系统和比例的流动相 ,如甲醇 -水 ,乙
腈 -水系统 ,结果表明以乙腈-水 ( 1∶ 4. 9)为流动相 ,
分离效果较好。
3. 3　从样品含量测定结果看 ,不同产地的样品中杯
苋甾醇含量不同。道地川牛膝中杯苋甾醇含量并不
最高 ,是否能以杯苋甾酮含量的多少来评价药材质
量的优劣有待于进一步研究。
参 考 文 献
1　江苏新医学院编 . 中药大辞典 . 上册 . 上海:上海人民出版社 ,
1997: 227
2　国家中医药管理局《中华本草》编委会 . 中华本草 .上册 .上海:
上海科学技术出版社 , 1996: 414
3　舒元瑜 ,等 .中成药 , 1992, 14( 1): 37
( 1999-07-07收稿 )
膜材质及截留值对中药超滤通量影响的研究△
中国中医研究院基础理论研究所 (北京　 100700)　　欧兴长 　李淑莉
天津纺织工学院膜天公司　　　　　　　　　　　　杜启云
摘　要　用两种材质和 3种截留值的超滤膜 ,超滤 5种中药提取液以及鞣质、果胶和蛋白溶液 ,测量了相对通
量的变化 ,结果表明 ,膜材质和膜孔径对超滤通量有重要的影响。
关键词　超滤　膜材质　膜截留值
·428· 中草药　 Chinese T raditional and Herbal Drug s　 2000年第 31卷第 6期
Address: Ou Xingchang, Basic In sti tute, Chinese Academy of Tradi tional Chinese M edicine, Bei jing欧兴长　 1964年毕业于北京大学 ,留校。 1980年调入中国中医研究院基础所 ,现任中药化学室主任、研究员。 由 W HO资助 , 1983～ 1984年赴美国进修一年。长期从事中药化学研究工作 ,先后主持过“八· 五”攻关、国家自然科学基金及部局级研究课题。主要著作有《活血化瘀药化学、药理与临床》、《水蛭的临床及研究进展》等。 共发表论文 50多篇。△本文系国家自然科学基金会项目研究内容 (批准号　 39470844)